2022年生物材料重点总结 .docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载生物材料检验：分析检验生物材料中化学物质及其代谢物的含量或因化学物质引起的生物效应指标变化；生物材料：是人体体液（如血液） 、排泄物（如呼吸气、尿液） 、毛发,指甲以及组织脏器等 的总称；生物标志物： 指生物系统接触外源性物质后显现的一种变化；分为三类： 接触性生物标志物、效应性生物标志物,敏锐性生物标志物；生物接触限值 （BEL）：大体相当于健康人吸入接触最高答应浓度的毒物时生物材料中被测物 的水平；尿液可分为全日尿,晨尿,定时尿和随时尿；生物半减期：指进入生物体内的化学物质的里量通过各种途径排除一半所需要的时间,又代谢半减

2、期；一、检验方法的一般要求： 1. 方法的一般要求 1）灵敏度挑选符合生物监测的基本要求 2）操作简便 3）试剂易 得、价廉 4）效率高 5）符合国情,易推行、推广 2挑选和建立生物检测方法必需考虑的因素：1）被测成分 溶解性,稳固性 含量水平 高 g/L 水平 低ug/L 二、方法研制准就的基本内容 1取样、运输、储存的原就 1 ）取样：（1）容器工具材质不干扰测定（2）取样的操作要防止污染（3）取 样时间依据半减期判定打算（4）取样的体积 尿液=50ml 静脉血 =5ml 末梢血 500ul 2 储存时间：一天,三天,一周,两周一般只要求两周 定 , 必 要 时 要 冷 藏 和 冷 冻 运

3、 输3）运输过程：保证分析物稳 4） 防 腐 剂 （ 尿 ） 和 抗 凝 剂（血）2. 样品预处理原就 1 ）尿液浓度按比重校正尿标准比重 1.020 ,1.030 及=75% 3. 制定分析方法的程序 1 ）分析条件挑选、优化 2）确定检出限（1）影响检出限的因素：试剂的纯度,仪器的工作状态,电源稳固性光源的温度变化、污染等不行掌握的因素； （2）检出限的确定 一般用统计法,一般用空白 值的 3 倍标准差运算；色谱法用 3 倍噪音水平,检出限应小于 0.3 倍生物接触限值；（3）检出限的表 示 方 法 浓 度 或 绝 对 量 表 示 , 用 浓 度 表 示 时 要 说 明 方 法 取 样 体

4、积；3）精密度：同一个人用同一方法重复测定同一匀称样品测定结果的符合程度通常在线性范畴内取高、测定 35 次；用 RSD表示或用变异系数表示中、低三个浓度水平分别重复 复杂方法 RSD=20 简洁方法=75% 如105% 说明存在明显的系统误差； （3）用标准方法或权威方法比较：两个方法均值相对误差应小于 10% t 检验 在确定一个置信水平条件,两方法测定无明显差异 5）干扰试验：假如有干扰,要找出排除干扰的方法 6）样品的稳固性试验：时间：当天, 3天,1 周,2 周 温度：室温,一般冰 箱冷藏（4）,冷冻储存（-8 ）,低温冰箱（ -20 ）4. 方法的验证 1）新方法的验证：必需是另一

5、单位研制方供应方法全部技术材料 验证内容：四项 线性范畴,精密度,精确度,样品的稳固性；2）引进国外标准方法或权威方法,引进方名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 9 页精选学习资料 - - - - - - - - - 就是验证方；学习必备欢迎下载5. 现场应用第一要观看检出率观看检测结果与环境污染的符合程度同时取非接触样品进行对比三、确定生物监测指标的依据（一）化学物质在体内的动力学过程 1. 吸取 1）呼吸道吸取气体物质通过肺泡壁及四周毛细血管吸取 固体物质,溶解时吸取的前提 2）皮肤 有些有机物很简洁被皮肤吸收 F=C/15 *0.038-0.153pexp-0.016

6、MN F 皮肤吸取量 mg/ 2 /h C 化学物质在水中的 饱和度 mg/ml P 辛醇 - 水的安排系数 MN 相 对 分 子 质 量 许 多 农 药 易 被 皮 肤 吸 收 如 有 机磷 2. 体内分压和贮存 1）起始主要分布于血液中最终分布取决亲和力 2）血液侧得 量是反映新近吸取量或机体组织的水平 3）血液中毒物或其他被测物并非匀称分 布 4）一般脂溶性溶剂及卤代烃会分布在脂肪组织中,乳汁是检测有机氯农药最好的样品 5）体内储存毒物的形式大多为结合状态,测定尿液中的代谢物需要先水解 3. 生物转化 1）概念：外源性化合物在体内经过一系列化学变化并形成其衍生物 以及分解产物的过程；2）

7、有关生物转化的争论 是毒物发生质的变化 生物转化的数量关系, 个体差异很大 是一种动态过程, 对时间的明白是确定采样时间的基础,生物半衰期； 4. 排出 易挥发性有机溶剂从呼吸气中排出较多； 长期蓄积的有机氯农药可从乳汁中排出及嘱咐中排出,易代谢的有机毒物大多以结合态从尿中排出；（二）、个体差异 1 、毒物在生物体内的动力学过程有种属家族和个体的差异,其中生物转化过程变异极大；2、生物监测的个体差异可用监测结果的变异系数表示； 3 、个体差异降低了名师归纳总结 生物监测的精确性,却可帮忙检出特别敏锐人群或耐受人群；（三）、接触水第 2 页,共 9 页平（剂量）效应（反应）关系 1 、是确定一次

8、生物监测指标的关键依据； 2 、生物监测结果与空气毒物浓度之间的相关资料,可作为挑选生物监测指标的替代依据；四、检验指标的挑选与分类（一）、挑选的基本要求1、特异性好；2、具有良好的剂量效应关系； 3、稳固性好； 4、有精确牢靠的检验方法；（二）、生物材料检验指标的分类1、化学物质原形：化学物质在生物体内不进行生物转化或转化速度很慢；缺乏毒物代谢动力学资料；代谢产物在体内没有特异性2、化学物质代谢产物3、生物效应指标；五、样品的采集与储存一）、生物材料样品的挑选（一）、种类及特点尿液: 最常用的1）特点：采集便利、无损耗性、采集量大2）适用性：水溶性化学物质、代谢产物、金属等3）尿样的种类：（

9、1）全日尿（24h 尿）收集 24h 内的全部尿液, 通常只用于住院病人（2）晨尿起床后、早餐前第一次排出的尿（3）定时尿：生物半减期班前尿：第2 个工作日上班前以内排出的尿班中尿：上班23h 以后排出的尿班末尿：下班前 1h 内排的尿班后尿：下班以后 1h 以内排出的尿周末尿：连续工作第五个工作日的班末尿；血液1）特点：成分较恒定个体差异小取样污染机会小损耗性采集样品血样贮存条件要求较高；2）种类：血清：不抗凝离心分别出的上层清夜血浆：加抗凝剂离心分别的上层清夜全血红细胞；呼出气1）特点优点：操作便利、干扰物少,非损耗性缺点： a、被测物的含量比较低b、肺泡气中水分对某些测定有影响c、肺部“

10、 死腔” 中环境空气对肺泡气稀释不稳固,影响测定结果的说明；2）适用性监测仅限于挥发性物质主要用于测定化学物质原形呼出气监测结果能反映采样期间车- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载间空气的平均浓度；3）呼出气的分类 混合呼出气、 终末呼出气（肺泡气）第一阶段呼出的是空气,其次 阶段混合呼出气,第三阶段肺泡气；（二）、生物材料样品的挑选1、同一毒物或代谢产物在不同生物材料其生物学意义不一样,血镉代表近期接触水平、 尿镉反映长期接触的浓度；2、挑选生物材料样品种类的要求： 被测物有特异性 与外剂量有相关性 有足够的稳固 测定结果重复性好,

11、个体差异在答应范围内 采样能被受试者接受；3、尿、血、呼出气是目前较抱负的生物材料样品,美国 BEI55 个尿 58%、血 27%、呼出气 14%；二）、样品采集、运输及储存（一）、一般要求 1、采样时间：依据生物半减期；2、采样环境：无污染； 3 、采样容器：测无机成分、塑料、高压聚合玻璃：硬质、石英 不锈钢含 Cr、Ni、Mn（不能用于测此三种元素）使用前要求用酸液（稀 HNO3）浸泡 24h 洗涤；测有机物 玻璃、塑料（不能用橡胶和添加染料的橡胶）冷冻储存不能用玻璃仪器；4、样品的运输与保存； 5 、采样记录编号检验项目受试者信息采样信息：时间、地点、环境、过程；采样人及记录人信息（二）

12、样品采集与储存 1、尿样 1 ）尿样的校正：1 比重校正法 标准比重 1.020 校正公式 C校正 =（1.020-1.000 ）/（d-1.000*c=kc d 的使用范畴 1.010 1.030 2肌酐校正法 . 尿中被测物浓度 （mg/g 肌酐）=实测浓度（mg/L）/ 肌酐浓度（g/L ）,肌酐含量 2 采样 . 采集尿液不少于 50ml, 用顶空分析法测定挥发性物质时 . 收集尿样的容器要布满尿样并知道体积,记录 2 人上次排光膀胱的时间及采集样的终点时间；3 储存 . 贮存一般 2 周. 反腐 加酸 .氯仿 . 冷藏 测尿中汞或挥发性有机物要尽快测定 要储存 5 天以上的,最好冷冻

13、 2、血样 1 ）采集（1）、全血；要抗凝（2）、血清（血浆）或红细胞 2 留意事项 采集过程防止污染 . 毛细管血 防止溶血 . 金属针头（取下）再挤出针管时不能太快 自然流出弃去第一滴血有三种情形不宜采集取末梢血要防止挤压采集部位,毛细管血 a 血液量超过 5ml.b 采集环境有外源性化学物质存在 c 测定挥发性成分 3 血样的运输与保存 防止振动和温度的转变 血样冷冻确定溶血采集血清或血浆时,应分别再储存 暂时存放 4过夜, 长时间储存要冷冻 测酶活性要采集后尽快分析 3. 呼出气 . 1）采集方法：先深呼吸 23 次,再复原正常呼吸时采集呼出气 采集肺泡气只收集末端呼出气 2 ）留意事

14、项：受检者必需时肺功能正常者 要挑选对被测物吸附小的容器 要在正常呼吸状态下收集样品呼出过程不能有阻力采样的时机要依被测物代谢名师归纳总结 速度打算三、生物材料样品的预处理原就（一）无机物分析的样品处第 3 页,共 9 页理 1 、稀释法 . 1 ）. 常用的稀释剂 ;1 稀硝酸液（尿）,2）TntonX100 表面 活 性 剂3 ） 基 体 改 进 剂 溶 液2 ） . 常 用 机 体 改 进 剂 ： 硝 酸 盐（NH4+ Ni2+ Ca2+）磷酸盐（ Na+ NH4+）3）. 应用实例:磷酸铵,硝酸铵和 TritonX-100可改善血清中铜锌的测定磷酸氢胺,硝酸铵测定血铅可提高灰化温度至1

15、000硝酸镍可使测定砷和Se 的灰化温度到1000磷酸铵可使测定Cd 的灰化温度增至800 2 、酸提取法1.硝酸提取,测定血铅 .6mol/L 硝酸离心取上清液；标准物质被测成分的含量是已知的 2,盐酸提取 3,三氯乙酸（固体）；铁（有效）提取 +2 价铁3、矿物化法（无机法处理）（二）有机物分析的样品处理（p11）第五节铅一、接触途径：铅矿,开采,冶炼二、代谢物和生物监测指标（一）- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载动力学过程 . 1 、吸取 1）呼吸道：铅尘烟蒸汽 2 消化道：铅尘 3）皮肤,无机物不吸取有机铅化合物可被吸取（四乙

16、基铅） 2 、分析：起始分布在血中有95%与红细胞结合最终主要以磷酸盐沉积于管中,其次是肝肾脑等 3 、生物效应：抑制血红蛋白的合成 1 ）抑制 5氨基乙酰丙酸脱水酶,导致血尿中 -ALA 增加 2）抑制粪川啉元氧化酶 3 ）抑制亚铁螯合酶 4 、排除：吸取的铅主要经尿排出,尿铅生物半减期较长；（二）铅接触的 生 物 监 测 指 标1 、 血 铅 ： 直 接 反 映 近 期 接 触 铅 的 情况 2、尿铅：反应机体中铅的负荷量,是铅中毒的帮助诊断指标 3、生物效应指标：1）尿中 ALA 2）血中铅原卟啉 三、样品的采集与储存用于尿铅血铅的测定 1. 尿样 . 采样时间的限定 立刻采集一次尿样

17、按 1%比例加 HNO3, 4可储存两周；2. 血样 . 1）末梢血 40 L 2）静脉血四、尿铅和血铅的测定石墨炉原子吸取法（一）尿铅的测定 1 、原理：尿样用基体改进剂液稀释后直接进行测定,基体改进剂液 NH4H2PO4+ 抗坏血酸 2、石 墨 炉 升 温 程 序 适 用 涂 铜 石 墨 管 干 燥 70 ,40S 灰化 450,30S 原子化 2000 5S（停气）清除 22003S 3、石墨管涂钼处理,向石墨管中加 20 L 钼酸铵液,石墨炉升温程序 并重复10 次 升温,石墨管内壁呈灰白色 4、标准系列液配置 铅标准系列液 基体改进剂液（混合液）正常人混合尿：没有接触铅的健康人的尿,

18、取 2 份,一份比重小于 1.020 ,一份比重大于 1.020 ,混合 成比重为 1.020 的尿液 5 、说明：1）基体改进剂液的作用：本法选用 4%磷酸二氢铵 -6%抗坏血酸作为基体改进剂,能有效地克服基体干扰 2 ）背景吸收的扣除 背景校正器扣除背景吸取, 氘灯背景校正 石墨管涂钼可降低背景吸取（二）血铅的测定 1 、样品处理：全血用 TritonX-100 液稀释,稀 HNO3酸化,进样测定 2、石墨炉升温程序 : 干燥：75-100 ,10S（斜坡升温）灰化 450-500 30S 保 持 10S（斜坡）原子化 24007S清除 25003S 3、标准系列液：铅标准液 Triton

19、X-100 尿中 ALA的测定液正常人血 五、生化指标的测定（一）1、原理： ALA可与乙酰乙酸乙酯缩合生成吡咯化合物 用乙酸乙酯萃取吡咯化合物显色,加对一二甲氨基苯甲酸生成红色化合物 max=554nm 2、操作要点：两份经稀释尿样加 PH=6缓冲液 样品管加乙酰乙酸乙酯 尿样空白管补充缓冲液 各沸水浴 10min 各加 4mL乙酸乙酯萃取 离心、静置、分层 取清夜显色 10min 后测定（二）全血中游离原卟啉的测定 1、原理：用乙酸 - 乙酸乙酯破坏红细胞盐酸萃取原卟啉,测定荧光强度 2、样品处理：1）样品： 20 L 血+0.1mL 生理盐水 2）加硅藻土悬浮液, 乙酸乙酯乙酸液、 振摇

20、、破坏红细胞 3）离心,取上清液加盐酸萃取 第三节、镉 一、接触途径：锌矿的开采及冶炼工业上含镉材料的生产农业上也有镉化合物的应用二、代谢和生物监测名师归纳总结 指标（一）代谢1. 吸取、呼吸道和消化道2. 生物效应急性中毒靶器官：第 4 页,共 9 页肺慢性中毒靶器官：肺、肾、骨3. 排出少量由尿排出,属于蓄积性元素（二）生物监测指标1、尿镉：只反映长期接触情形2 血镉：只反映近期接触情形三、镉接触指标的测定石墨炉原子吸取法（一）尿镉的测定 1 、原理：用磷酸氢二铵液稀释, 直接标准曲线法定量2、- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 石 墨 炉 升 温

21、顺 序学习必备欢迎下载30S（ 斜 坡 ）2 ） 灰1 ） 干 燥0100 化10020020S（斜坡）40010S （阶梯）3）原子化 18005S 4）清除 20003S 3、标准系列液：镉标准液 空白尿液 基体改进剂液 1%NH3 （二）血镉测定 1 、原理：血样加稀 HNO3离心,取上清液测定,标准曲线法定量 2、标准系列液 镉血标准液：抗凝小牛全血 +镉标准液 4%HNO3 第七节：汞 一、接触机会 矿的开采与冶炼 电器和外表制造 化学工业 二、代谢和生物监测指标（一） 动力学过程 1. 吸取主要是呼吸道 2. 分布 无机汞主要是肾、 其次肝、脑 有机汞主要 是脑 其次肝、胃 3.

22、排出 尿汞 生物半减期 23个月（二）生物监测指标 1. 血汞：反映近期接触无机汞的量 2. 尿汞：用于诊断汞中毒观看驱汞 疗效 三、样品采集、储存 1. 尿样：随机取一次尿样 加碱 NaOH使浓度达到 40g/L ,4可储存 2 周 2. 血 样 周末血 抗凝 4可以储存数天 四、尿汞的测定冷原子吸取法（一）碱性氯化亚锡仍原法 1. 原理：在碱性条件及有 Cd+ 存在条件下,高浓度的 SnCl2 将有机汞及无机汞仍原成元素,用测氯仪测定 2. 标准系列液的配置 汞标准液 基体尿液 正常人混合尿 NaOH液 DL-半胱氨酸 3. 测定 将上述标准系列液加 1 滴磷酸三酯,加 SnCl2-CdS

23、O4液立刻通入空气测定（载气）4. 说明：磷酸三酯 消泡 Cd2+催化作用 DL-半胱氨酸起稳固剂的作用,防止无机汞吸附挥发； 仍可使有机汞不分解测定读数： 读取最大吸光度值（二）酸性 SnCl2 仍原法 1. 原理：用 KMnO4和浓 H2SO4分解尿样,使汞都转化成 Hg2+,用 SnCl2 仍原成 Hg,吹空气导入测汞仪 2. 测定：尿液和标准系列液同样用 KMnO4和浓 H2SO4分解 3. 说明：1）KMnO4和浓 H2SO4加入的次序：先加 KMnO4液再加浓 H2SO4 2）测定前先对气路系统进行净化；加SnCl2（酸性）测定空白水、吹气观看到仪器的响应值为零为止 每次测定都使响

24、应值为 0 再测其次份 第三章：非金属化合物及其代谢产物 第一节：CO 一、代谢及生物监测指标 1. 吸取：呼吸道 2. 生物效应： 进入机体 与 血 红 蛋 白 结 合 形 成 碳 氧 血 红 蛋 白 （ HbCO） 形 式 导 致 机 体 组 织 缺O2 HbCOHbCO 3. 分布：血液中 HbCO形式 4. 排出 呼出气 约有 1%被氧化成 CO2 5. 生物监测指标 1）血中碳氧血红蛋白 2）呼出气中 CO 三、样品的采集与储存 1. 呼出气： 1）采集班中（ 3h 后）或班末呼出气 2）收集终末呼出气 2. 血液： 1）采集班中（ 3h 后）或接触最高浓度时的血 2）抗凝 3）密闭

25、储存 411 周 4）最好取静脉血 5）受试者不抽烟 四、血中碳氧血红蛋白的测定分光光度法 1 、原理： 1）血中血红蛋白的四种成分：Hb、HbO2、HbCO、HbMet 2 ）HbCO,HbMet 3 2 2 NaO SHb 3）测定 Hb和 HbCO吸光度,最大吸取波长分别为 432nm和 420nm 2 、测定方法： 1 ）摩尔吸光系数的测定：用吸光系名师归纳总结 数代替（1）过饱和HbO2液的制备,血样用水和Tris液适量稀释通入第 5 页,共 9 页O2 30min （2）饱和 HbO2液的制备： 取（1）中 2 份通入 N2 （3）饱和 HbCO液制备取（1）中 2 份,通入 CO

26、 10min （4）HbCO和 Hb液制备在（ 2）和（3）的溶液中加 Na2S2O4固体 Hb2）HbCOHb3,）（5）分别测定 420nm和 430nm吸光度作为吸光常数（有四个值） 2 ）血样测定HbCO HO SNab4 2 2 稀释血样分别测 420nm和 430nm的吸光度 3 计算： 31KAK AKA-KA%43042 4204 4202430KK）碳氧血红蛋白- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载（ A420：血样在 420nm吸光度；A430 血样在 430nm吸光度 K1、K2 是HbCO在 420nm、430nm

27、的吸光常数 K3、K4是 Hb在 420nm、430nm的吸光常数 4.留意事项：（1）所用氮气和氧气应为高纯度氮和高纯度氧,不纯氮和氧气中含微量的 CO,能干扰测定结果（2）连二亚硫酸钠遇水易分解,在空气中简洁被氧化失效, 应以小瓶分装使用, 防止接触空气和水分（3）测定吸光系数必需采纳新奇血液, 一次测定值在仪器波长稳固的情形下可以使用一段时间,但仍应定期核检；（4）测试液应尽量防止接触空气,准时测定,否 就 会 造 成 结 果 偏 低 第 二 节 CS2 二 、 代 谢 及 生 物 监 测 指标（一）代谢 1、吸取：呼吸道、皮肤 2、生物转化 1）吸取后约 7090%转化为多种代谢产物

28、2 ）目前,接触者中尿中已确认的有 3 种：TTCA、2- 巯基-2- 噻唑啉酮 -5 ,硫脲（其中 TTCA争论较少,生减期为 2h） 3 ）排出： a. 代谢产物随尿排出 b. 约 2030%以原形从呼吸道排出 c. 约 1%以原形从尿中排出（二）生物监测指标 1 、尿中 TTCA：班末尿 2、呼出气中 CS2,目前争论较少 三、样品采集与储存 四、尿中 TTCA的测定 HPLC法 1、样品的处理： A、取离心后的尿样B、稀 HCL酸化：乙醚提取 C、离心分层, 去上层醚液于试管中 D、40用 N2吹干加 20ul 甲醇定容 2 、说明：A、尿样经离心后取上层尿液,易于分别 B、此法从国外

29、引进,将原先的梯度洗脱改为等度洗脱；国外的梯度洗脱是用两种配比的流淌相切换洗脱 C、TTCA纯品需自己纯化 五、呼出气中 CS2 测定（一） GC法 1、样品处理：（1）、呼出气中 CS2浓度在测定范畴内不需要处理,直接进样（2）、呼出气中 CS2低于测定浓度范畴需富集,用 Tenron GC管富集 2、色谱条件：固定相： OV-17；检测器：火焰光度检测器 3、说明：（1）采集终末呼出气,最终呼出的 100ml （2）TenronGC管： 2,6-二苯基对苯醚的多孔聚合物, 用于捕集 / 热解吸（3）富集测定要求做富集空白测定：用180ml 气体（冲洗气）注入空白Tenron GC 管中,热

30、解吸后测定（二）检气管法：快速检测法1、依据检气管中形成色带长度,粗略估量浓度2、特点：操作简洁、快速、成本低、精度差,相 对 偏 差 达 20%-30%以 上 第 四 章 芳 香 烃 及 其 代 谢 产 物 第 一节 苯 一、代谢及生物监测指标 1、吸取：主要是呼吸道,其次是皮肤 2、代谢与排泄 1 ）吸入的苯约 50%以上以原形从肺中排出,约 10%以原形储存在有机组织中 2 ）约 40%进入血液循环,在肝中代谢,代谢产物 50%-70%的苯酚, 6%为间苯二酚, 2%为对苯二酚,仍有极少量的粘糖酸等都以结合态从尿中排出 3）有极少量的苯以原形从尿中排出 3、生物检测指标： 1 ）尿酚 A

31、、因正常人尿中很有酚且个体差异大 B、尿酚不是特异性指标 C、仅用于群检 2 ）呼出气中的苯：在测定尿酚以后,测定呼出气中苯作为确认试验 3）尿苯：1993 年有人提出用尿苯作苯接触的生物接触指标,目前,仍没纳入生物监测指标 二、呼出气中苯的测定 GC法（一）原理：用塑料袋或采样管收集呼出气,呼出气用 280热解吸,用载气（N2）导入色谱仪,N2吹入活性炭管吸附（ -78 ）FID 检验,通过六通阀切换完名师归纳总结 成（二）苯标准气的配制：注入20ul 苯于 100ml 玻璃配气瓶中,临用第 6 页,共 9 页时从中抽取肯定体积注入另一配气瓶中稀释成20ng/ml 的苯标准气（三）测定：1）

32、取苯标准气（ 0.5 、1.0 、2.0ul ）和样品分别注入呼吸气的采样管中2）将采集管37 摄氏度恒温2h 3）一端与六通阀连接,一端接N2 4）吹入冷阱（-78）中的活性炭管5）热解吸导入色谱仪三、- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 尿酚的测定 GC法学习必备欢迎下载21、原理：尿样加盐酸加热（90水浴）水解,再用乙醚萃取苯酚2、尿样采集与储存：班末尿50ml 4周 3、样品处理与测定：1）5.0ml 尿样,1ml 浓盐酸于具塞试管中, 90水浴 1h 2）、用 3.0ml 乙醚振摇萃取 3）取上层醚液注入 GC仪 4、标准曲线：苯酚标准系列液用

33、3ml 乙醚提取 4 、色谱条件（ 1）液晶柱分别 分别苯酚和邻间对甲酚；（2）FFAP柱,分离苯酚和对甲酚 5、说明：（1）3ml 乙醚萃取要防止乙醚挥发, 分层后不是 3ml,加乙醚补至 3ml （2）可用内标志法定量 四、甲苯、二甲苯（一）代谢及生物监测指标 1）代谢 1 甲苯 约15%25% 以原型呼出约 1%从尿中排出 约 80%代谢甲苯 O 苯甲酸马尿酸 马尿酸排出的半减期为 23 人；2 二甲苯 约 5%原形从肺中呼出 60%80%生物转化主要终产物是甲基马尿酸 2 ）生物监测指标 1 甲苯尿中马尿酸非特异性对群体判定有肯定的定义呼出气体中甲苯作为确认 2 二甲苯：尿中马尿酸正常

34、人尿中无甲基马尿酸特异性指标（二）、尿中马尿酸的测定比色法（喹啉 苯磺酰氯比色法）（1）原理（2）样品采集 两天后班末尿,按 100+1 体积比加氯仿（3）样品处理与测定（ 4）留意事项：1、试 剂 加 入 顺 序 不 能 颠倒 2、日光对显色有破坏作用要避光放置（加入苯磺酰氯后）第四节 乙苯 一、代谢及生物监测指标（一） 代 谢与排 泄 1 、只有 少部分 以原形从呼 吸道排出；2、70%以上代谢后随尿排出, 主要代谢产物为扁桃酸60%苯酰甲酸 25% （二）监测指标： 1、呼出气体中乙苯 2、尿中扁桃酸（非特异性）二、生物监测方法： 1、呼出气体中乙苯的测定GC法与呼出气中笨的测定类似 2

35、、尿中扁桃酸的测定 HPLC法 内标法定量 内标物 4- 羟基苯甲酸 第五章 芳香族硝基和氨基化合物 第一节 苯胺 一、代谢和生物监测指标 1 、吸取：主要通过呼吸道吸取,很简洁经皮肤吸取 基羟胺对氨基酚2、代谢 主要代谢途径：苯胺苯接触 24h 后,有 1560%转化为对氨基酚、名师归纳总结 以结合态随尿排出3、生物监测指标： 尿中对氨基酚正常人尿中含第 7 页,共 9 页微量对氨基酚平均3.7mg/L 二、尿中对氨基酚的测定（一）盐酸萘乙二胺分光光度法 1 、原理：尿中对氨基酚经水解；萃取分别重氮化偶合显色；重氮化试剂：亚硝酸盐偶和显色剂：盐酸萘乙二胺2、操作要点 1样品处理： 盐酸酸化沸

36、水浴水解约1 人萃取先用 NaOH调中性, 用乙酸乙酯萃取,再用盐酸溶液反萃取；2 重氮化偶合反映重氮化,酸性条件下加过量的亚硝酸盐、反应10min 除过量 的NaNO2 液 加 氨 基 磺 酸 胺 溶 液 至 无 色 气 泡 产 生 止 放10min 偶合反应显色：加盐酸萘乙二胺生成紫红色3 比色定量580nm 尿空白管作参比,标准曲线法定量3、说明： 1 尿样应采集班末或班后尿,采样前要询问受检者是否服用药物2 重氮化反应,NaNO2过量才能完全重氮化但 NaNO2对偶和显色有干扰3 重氮化反应应在尽量低温条件下进行,而偶合反应在60 为宜,水浴加热前,偶合剂加入后充分混合（二） HPLC

37、法 1样品处理： 1 水解,同上- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载法 2 萃取 先在酸性条件下用乙酸乙酯萃取 再在中 性条件下用乙酸乙酯萃取对氨基酚 两次萃取除杂质 2 、说明： P96 用磷酸氢二钾（ 弱 碱 ） 调 节 PH 值 第 二 节 ： 硝 基 苯 一 、 代 谢 产 物 和生 物 监 测 指标 1 、吸取：很简洁从皮肤吸取,主要从呼吸道吸取； 2 、代谢：代谢产物有硝基酚和氨基酚仍有少量苯胺, 对硝基酚 1316%,对氨基酚 10%； 3、排出：代谢产物与葡萄糖醛酸和硫酸结合,随尿排出； 少量以原形级微量本案随呼出气排出

38、； 4 、生物监测指标 尿中对硝基酚（特异性）二、尿中对硝基苯酚的测定 P98 （一）、邻甲酚分光光度法 1 、原理：尿样经酸水解；苯取 先用混合有机溶剂取,再用氢氧化铵溶液反萃取；仍原 用三氯化钛将其仍原成对氨基酚；邻甲酚显色 蓝色 600nm 比色定量； 2 、样品处理： 1）水解 盐酸酸化沸水浴 1h；2）萃取 先用异戊醇石油醚乙醚萃取,再用 3mol/L 氯水反萃取；3、显色测定 先加邻甲酚,再加三氯化钛溶液；立刻振摇至黄色沉淀变成淡黄色沉淀,过滤 30min 后600nm测定吸光度； （二）HPLC法 1 、样品处理 1）水解同上法；2）萃取 二氯甲烷萃取 3 次定容至 20ml；

39、2 、说明1）尿液采集后,尽快加盐酸,10o c以下运输； 2）流淌相配比和流速可依据仪器性能调整；第三节：三硝基甲苯 TNT 2,4,6 三硝基甲苯代谢； 2）以仍原代谢途径为主,主要代谢物一. 代谢 1）经氧化仍原化合等途径4硝基 2,6二硝基甲苯； 3）各种代谢产物以结合态随尿排出；二. 生物监测指标 4A 三.GC 法测定尿中 4A 1 、样品处理： 1）盐酸酸化沸水浴 1h；2）萃取代谢 加固体碳酸氢钠调 PH78 用甲苯萃取（尿样 1ml,甲苯 1ml）2. 色谱条件：1）检测器 ECD 2）固定相： OV17（固定液）3）柱温 220程序升温成效更好 200（0.4min ）10

40、 /min 2205/min 240第六章：卤代烃化合物及其代谢产物的测定 第一节：氯乙烯 一、代谢 1）经呼吸道吸入大部分以原形从呼吸道中排出 2 ）少部分在肝脏转化先转化成一种致癌活性物环氧氯乙烯 在甘光甘肽或 半胱氨酸参加下最终代谢物为亚硫基二乙酸（硫代二乙酸）3）少量的氯乙烯以原形随尿液排出 二、生 物 监 测 指 标 ： 尿 中 硫 代 氯 乙 酸 , 呼 出 气 中 氯 乙 烯 很 少 作 为 检 测 指标 三 GC法测定尿中硫代氯乙酸（一）原理 尿样经酯化后水蒸气蒸至近干 甲醇乙醚溶解其中的硫代二乙酸 酯化 重氮甲烷酯化 火焰光度计监测（二）样品处理：1）1ml 尿液加 0.1m

41、lHCl 酯化 2）瓷蒸发皿水蒸气蒸干至结晶状态 3 ） 甲 醇 乙 醚 溶 解 残 渣 , 上 层 夜 转 入 离 心 管 混 水 浴 浓 缩 至1ml （三）酯化：（通风柜中进行）亚硝基甲脲与氢氧化钠溶液反应生成重氮甲烷气体导 入样液酯化溶液至浅黄色为止,在放置 10min,最终用甲醇定容；（四）留意事项？第三节：三氯乙烯和四氯乙烯 一、代谢与生物监测指标（一）代谢 1. 三氯乙烯 1）吸入约 20%以原形从肺中排出 2）有 5060% 储存在体内（蓄积性）3）大部分在肝中转化成三氯乙酸和三氯名师归纳总结 乙醇仍有少量一氯乙酸4）脱离接触50h 后,尿中三氯乙酸浓度达到最第 8 页,共 9 页高；2. 四氯乙酸约 98%经肺排出约 2%代谢转化成三氯乙酸