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1、关于艾滋病实验室检查PPT现在学习的是第1页,共19页2实实 验验 室室 检检 查查现在学习的是第2页,共19页3免疫学检测免疫学检测AIDSAIDS患者患者正常正常(10109 9/L)/L)CD4CD40.20.21(0.81(0.81.2)1.2)CD4/CD8CD4/CD8111.21.22.12.1淋巴细胞总淋巴细胞总数数112 23 3现在学习的是第3页,共19页4血清学检测血清学检测()()ELISA(酶联免疫试(酶联免疫试验)验)现在学习的是第4页,共19页5血清学检测血清学检测()()Western blot(免疫印迹试验(免疫印迹试验)现在学习的是第5页,共19页6血清学检
2、测()血清学检测()ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高(敏感性很高(7 710 pg/ml10 pg/ml)特异性稍差(可有假阳性特异性稍差(可有假阳性)现在学习的是第6页,共19页7RT-PCR(逆转录(逆转录-聚合酶链反应)聚合酶链反应)核酸定量技术原理PCRPCR:高温变性:高温变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延伸(72)(72);经;经25302530个个循环,成倍数扩增循环,成倍数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR:比常规:比常规PCRPCR多一个寡聚核苷酸多一个寡聚核苷酸探针(带一个荧光发光分子和一个荧光淬探针(带一个荧光发光
3、分子和一个荧光淬灭分子)灭分子)应用:应用:PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA;RT-PCRRT-PCR查血浆查血浆中的病毒中的病毒RNARNA现在学习的是第7页,共19页8淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂交(Northern blot)原理:原理:RNA RNA片段经电泳分离片段经电泳分离,从凝胶中转移到硝酸纤维,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜,再用探针杂交素滤膜,再用探针杂交现在学习的是第8页,共19页9Sanger测序法测序法 原理:核酸扩增时,核苷酸在某一固原理:核酸扩增时,核苷酸在某一固定点开始,随机在某一特定的碱基定点开始
4、,随机在某一特定的碱基处终止,产生处终止,产生A A、T T、C C、G G四组不同四组不同长度的一系列核苷酸,通过在尿素长度的一系列核苷酸,通过在尿素变性的变性的PAGEPAGE胶上电泳,获得胶上电泳,获得DNADNA序列序列现在学习的是第9页,共19页10l血浆、单核细胞、脑脊液可分离出血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIVl操作复杂,主要用于科研操作复杂,主要用于科研现在学习的是第10页,共19页11诊诊 断断现在学习的是第11页,共19页12流行病学史流行病学史:有静脉注射毒品史;多个性伴和不洁性生活史;有静脉注射毒品史;多个性伴和不洁性生活史;输入未经输入未经HIV抗体检测的血液和血制
5、品史;抗体检测的血液和血制品史;HIV抗体阳性所抗体阳性所生的子女;其它(如职业暴露或医源性感染史)。生的子女;其它(如职业暴露或医源性感染史)。临床表现:临床表现:高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现,高危对象出现上感样及单核细胞增多症样表现,颈、腋及颈、腋及枕部淋巴结肿大,肝脾肿大,可考虑急性枕部淋巴结肿大,肝脾肿大,可考虑急性HIV感染。感染。无症状期、艾滋病期临床表现。无症状期、艾滋病期临床表现。实验室检查实验室检查:HIV抗体阳性,并经确证试验确认。抗体阳性,并经确证试验确认。CD4+T淋巴细胞数明显减少。淋巴细胞数明显减少。HIV RNA和和P24抗原的检测有助于抗原的检测有助
6、于早期诊断新生儿的早期诊断新生儿的HIV感染。感染。现在学习的是第12页,共19页13l急性期急性期 流行病学史、临床表现、流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性l无症状期无症状期 流行病学史、流行病学史、HIV抗体阳性抗体阳性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体阳性抗体阳性 现在学习的是第13页,共19页14l艾滋病期艾滋病期 流行病学史,流行病学史,HIV抗体阳性,临床表现有下列一项抗体阳性,临床表现有下列一项或以上或以上反复发生、难治性肺部反复发生、难治性肺部感染或进展迅速的活动性结核病;感染或
7、进展迅速的活动性结核病;14.14.中枢神经系统受中枢神经系统受损、占位性病变或中、青年痴呆症;损、占位性病变或中、青年痴呆症;15.15.卡波西肉瘤或卡波西肉瘤或淋巴瘤。淋巴瘤。现在学习的是第14页,共19页15 HIV抗体阳性抗体阳性 CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm200/mm3 3 无上述表现或症状无上述表现或症状现在学习的是第15页,共19页16l原发性原发性CD4+淋巴细胞减少症淋巴细胞减少症 无HIV感染流行病学资料,HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。l继发性继发性CD4+淋巴细胞减少淋巴细胞减少 肿瘤和自生免疫性疾病(autoimmune disease)化疗或免疫抑制治疗后。现在学习的是第16页,共19页17预预 后后现在学习的是第17页,共19页18感染的感染的HIV型别及亚型:型别及亚型:HIV-1较较HIV-2临床进展快临床进展快并发的机会性感染:并发的机会性感染:同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高;同时合并卡波济肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高;合并丙型肝炎者预后差合并丙型肝炎者预后差抗逆转录病毒治疗:抗逆转录病毒治疗:治疗改变了艾滋病进程治疗改变了艾滋病进程 现在学习的是第18页,共19页2022-9-7感谢大家观看感谢大家观看现在学习的是第19页,共19页
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