细菌培养及报告单解读.ppt

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1、现在学习的是第1页，共20页抗生素的概述 抗生素大家实际上不陌生了，严格意义上讲，抗生素就是在非常低浓度下对所有的生命物质有抑制和杀灭作用的药物。抗生素的作用 杀灭感染我们的微生物，目的是把病原体杀灭，控制疾病，以最终治疗疾病抗生素的3要素 1选药 2用量 3用法现在学习的是第2页，共20页标本类型标本类型全年送检量全年送检量（人次）（人次）全年阳性检全年阳性检出量（人次）出量（人次）阳性检出阳性检出百分比百分比痰液痰液10811375934.77%尿液尿液136053739.48%各种分泌各种分泌物及导管物及导管尖端尖端139375238.50%静脉血静脉血7452108714.58%脑脊液

2、、脑脊液、骨髓骨髓135821615.90无菌体液无菌体液51011322.15%现在学习的是第3页，共20页 正确采集标本 医学实验中心微生物组在保证检验质量的工作中，坚持不断的持续改进，优化操作流程。从标本接收到及时查对，选择正确的培养基、按要求接种、培养、分纯，仪器鉴定及药敏试验。经仪器鉴定到种的细菌结果经组内有经验的人员判断结果，发出最终报告（准确率在90%以上）。因细菌生长需要足够时间，故微生物组培养加药敏试验所需时间较长，因此一份合格的标本对微生物来说显得尤为重要，高质量的标本是质量保证的前提，只有实验室收到符合要求的标本，才能保证后续的培养鉴定及药敏检测结果的准确性，时效性。如何

3、正确采集各类标本呢？现在学习的是第4页，共20页 用温开水清洗或漱口去除口腔表面菌 从肺深部咳出痰液，采集到无菌容器内 采集量：无菌容器1mL 送检要求：2h常温 对于不能自主留取标本的患者，应经抽吸获得 一天中仅需送检1次，无需多次重复送检相同标本 用于检查结核分枝杆菌时，为了提高阳性率，应收集24h痰液现在学习的是第5页，共20页 在未使用抗生素之前采集标本，注意避免消毒剂污染标本 最好留取早晨清洁中端尿，采集量：无菌管3mL 送检要求:2h常温 需导尿的病人：采集前用70%异丙基乙醇消毒导管采集部位长机采集无菌尿液5-10mL 标本不能直接从导尿袋放出，易孳生污染菌细菌 一天中仅需送检1

4、次，无需多次重复送检相同标本 结核分枝杆菌集菌检查：留取24h尿液，取沉淀部分送检。现在学习的是第6页，共20页 挑取脓血、粘液部分的粪便23g置大便 于专用无菌培养容器内，如为稀水便，可 直接收集12mL于专用培养杯中，盖好塞 子，及时送检。试管中不可混入尿液等异 物及其它化学药品。若做厌氧菌培养则领取专用厌氧拭子由肛 门插入约67cm，轻轻旋动取出大便少许，放回厌氧拭子培养试管中，盖好塞子，灭 菌封口送检。标本需1h内送检，操作中应严格执行无菌技术 现在学习的是第7页，共20页培养瓶的消毒：用70%异丙基乙醇消毒橡胶塞30s静脉穿刺消毒：严格按照皮肤消毒步骤 操作（酒精-碘酊-酒精）。血液

5、培养须特别注意消毒，因许多微生物，尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表层处，易造成污染。天气寒冷时要注意脑脊液标本应在保温条件下送 检，以免病原菌死亡，送检要求：1h常温禁止冷藏血培养的采样时间：在寒战出现时或发热初期采集血培养最佳建议从不同部位采2-3套（一套为1瓶需氧+1瓶厌氧血培养瓶）如不能立即送检，应置于室温，禁止放入冰箱。血培养专用瓶成人：8-10mL/瓶；婴幼儿：1-5mL/瓶现在学习的是第8页，共20页 注意彻底消毒，因许多微生物，尤 其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或 近表层处，易造成污染 尽可能留取多量标本 采集时间应在患者用抗菌药物之前，或停止用药12日后，或下次用药前，或药物

6、浓度较低时抽取，胸水及腹水一般抽取510mL，心包液、关节液一般抽取15mL，2、疑为厌氧菌感染时，取材后立即将注射器内空气排空，无菌操作注入35mL穿刺液于厌氧血培养瓶内，及时送检现在学习的是第9页，共20页 封闭性脓肿：先用碘酒或 碘伏消毒患者病灶局部的皮肤或粘膜表面，再用75的酒精脱碘，以无菌干燥注射器穿刺抽取，将采集的脓汁无菌操作注入510mL灭菌培养管中，如怀疑是厌氧菌应领取专用厌氧拭子做厌氧培养并建议同时做一般细菌涂片镜检 开放性脓肿和病灶分泌物：对采样部位，应先用灭菌生理盐水洗净病灶表面的污染物，对表皮、粘膜应充分消毒，采集病灶部位脓性分泌物于灭菌培养管或灭菌棉拭子试管内，立即送

7、检。现在学习的是第10页，共20页选用药物根据卫生部规定使用的标准，依据CLSI（美国临床实验室标准化 委员会）标准来选择。微生物组现采用两种药敏检测方法：MIC法（定量药敏）KB法（定性药敏）。住院病人采用上机MIC法，商品化的药敏试卡，卡中所包含药物的种类的是固定的，实验室会 定期更换药敏试卡，在选择试卡的过程中充分与药剂科共同沟通，尽可能选择我院药剂科能提供的抗生素。现在临床需要实验室提供临床常用药物敏感试验如“头孢硫醚“等这类药物但CLSI无判断标准，国内也无相应的药敏纸片，虽临床有需求，实验室无法提供药敏实验。同时有些分离鉴定出的细菌，对某些类抗菌药物是天然耐药的（如肠球菌对头孢类抗

8、生素天然耐药），实验室药敏试验则不考虑这类药物。现在学习的是第11页，共20页AST-GN04 革兰氏阴性药敏卡Amikacin 阿米卡星Ampicillin 氨苄西林Ampicillin/Sulbactam 氨苄西林/舒巴坦Aztreonam 氨曲南Cefazolin 头孢唑啉Cefepime 头孢吡肟Cefotetan 头孢替坦Ceftazidime 头孢他啶头孢他啶Ceftriaxone 头孢曲松Cefuroxime 头孢呋辛Ciprofloxacin 环丙沙星Gentamicin 庆大霉素Imipenem 亚胺培南Levofloxacin 左氧氟沙星Nitrofurantoin 呋喃妥

9、因Piperacillin 哌拉西林Piperacillin/Tazobactam 哌拉西林+他唑巴坦Ticarcillin/Clavulanic Acid替卡西林/棒酸Tobramycin 妥布霉素Trimethoprin/Sulfa 复方新诺明AST-P535(22067)葡萄球菌、肠球菌、葡萄球菌、肠球菌、B组链球菌组链球菌Ampicillin 氨苄西林Ampicillin/Sulbactam 氨苄西林/舒巴坦BenzyPenicillin 青霉素GCiprofloxacin 环丙沙星Clindamycin 氯洁霉素Erythromycin 红霉素Fosfomycin 磷霉素Fusidi

10、c A cid 呋西地酸Gentamicin 庆大霉素Gentamicin High level 高浓度庆大霉素(协同)Imipenem 亚胺培南Linezolid(Zyvox)利奈唑烷Moxifloxacin 莫西沙星Oxacillin MIC NCCLS 苯唑西林Oxacillin Breakpoint 苯唑西林临界点Quinupristin/Dalfoprsifin 喹努普汀/达福普汀Rifampin 利福平StreptomycinHigh Level 高浓度链霉素(协同)Teicoplarin 替考拉宁Tetracycline 四环素Trimethoprin/Sulfamethoxaz

11、ole 复方新诺明Vancomycin 万古霉素现在学习的是第12页，共20页 含盖各类抗生素以及抗生素的不同代数（包括青霉素类、头孢类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、单环内酰胺类及叶酸代谢途径抑制剂等）大部分为临床常用药物 满足临床约90%的用药需求 代表药的耐药性可预示同类抗生素的耐药性现在学习的是第13页，共20页嗜麦芽窄食单胞菌 其具有复杂的耐药机制，外膜通透性低，对多种抗生素不易渗透，可产生多种B-内酰胺酶，如青霉素酶，头孢菌素L2酶以及金属锌酶，因此对B-内酰胺类，氨基糖苷类，喹诺酮类抗生素耐药，同时对碳青酶烯类抗生素也耐药 由于嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性较强，依据CLSI选择

12、K-B法药敏实验，包括四环素类（米诺环素)、氟喹诺酮类（左氧氟沙星）、叶酸代谢途径抑制剂（复方新诺明）这3种药报告临床现在学习的是第14页，共20页肺炎链球菌从脑脊液中分离的肺炎链球菌应测试青霉素、头孢噻肟或头孢曲松、美罗培南及万古霉素的MIC值对于非膜炎分离株，青霉素MIC能预报菌株对其他内酰胺酶类敏感性的药物如：青霉素MICs=20mm）提示分离菌株对氨苄西林（口服或注射）、氨苄西林/舒巴坦、头孢克洛、头孢地尼、头孢托仑、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢唑肟、头孢呋辛、亚胺培南、氯碳头孢和美罗培南敏感。青霉素MICs=2ug/ml提示对一下药物敏感：阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢吡肟、头孢噻肟

13、、头孢曲松和厄他培南现在学习的是第15页，共20页鲍曼不动杆菌鲍曼不动杆菌为非发酵革兰阴性杆菌，该菌是医院感染的重要病原菌，对常用抗生素的耐药率有逐年增加的趋势，Ab约占临床分离的不动杆菌的70%以上。Ab对第三代和第四代头孢菌素的耐药率已达63.0%89.9%。对三种氨基糖苷类（庆大酶素、奈替米星、妥布霉素）和环丙沙星的耐药率菌达96.3%。我院目前的绝大多数菌株对亚胺培南、美罗培南等也产生了不同程度的耐药实验室结合临床目前治疗措施，追加了头孢派酮/舒巴坦、多黏菌素B、米诺环素及亚胺培南的K-B法药敏对仪器报告结果进行补充以满足临床需求由于CLSI中对头孢哌酮/舒巴坦及多粘菌素B无判断指标，

14、实验室只报告抑菌圈直径未标注敏感与耐药。现在学习的是第16页，共20页现在学习的是第17页，共20页 阴性结果报告 血培养如培养至第5天，未见细菌生长，方可发出阴性报告，“经鉴定无细菌生长”阳性结果报告 报告通常分为三级；一级报告 阳性报警血培养瓶应进行涂片革兰染色，将涂片染色结果在实验室信息系统（LIS）“预报告处理”栏处报告危急值。电话通知临床联系人，在“备注”栏记录“XXX培养阳性”，“革兰XX菌”，与临床联系人姓名和检验者姓名；二级报告 在实验室信息系统（LIS）“预报告处理”栏处报告直接药敏试验结果；三级报告 报告细菌种属、药敏试验、结果评价和建议，同时置警告标志；现在学习的是第18页，共20页 对于血培养，无菌体液培养、脑脊液培养及骨髓培养报告时限为5-7天 一般细菌培养发放时限为3-5天 对于难鉴定的细菌最迟发放时限为10天 若10天后尚未鉴定出结果则应向临床科室发放延时报告通知，告知情况。现在学习的是第19页，共20页感谢大家观看感谢大家观看现在学习的是第20页，共20页