高效液相色谱分析 (5)精选PPT.ppt

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1、关于高效液相色谱分析(5)现在学习的是第1页，共42页该方法的几个突出特点：该方法的几个突出特点：(1)(1)高压：高压：液相色谱以液体作为流动相液相色谱以液体作为流动相(称为载液称为载液)，液，液 体流经色谱柱受到的阻力较大，为使体流经色谱柱受到的阻力较大，为使载液迅载液迅 速通过速通过色谱柱，必须对载液施加高压。一般色谱柱，必须对载液施加高压。一般 可达到可达到150150300kg/cm300kg/cm2 2。(2)(2)快速：快速：由于使用了高压，由于使用了高压，HPLCHPLC所需的时间较之经典所需的时间较之经典 液相色谱短得多，如分离苯的羟基化合物七液相色谱短得多，如分离苯的羟基化

2、合物七 个组分，只需个组分，只需1 1分钟；分钟；对氨基酸的分离，对氨基酸的分离，现在学习的是第2页，共42页经典液相色谱需用经典液相色谱需用2020小时才能分离出小时才能分离出2020种氨基酸，而种氨基酸，而HPLCHPLC只需只需1 1小时即可完成。小时即可完成。载液在色谱柱内的流速可载液在色谱柱内的流速可达达1 110mL10mLminmin-1-1。(3)(3)高效：高效：气相色谱的柱效（气相色谱的柱效（n n值）约为值）约为20002000塔板塔板/m/m，而，而高效高效液相色谱约为液相色谱约为50005000塔板塔板/m/m以上；一根以上；一根高效液相色谱柱高效液相色谱柱可同时分离

3、多达可同时分离多达100100种以上的组分。种以上的组分。(4)(4)高灵敏度：高灵敏度：由于在由于在HPLCHPLC中使用高灵敏度的检测器，如紫外检中使用高灵敏度的检测器，如紫外检测器的最小检测量可达测器的最小检测量可达1010-9-9g g，荧光检测器荧光检测器现在学习的是第3页，共42页可达可达1010-11-11克；所需试样为微升级。克；所需试样为微升级。HPLCHPLC与与GCGC相比较的突出优点：相比较的突出优点：用用GCGC法分析样品须先气化，目前已知的有机法分析样品须先气化，目前已知的有机 物中，能直接采用物中，能直接采用GCGC法进行分析的仅占法进行分析的仅占20%20%。而

4、而HPLCHPLC法则不受此限制，尤其适合于分析生法则不受此限制，尤其适合于分析生 物、医学方面的大分子及离子型化合物。物、医学方面的大分子及离子型化合物。HPLCHPLC方法中，有两个相与样品分子相互作用方法中，有两个相与样品分子相互作用 ，而，而GCGC方法方法中一般认为只有一个相与样品分中一般认为只有一个相与样品分 子相互作用。所以子相互作用。所以HPLCHPLC的选择性大大提高。的选择性大大提高。现在学习的是第4页，共42页 HPLCHPLC方法中，因为在常温下进行分析，因此方法中，因为在常温下进行分析，因此 固定相的选择比固定相的选择比GCGC多；另一方面可提高色谱多；另一方面可提高

5、色谱 的分离效率。的分离效率。HPLCHPLC方法中，可使用灵敏度较高的光度检测方法中，可使用灵敏度较高的光度检测 器，而在器，而在GCGC方法中则无法使用。方法中则无法使用。HPLCHPLC方法中，样品可以回收，而方法中，样品可以回收，而GCGC方法中样品方法中样品 回收则较困难。回收则较困难。10-2 HPLC10-2 HPLC色谱仪色谱仪现在学习的是第5页，共42页高效液相色谱仪的结构如下：高效液相色谱仪的结构如下：由贮液瓶由贮液瓶、高压泵、高压泵(梯度洗提装置梯度洗提装置)、进样器、色、进样器、色谱柱谱柱(恒温器恒温器)、检测器和记录仪组成。、检测器和记录仪组成。现在学习的是第6页，共

6、42页主要部件简述：主要部件简述：1.1.高压泵高压泵 其作用是输送其作用是输送载液载液(流动相流动相)。由于色谱柱很细。由于色谱柱很细 (1(16mm)6mm)，填充剂粒度小，填充剂粒度小(几十微米几十微米)，因此要，因此要 达到快速高效的分离效果，要求压力为达到快速高效的分离效果，要求压力为150150 200kg/cm 200kg/cm2 2。2.2.梯度洗提装置梯度洗提装置 又称又称梯度洗脱梯度洗脱(gradient elution)(gradient elution)和气相色谱和气相色谱 法中的程序升温类似，对复杂混合物的分离带法中的程序升温类似，对复杂混合物的分离带 来方便。来方便

7、。现在学习的是第7页，共42页 所谓梯度洗提，指载液中含有两种或两种以上不所谓梯度洗提，指载液中含有两种或两种以上不同极性的溶剂，在分离过程中按一定程序连续改变同极性的溶剂，在分离过程中按一定程序连续改变载液中各溶剂的配比。载液中各溶剂的配比。由此通过改变载液的极性来由此通过改变载液的极性来达到分离组分，提高分离效果。达到分离组分，提高分离效果。3.3.进样装置进样装置现在学习的是第8页，共42页因为流路中为高压力工作状态，通常使用耐高因为流路中为高压力工作状态，通常使用耐高 压的六通阀进样装置。压的六通阀进样装置。4.4.色谱柱色谱柱 常用的标准柱型是内径常用的标准柱型是内径4.64.6或或

8、3.9mm3.9mm，长度为，长度为151530cm30cm的直形不锈钢管。填料粒度的直形不锈钢管。填料粒度5 51010 m m，柱效以理，柱效以理论塔板数计大约论塔板数计大约700070001000010000。其。其发展趋势是减小填发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。料粒度和柱径以提高柱效。现在学习的是第9页，共42页5.5.检测器检测器常用的检测器：常用的检测器：(1)(1)紫外光度检测器紫外光度检测器(UV)(UV)：它的作用原理是基于被分析试样对特定波长它的作用原理是基于被分析试样对特定波长紫外光紫外光的选择性吸收。池内样品浓度与吸收的光强度服从的选择性吸收。池内样品浓度与吸收

9、的光强度服从比耳定律。比耳定律。P.304.P.304.最小检测量为最小检测量为1010-9-9g gmLmL-1-1，对流量和温度的波动，对流量和温度的波动不敏感，可用于梯度洗脱。不敏感，可用于梯度洗脱。现在学习的是第10页，共42页紫外检测器的缺点：不适用于紫外光完全不吸收的试紫外检测器的缺点：不适用于紫外光完全不吸收的试样，溶剂的选用也受到一定的限制。样，溶剂的选用也受到一定的限制。光电二极管阵列光电二极管阵列(photo-diode array detector)(photo-diode array detector)检测器是紫外检测器的重要进展。检测器是紫外检测器的重要进展。1024

10、1024个二极管阵列个二极管阵列，各检测特定波长，通过计算机快速处理，形成三维立，各检测特定波长，通过计算机快速处理，形成三维立体谱图，如图所示。体谱图，如图所示。现在学习的是第11页，共42页现在学习的是第12页，共42页(2)(2)差示折光检测器：差示折光检测器：偏转式差示折光检测器光路图偏转式差示折光检测器光路图 光源光源1 1射出光线由透射出光线由透镜镜2 2聚焦聚焦,透过遮光板透过遮光板4 4的狭缝的狭缝,经反射镜经反射镜5 5反反射后射后,由透镜由透镜6 6汇聚两汇聚两次次,穿过工作池穿过工作池7 7和参和参比池比池8 8 该检测器是继该检测器是继UVUV检测器之后，第二种广泛使用

11、的液检测器之后，第二种广泛使用的液相色谱检测器。图示：相色谱检测器。图示：现在学习的是第13页，共42页被平面反射镜被平面反射镜9 9反射出来，成像于棱镜反射出来，成像于棱镜1111的棱口上，的棱口上，光束均匀分为两束，到达对称的光电管光束均匀分为两束，到达对称的光电管1212上。上。如果工作池和参比池皆通过纯流动相，光束无如果工作池和参比池皆通过纯流动相，光束无偏转，左右两个光电管的信号相等；偏转，左右两个光电管的信号相等；如果工作池中有试样通过，由于折射率改变，造如果工作池中有试样通过，由于折射率改变，造成光束偏转，从而使到达棱镜的光束偏离棱口，左右成光束偏转，从而使到达棱镜的光束偏离棱口

12、，左右两个光电管接受的光能量不等，其差值正比于试样的两个光电管接受的光能量不等，其差值正比于试样的浓度。浓度。现在学习的是第14页，共42页 每种物质都有各自不同的折射率，因此都可用差示每种物质都有各自不同的折射率，因此都可用差示折光检测器进行检测，所以是一种通用型的浓度检测器折光检测器进行检测，所以是一种通用型的浓度检测器。灵敏度为灵敏度为1010-7-7g gmLmL-1-1。缺点：对温度变化很敏感，此检测器不能用于缺点：对温度变化很敏感，此检测器不能用于梯度洗提。梯度洗提。3-3 HPLC3-3 HPLC的理论基础简述的理论基础简述 高效液相色谱法的理论基础基本与气相色谱法相同高效液相色

13、谱法的理论基础基本与气相色谱法相同，但有其不同之处。两者的主要区别在于，但有其不同之处。两者的主要区别在于流动相流动相的不的不同。同。现在学习的是第15页，共42页根据速率理论，根据速率理论，HPLCHPLC中影响柱效的因素如下：中影响柱效的因素如下：涡流扩散项涡流扩散项H He e H He e=2=2 d dp p 其含义与气相色谱法相同。其含义与气相色谱法相同。现在学习的是第16页，共42页2.2.纵向扩散项纵向扩散项 H Hd d 式中式中C Cd d为常数，为常数，D Dm m为分子在流动相中为分子在流动相中的扩散系数。的扩散系数。由于分子在液体中的扩散系数比在气体中小由于分子在液体

14、中的扩散系数比在气体中小4 45 5个数量个数量级，当流动相的线速度级，当流动相的线速度0.5cm0.5cms s-1-1，该项对，该项对H H的影响的影响可忽略不计。而可忽略不计。而GCGC中该项的影响则很大。中该项的影响则很大。3.3.传质阻力项传质阻力项 与与GCGC类似，类似，HPLCHPLC也可分为也可分为固定相传质阻力项固定相传质阻力项和和流动相传质阻力项流动相传质阻力项。dmdC DHu现在学习的是第17页，共42页固定相传质阻力固定相传质阻力H Hs s主要发生在液液分配色谱主要发生在液液分配色谱中，类似于气液色谱中的液相传质阻力项。中，类似于气液色谱中的液相传质阻力项。式中式

15、中C Cs s 为常数为常数(与与k k有关有关)；D Ds s为组分分为组分分子在固定液内的扩散系数；子在固定液内的扩散系数；由上式可见，由上式可见，H Hs s与与GCGC中的中的C CL L含义是一致的。含义是一致的。流动相传质阻力流动相传质阻力HPLCHPLC中该项有两种形式，分为中该项有两种形式，分为在流在流动的流动相中动的流动相中和和滞留的流动相中滞留的流动相中的传质阻力，分别用的传质阻力，分别用H Hm m和和H Hsmsm表示。表示。2sfssC dHuD现在学习的是第18页，共42页式中式中C Cm m是常数是常数(与与k k有关有关)，D Dm m 为组分为组分分子在流动相

16、中的扩散系数。分子在流动相中的扩散系数。式中式中Csm为一常数；为一常数；综上所述，由柱内色谱峰扩展所引起的塔板高度的变综上所述，由柱内色谱峰扩展所引起的塔板高度的变化可归纳为：化可归纳为：2mpmmC dHuD将上式简化：将上式简化：H=A+B/u+CuH=A+B/u+Cu2smpsmmC dHuD现在学习的是第19页，共42页 可见，减小填料的孔径和粒度，采用低粘度及可见，减小填料的孔径和粒度，采用低粘度及低流速流动相，适当提高温度等方法都可提高柱效低流速流动相，适当提高温度等方法都可提高柱效。由由H H d dp p2 2可知，其中减小填料粒度是提高柱效的可知，其中减小填料粒度是提高柱效

17、的最有效途径；因孔穴深度也同时随之减小。最有效途径；因孔穴深度也同时随之减小。总结：总结：HPLCHPLC速率方程式形式与速率方程式形式与GCGC一致，其主要区别一致，其主要区别在于在于HPLCHPLC纵向扩散项纵向扩散项(Hd)可以忽略不计，影响柱效可以忽略不计，影响柱效的主要因素是的主要因素是涡流扩散项涡流扩散项He和传质阻力项和传质阻力项Hm、Hsm、Hs。现在学习的是第20页，共42页3-4 HPLC3-4 HPLC的主要类型及其分离原理的主要类型及其分离原理根据分离机制的不同，根据分离机制的不同，HPLCHPLC可分为下述几种主要类型可分为下述几种主要类型：现在学习的是第21页，共4

18、2页液液-液色谱法液色谱法、液液-固色谱法固色谱法、离子交换离子交换色谱法色谱法、离子、离子对对色谱法色谱法、离子、离子色谱法和色谱法和空间排阻色谱法空间排阻色谱法等等。1.1.液液-液分配色谱法液分配色谱法(L-L partition chromatograph)(L-L partition chromatograph)流动相和固定相都是液体，其分离原理为试样组流动相和固定相都是液体，其分离原理为试样组分在固定相和流动相之间的相对溶解度存在差异。分在固定相和流动相之间的相对溶解度存在差异。当浓度分配达到平衡时，应服从于下式：当浓度分配达到平衡时，应服从于下式：sMMsCVKkkCV现在学习的

19、是第22页，共42页液液-液分配色谱主要有两种类型：液分配色谱主要有两种类型：正相液正相液-液分配色谱液分配色谱 用于分离极性较强的水溶性样品，非极性或弱用于分离极性较强的水溶性样品，非极性或弱 极性的物质不易被保留，出峰较早。极性的物质不易被保留，出峰较早。反相液反相液-液分配色谱液分配色谱 用于分离水溶性较差的样品，出峰次序与正相用于分离水溶性较差的样品，出峰次序与正相 的相反，极性组分先被洗脱。的相反，极性组分先被洗脱。特点：色谱柱制备的重现性较好；缺点：特点：色谱柱制备的重现性较好；缺点：分离过程中由分离过程中由于流动相通过色谱柱时的机械冲击，固定液会不断流失于流动相通过色谱柱时的机械

20、冲击，固定液会不断流失而导致柱的保留行为变化。而导致柱的保留行为变化。现在学习的是第23页，共42页为此将各种有机基团通过化学反应键合上担体表面，为此将各种有机基团通过化学反应键合上担体表面，代替机械涂渍的液体固定相，如此可克服该方法的缺代替机械涂渍的液体固定相，如此可克服该方法的缺点。点。2.2.液液-固色谱法固色谱法(L-S adsorption(L-S adsorption chromatographchromatograph)流动相为液体，固定相为吸附剂。根据物质对流动相为液体，固定相为吸附剂。根据物质对 组分分子吸附作用的不同来进行分离。组分分子吸附作用的不同来进行分离。该方法适用于

21、分离脂溶性试样，该方法适用于分离脂溶性试样，对具有不同官能团对具有不同官能团的化合物和异构体有较高的选择性。的化合物和异构体有较高的选择性。缺点：由于非线缺点：由于非线性等温吸附常引起峰的拖尾现象。性等温吸附常引起峰的拖尾现象。现在学习的是第24页，共42页3.3.离子交换色谱法离子交换色谱法(ion-exchange chromatography)(ion-exchange chromatography)该方法是基于离子交换树脂上可电离的离子与流该方法是基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中携带相同电荷的组分离子进行可逆交换，依据动相中携带相同电荷的组分离子进行可逆交换，依据这些离子对交换

22、剂的不同亲和力而进行分离。这些离子对交换剂的不同亲和力而进行分离。凡是在溶剂中凡是在溶剂中能电离的物质能电离的物质通常都可用离子交换色谱通常都可用离子交换色谱法进行分析。法进行分析。现在学习的是第25页，共42页 离子交换色谱法主要用来分离离子交换色谱法主要用来分离离子离子或或可离解的化可离解的化合物合物，2020世纪世纪6060年代前后，已成功分离了氨基酸、核年代前后，已成功分离了氨基酸、核酸、蛋白质等，在生物化学领域得到了广泛的应用。酸、蛋白质等，在生物化学领域得到了广泛的应用。3344()()()()MNa O SMO SNaXClR NXR NCl ：-载载液液中中 载载液液中中载载液

23、液中中 载载液液中中阳阳离离子子交交换换：树树脂脂树树脂脂+阴阴离离子子交交换换树树脂脂树树脂脂+现在学习的是第26页，共42页 空间排阻色谱法以凝胶空间排阻色谱法以凝胶(gel)(gel)为固定相。分离机为固定相。分离机理与其它色谱法完全不同。理与其它色谱法完全不同。该方法分离的机理类似分子筛的作用，但孔径比分该方法分离的机理类似分子筛的作用，但孔径比分子筛要大，为数纳米到数百纳米。溶质在两相间的分离子筛要大，为数纳米到数百纳米。溶质在两相间的分离不是由于相互作用力的不同，而是按分子大小进行分离不是由于相互作用力的不同，而是按分子大小进行分离。4.4.空间排阻色谱法空间排阻色谱法(steri

24、c exclusion(steric exclusion chromatographchromatograph)现在学习的是第27页，共42页 试样中的大分子不能进入胶孔而受到排阻试样中的大分子不能进入胶孔而受到排阻，就直接通过柱子首先在色谱图上出现；另外，就直接通过柱子首先在色谱图上出现；另外一些小分子可以进入胶孔并渗透到颗粒中，这一些小分子可以进入胶孔并渗透到颗粒中，这些组分在柱上的保留值最大，在色谱图上最后些组分在柱上的保留值最大，在色谱图上最后出现。出现。现在学习的是第28页，共42页 排阻色谱法中，载液分排阻色谱法中，载液分子通常都很小，它们一般最子通常都很小，它们一般最后被洗脱后被

25、洗脱(t(tM M最大最大)，结果是，结果是：整个试样都在：整个试样都在t tM M(死时间死时间)以前洗脱。以前洗脱。由于由于排阻色谱法的排阻色谱法的分离机理与其他色谱法分离机理与其他色谱法不同，具有几个突出的不同，具有几个突出的特点：特点：现在学习的是第29页，共42页(1)(1)试样峰全部在溶剂的保留时间前出峰，它们试样峰全部在溶剂的保留时间前出峰，它们 在柱内的停留时间短，故柱内产生的峰扩展在柱内的停留时间短，故柱内产生的峰扩展 比其他方法小得多。比其他方法小得多。(2)(2)固定相和流动相的选择简便。固定相和流动相的选择简便。(3)(3)适用于分离相对分子质量差别在适用于分离相对分子

26、质量差别在10%10%以上的以上的 分子。分子。现在学习的是第30页，共42页 GCGC中可供选择的载气只有三四种，它们的性质差中可供选择的载气只有三四种，它们的性质差异不大。要提高柱的选择性，主要是改变固定相的性异不大。要提高柱的选择性，主要是改变固定相的性质。质。3-6 HPLC3-6 HPLC的流动相的流动相 而而HPLCHPLC中，当固定相选定时，流动相的种类中，当固定相选定时，流动相的种类、配比能显著地影响分离效果。选择流动相时应注意、配比能显著地影响分离效果。选择流动相时应注意以下几方面因素：以下几方面因素：纯度纯度 如溶剂不纯，则长期积累杂质会导致检测器噪声如溶剂不纯，则长期积累

27、杂质会导致检测器噪声增加，同时也影响收集的馏分纯度。增加，同时也影响收集的馏分纯度。现在学习的是第31页，共42页(2)(2)避免使用引起柱效损失或保留特性变化的溶避免使用引起柱效损失或保留特性变化的溶 剂。剂。(3)(3)对试样要有适宜的溶解度，否则在柱头易产对试样要有适宜的溶解度，否则在柱头易产 生沉淀。生沉淀。(4)(4)考虑到泵压，流动相的粘度小些为好。考虑到泵压，流动相的粘度小些为好。(5)(5)应与检测器相匹配，如紫外光检测器，就不应与检测器相匹配，如紫外光检测器，就不 能使用对紫外光吸收的溶剂。能使用对紫外光吸收的溶剂。现在学习的是第32页，共42页 常用溶剂的极性顺序排列如下常

28、用溶剂的极性顺序排列如下：水水(极性最大极性最大)、甲酰胺、乙腈、甲醇、乙醇、丙酮、甲酰胺、乙腈、甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃、正丁醇、醋酸乙酯、乙醚、异丙醚、氯仿四氢呋喃、正丁醇、醋酸乙酯、乙醚、异丙醚、氯仿、苯、甲苯、四氯化碳、二硫化碳、环己烷、煤油、苯、甲苯、四氯化碳、二硫化碳、环己烷、煤油(极性最小极性最小)。溶剂还可采用二元或多元组合。根据分别所起的作溶剂还可采用二元或多元组合。根据分别所起的作用，采用的溶剂可分成用，采用的溶剂可分成底剂底剂及及洗脱剂洗脱剂两种。两种。底剂底剂决定基本的色谱分离情况；决定基本的色谱分离情况；洗脱剂洗脱剂则起调节试则起调节试样组分的滞留并对某几个组分具有

29、选择性的分离作用样组分的滞留并对某几个组分具有选择性的分离作用。现在学习的是第33页，共42页 正相色谱中，正相色谱中，底剂底剂采用低极性溶剂如正己烷、采用低极性溶剂如正己烷、苯、氯仿等；而苯、氯仿等；而洗脱剂洗脱剂则根据试样的性质选取极性则根据试样的性质选取极性较强的针对性溶剂如醚、酯、酮、醇和酸等。较强的针对性溶剂如醚、酯、酮、醇和酸等。反相色谱中，反相色谱中，底剂底剂一般采用水，一般采用水，洗脱剂洗脱剂常采用有常采用有机溶剂如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。机溶剂如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。而离子交换色谱法主要在含水介质中进行而离子交换色谱法主要在含水介质中进行，组分的保留值可通过调节流动相中的离

30、子强度和，组分的保留值可通过调节流动相中的离子强度和pHpH来控制。来控制。现在学习的是第34页，共42页 排阻色谱所用的溶剂必须与凝胶本身非常相近，排阻色谱所用的溶剂必须与凝胶本身非常相近，以润湿凝胶并防止吸附作用。对分离大分子化合物，以润湿凝胶并防止吸附作用。对分离大分子化合物，易采用粘度小的溶剂作流动相如四氢呋喃、甲苯等。易采用粘度小的溶剂作流动相如四氢呋喃、甲苯等。对分离生物物质，主要采用水、缓冲盐溶液等。对分离生物物质，主要采用水、缓冲盐溶液等。3-7 HPLC3-7 HPLC分离类型的选择分离类型的选择 应用应用HPLCHPLC对试样进行分离对试样进行分离、分析方法的选择，应考分析

31、方法的选择，应考虑几种因素，包括：虑几种因素，包括：试样性质试样性质(分子量、结构、极性、分子量、结构、极性、溶解度等溶解度等)、HPLCHPLC分离方法类型的特点分离方法类型的特点及及应用范围应用范围等等。现在学习的是第35页，共42页 如果分子量较低，挥发性较高且热稳定的试样，如果分子量较低，挥发性较高且热稳定的试样，适用于适用于GCGC法进行测定。法进行测定。HPLCHPLC法适用于相对分子质量法适用于相对分子质量为为200200到到20002000的试样测定，大于的试样测定，大于20002000的宜用空间排阻的宜用空间排阻色谱。色谱。另外，了解试样在多种溶剂中的溶解情况，有利于另外，了

32、解试样在多种溶剂中的溶解情况，有利于分离类型的选择。分离类型的选择。如溶解于水的试样如溶解于水的试样可采用液液色谱法；溶解于酸或可采用液液色谱法；溶解于酸或碱性水溶液的，则表示试样为离子型化合物，可采用碱性水溶液的，则表示试样为离子型化合物，可采用离子交换色谱法离子交换色谱法、离子对色谱法等。、离子对色谱法等。现在学习的是第36页，共42页 而异构体的分离而异构体的分离，则采用吸附色谱；空间排阻色，则采用吸附色谱；空间排阻色谱可适用于水或非水溶液，且分子大小要有差别的试样谱可适用于水或非水溶液，且分子大小要有差别的试样。下表为液相色谱法分离类型选择参考表：下表为液相色谱法分离类型选择参考表：P

33、.299P.299 对非水溶性试样对非水溶性试样(很多有机物属此类很多有机物属此类)，若溶于烃，若溶于烃类，可选用液固吸附色谱；若溶于二氯甲烷或氯仿类，可选用液固吸附色谱；若溶于二氯甲烷或氯仿，可选用液液正相色谱；若溶于甲醇的，可用，可选用液液正相色谱；若溶于甲醇的，可用液液液液反相色谱。反相色谱。现在学习的是第37页，共42页现在学习的是第38页，共42页3-8HPLC3-8HPLC应用实例应用实例F-F-非草隆非草隆M-M-灭草隆灭草隆D-D-敌草隆敌草隆L-L-立草隆立草隆N-3,4N-3,4二氯二氯 苯基甲苯基甲 基正丁基正丁 基脲基脲(a)(a)反相键合相色谱反相键合相色谱 (b)(b)正相键合相色谱正相键合相色谱 现在学习的是第39页，共42页 上图为血浆中双氢氯噻嗪的分析上图为血浆中双氢氯噻嗪的分析(反相键反相键 合相色谱合相色谱)(a)(a)空白血浆空白血浆 (b)(b)含双氢氯噻嗪病人的血浆含双氢氯噻嗪病人的血浆(服药后服药后3h)3h)现在学习的是第40页，共42页现在学习的是第41页，共42页2022-9-8感谢大家观看感谢大家观看现在学习的是第42页，共42页