白血病免疫分型精选PPT.ppt

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1、关于白血病免疫分型关于白血病免疫分型第1页，讲稿共34张，创作于星期二应用目的：n n 确定淋巴系病变的起源和分化程度；确定淋巴系病变的起源和分化程度；n n 鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病；鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病；n n 确定髓系白血病各亚型；确定髓系白血病各亚型；n n 对形态学分类不明细胞进行定性；对形态学分类不明细胞进行定性；n n 诊断急性未分化型白血病；诊断急性未分化型白血病；n n 诊断急性混合细胞白血病；诊断急性混合细胞白血病；n n 诊断微小残留白血病或白血病浸润；诊断微小残留白血病或白血病浸润；n n 判断白血病判断白血病/淋巴瘤预后。淋巴瘤预后。第2页

2、，讲稿共34张，创作于星期二 流式细胞术(Flow Cytometry):对高速流过检测区的单个细胞或生物颗粒进行多参数、快速分析（或分选）的一种技术。第3页，讲稿共34张，创作于星期二第4页，讲稿共34张，创作于星期二数据显示方式：单参数直方图 双参数二维点图 等高图 二维密度图 三维图第5页，讲稿共34张，创作于星期二单参数直方图双参数点图第6页，讲稿共34张，创作于星期二荧光素荧光素n nFITC(FITC(异硫氰酸荧光素）：异硫氰酸荧光素）：530nm530nm（绿绿）n nPE（藻红蛋白）：575nm（橙黄）n nPI(PI(碘化丙啶）：620nm620nm（橙红）n nPerCP(

3、PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白）：多甲藻黄素叶绿素蛋白）：675nm（深红）n nAPC(APC(别藻兰蛋白）：别藻兰蛋白）：660nm（红）第7页，讲稿共34张，创作于星期二 检测物：细胞表面、胞浆或胞核抗原性物质第8页，讲稿共34张，创作于星期二CD（cluster of differentiation）：1982年起将识别同一分化抗原的来自不同实验室的单克隆抗体归为一个分化群，并进行流水编号。一个CD相关抗体可包含多个克隆号。其他非CD系列抗原：如TCR、HLA等第9页，讲稿共34张，创作于星期二正常血细胞中的抗原表达特点正常血细胞中的抗原表达特点1.1.系列保守性系列保守性2.2.时

4、序性时序性3.3.抗原表达量的模式化抗原表达量的模式化第10页，讲稿共34张，创作于星期二干细胞嗜碱性细胞嗜酸性细胞定向髓系干细胞红系巨核系粒单核系粒系单核系CD36 CD71 CD235aCD41 CD42a/b CD61CD4 CD11b CD14 CD64 HLA-DRCD36CD15 CD71 CD16(TDT CD7)CD34 CD117 CD13 CD33CD38 MPOCD34 CD13 CD33 CD117MPO第11页，讲稿共34张，创作于星期二抗原刺激干细胞早前B前B静止期BPro-B ALLPre-B ALLCommon-B ALLCLL/SLL免疫母细胞浆细胞样淋巴细胞

5、大B细胞淋巴瘤淋巴浆细胞淋巴瘤外套细胞滤泡区母细胞中心母细胞中心细胞边缘带细胞浆细胞套细胞淋巴瘤伯基特淋巴瘤大B细胞淋巴瘤滤泡淋巴瘤边缘带淋巴瘤骨髓瘤TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD10 c-TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD20 CD10+c-TDT+CD34 cCD79a+CD19+CD20+CD10 c+CD5+CD19+CD20 CD22+CD23+sIg+FMC7-CD38 CD138 CD56 cIg CD19-CD45-CD22+CD5-CD10-CD23-CD22+CD10+FMC7+CD23 bcl-2+CD5-CD19+CD20+CD22+CD38

6、+IgM+sIg+CD22+CD10+sIg+CD34-TDT-CD5+CD22+sIg+FMC7+Cyclin D1+CD23-CD22+bcl-6+CD10 CD5 CD30 第12页，讲稿共34张，创作于星期二干细胞胸腺期胸腺期TDT+CD34+CD2cCD3CD7CD71TDT+CD34CD1aCD2cCD3CD7CD4CD8胸腺期TDT+CD2CD3CD5CD7CD4/CD8TCRPrecursor-T ALL成熟T细胞各分化群第13页，讲稿共34张，创作于星期二 造血细胞在其分化、发育过程中，细胞膜、细胞浆或造血细胞在其分化、发育过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的有无、表达强弱与血

7、细胞的分化发育阶段密切胞核抗原的有无、表达强弱与血细胞的分化发育阶段密切相关，表现出与相关，表现出与细胞系列细胞系列及其及其分化程度分化程度相关的特性。相关的特性。第14页，讲稿共34张，创作于星期二白血病细胞中的抗原表达特点白血病细胞中的抗原表达特点 表达模式基本与相应阶段正常细胞相似，还具有以下特表达模式基本与相应阶段正常细胞相似，还具有以下特点：点：1.1.跨系表达跨系表达 2.2.时相混乱时相混乱 3.3.抗原表达量的改变抗原表达量的改变第15页，讲稿共34张，创作于星期二免疫分型四种急性白血病免疫分型四种急性白血病n n单表型急性白血病n n表达某一个系列抗原为主的急性白血病n n双

8、表型/双克隆急性白血病n n未分化型急性白血病第16页，讲稿共34张，创作于星期二各系急性白血病重要抗原指标各系急性白血病重要抗原指标1.1.急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病 (AL)(AL)敏感性敏感性 特异性特异性B-ALL:B-ALL:CD19 100%CD19 100%非特异非特异cCD79a 99%cCD79a 99%特异特异T-ALL:T-ALL:CD7 100%CD7 100%非特异非特异cCD3 100%cCD3 100%特异特异第17页，讲稿共34张，创作于星期二2.2.急性髓细胞白血病急性髓细胞白血病 (AML)(AML)表达率表达率 特异性特异性CD13 70%CD1

9、3 70%非特异非特异CD33 70%CD33 70%非特异非特异CD117 70%CD117 70%特异特异cMPO 70%cMPO 70%特异特异第18页，讲稿共34张，创作于星期二错译表达（Ly+AML，My+ALL）：白血病细胞表达非本系细胞抗原标志物，具有预后意义。第19页，讲稿共34张，创作于星期二ALL CD13，CD33t(9;22)AML CD2+，DR-M3 t(15;17)，或，或RAR+，t(11;17)CD2+，DR+M4Eo inv(16)或或 t(16;16)CD19+M0t(9:22)多见多见 M2t(8;21)TdT+,CD7+见于见于M0 CD56+M5/M

10、4第20页，讲稿共34张，创作于星期二双表型急性白血病记分系统双表型急性白血病记分系统分值分值 B B系系 T T系系 髓系髓系 2 cCD79a cCD3 cMPO2 cCD79a cCD3 cMPO CD22 TCR CD22 TCR cIgM TCR cIgM TCR 1 1 CD19 CD2 CD117CD19 CD2 CD117 CD10 CD5 CD13 CD10 CD5 CD13 CD20 CD8 CD33 CD20 CD8 CD33 0.5 TdT TdT CD14 0.5 TdT TdT CD14 CD24 CD7 CD15 CD24 CD7 CD15 CD64 CD64第2

11、1页，讲稿共34张，创作于星期二部分慢性部分慢性B B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型 CD5CD5CD10CD10CD19CD19CD22CD22CD23CD23HLA-DRHLA-DRFMC7FMC7SIgSIgCD11cCD11cCLLCLL+-+/-+/-+-+/-+/-PLLPLL-+-+-MCLMCL+-/+-/+-+-HCLHCL-+-+FCLFCL-+-/+-/+/-+/-+-MZLMZL-+-+/-+/-LPLLPL-+-/+-/+-/+-/+注：注：注：注：HCL CD103+CD25+HCL CD103+CD25+第22页，讲稿共34张，创作于星期

12、二部分慢性部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型CD2CD2CD3CD3CD5CD5CD7CD7CD4CD4CD8CD8CD25CD25CD56CD56CD57CD57T-CLL/PLLT-CLL/PLL+/-+/-/+-/+-T-LGLT-LGL+/-+/-+/-+/-+-/+-/+NK-LGLNK-LGL+-+/-+/-+-ATLATL+-+肝脾T细胞淋巴瘤：CD2+CD3+CD7+TCR+CD16+/-CD56+/-CD8-/+CD4-TCR-第23页，讲稿共34张，创作于星期二n n标本种类：怀疑含有病变细胞的组织或体液，如外周血、骨髓、胸腹水、脑脊液、淋巴

13、结等。n n标本要求：细胞有活性，最好不要超过48h。第24页，讲稿共34张，创作于星期二光散射特征与细胞形态的关系光散射特征与细胞形态的关系第25页，讲稿共34张，创作于星期二淋巴淋巴单核粒细胞CD45CD45M4/M5M 3正常正常白血病白血病L13,M02 M6,M7TSSCSSCMM 非造非造血血 来源细胞来源细胞CD45在免疫分型中的应用意义在免疫分型中的应用意义原始原始嗜嗜碱碱嗜酸嗜酸第26页，讲稿共34张，创作于星期二正常骨髓正常骨髓第27页，讲稿共34张，创作于星期二AML-M1AML-M1AML-M2AML-M2AML-M3AML-M3AML-M4/M5AML-M4/M5第28页，讲稿共34张，创作于星期二AML-M6AML-M6非造血细胞非造血细胞非特异性染色（死亡细胞）非特异性染色（死亡细胞）ALLALL第29页，讲稿共34张，创作于星期二分类不明细胞分类不明细胞第30页，讲稿共34张，创作于星期二B B细胞克隆性细胞克隆性第31页，讲稿共34张，创作于星期二结果报告第32页，讲稿共34张，创作于星期二 白血病免疫分型其他方法：酶-底物显色 荧光显微镜 第33页，讲稿共34张，创作于星期二感感谢谢大大家家观观看看第34页，讲稿共34张，创作于星期二