植物器官培养精选PPT.ppt

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1、关于植物器官培养第1页，讲稿共40张，创作于星期二器官培养器官培养(Organ culture)植物某一器官的全部或部分或器官原基的培养。植物某一器官的全部或部分或器官原基的培养。根根段、根尖、段、根尖、茎茎段、茎尖、段、茎尖、块茎、球茎、块茎、球茎、叶叶片、子叶、片、子叶、花花序、花瓣、子房、序、花瓣、子房、花药花药、花托、花托、果果实、实、种子种子等。等。第2页，讲稿共40张，创作于星期二l外植体选择：外植体选择：p28l洗涤：洗涤：p19l灭菌：器皿灭菌灭菌：器皿灭菌p20，外植体消毒外植体消毒p29第一节第一节 植物器官及组织培养的一般程序植物器官及组织培养的一般程序n培养基的选择：基

2、本培养基生长调培养基的选择：基本培养基生长调节剂节剂p21n培养基配置：特别是植物生长调节剂配置、培养基配置：特别是植物生长调节剂配置、保存保存p26-27n培养基灭菌：（尤其是某些不能高温培养基灭菌：（尤其是某些不能高温高压灭菌的物质）高压灭菌的物质）p20无无 菌菌 操操 作（技术）作（技术）p21Success!植物（活体）植物（活体）培养基（载体）培养基（载体）第3页，讲稿共40张，创作于星期二一般程序一般程序(p29-30)外植体取材外植体取材 自来水冲洗自来水冲洗10min以上以上 表面消毒表面消毒10-30s 选择适合消毒剂处理选择适合消毒剂处理无菌水冲洗无菌水冲洗3-5次次 放

3、入无菌培养皿备用放入无菌培养皿备用(剪成小段置于烧杯剪成小段置于烧杯剪成小段置于烧杯剪成小段置于烧杯)7070酒精酒精酒精酒精数分钟数分钟数分钟数分钟(p29)(p29)外植体消毒外植体消毒第4页，讲稿共40张，创作于星期二植物组织培养形态发生和植株再生植物组织培养形态发生和植株再生外植体外植体外植体外植体(Explant)(Explant)DedifferentiationDedifferentiationRedifferentiationRedifferentiation体细胞胚胎发生体细胞胚胎发生体细胞胚胎发生体细胞胚胎发生 途径途径途径途径2 2(Somatic embryogenes

4、is)(Somatic embryogenesis)器官发生器官发生器官发生器官发生 途径途径途径途径1 1(Organegenesis)(Organegenesis)PlantPlant愈伤组织愈伤组织愈伤组织愈伤组织(Callus)(Callus)第5页，讲稿共40张，创作于星期二一、概念和意义一、概念和意义1.1.茎尖培养概念茎尖培养概念茎尖茎尖分生组织分生组织培养培养指对不超过指对不超过0.1mm的茎尖或的茎尖或几十微米几十微米的茎尖进行的培养。的茎尖进行的培养。特点：可获特点：可获脱病毒苗脱病毒苗，操作困难，成苗时间长。，操作困难，成苗时间长。普通普通茎尖培养茎尖培养对对几毫米几毫米

5、至至几十毫米几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养。长的茎尖、芽尖及侧芽的培养。操作技术简单、易成活、成苗时间短、繁殖速度快。操作技术简单、易成活、成苗时间短、繁殖速度快。第二节第二节 茎尖培养茎尖培养第6页，讲稿共40张，创作于星期二茎段茎段 茎尖取材有限，茎尖取材有限，可采用可采用带芽带芽或或不带芽不带芽的茎段进行培养。的茎段进行培养。优点优点容易成功、变异小、容易成功、变异小、性状一致、繁殖速度快。性状一致、繁殖速度快。用于用于快速繁殖快速繁殖。第7页，讲稿共40张，创作于星期二茎尖培养茎尖培养在园艺植物离体培养中最常见，在园艺植物离体培养中最常见，可可快速繁殖快速繁殖无性系；无性系；培养培

6、养脱病毒苗脱病毒苗、品种改良品种改良；基础研究。基础研究。2.2.茎尖培养意义茎尖培养意义蜡梅蜡梅茎段茎段第8页，讲稿共40张，创作于星期二（一）建立无菌材料（一）建立无菌材料 健壮枝梢健壮枝梢 去除叶片去除叶片 分成分成1-2cm1-2cm 自来水冲洗消毒自来水冲洗消毒 75%75%的酒精的酒精3030秒秒 0.1%0.1%升汞或升汞或2%2%次氯酸钠消毒次氯酸钠消毒8-10min8-10min 无菌水无菌水 修剪剥离茎尖，通常切割下顶端修剪剥离茎尖，通常切割下顶端 通常切割下顶端通常切割下顶端0.1mm0.1mm叶原基的茎尖叶原基的茎尖 无菌水无菌水 接种。接种。二、茎尖培养一般方法二、茎

7、尖培养一般方法（茎尖（茎尖分生组织分生组织）第9页，讲稿共40张，创作于星期二（二）培养基（二）培养基多为多为MS培养基及其改良配方，培养基及其改良配方，还有还有White配方、配方、B5配方、配方、Heller配方、配方、Gautheret配方等。配方等。第10页，讲稿共40张，创作于星期二1.1.固体培养固体培养法法特点特点琼脂做凝固剂，茎尖琼脂做凝固剂，茎尖基部紧贴基部紧贴培养基。培养基。优点优点操作较为简单，普遍。操作较为简单，普遍。缺点缺点对对有些植物有些植物培养较难。培养较难。操作操作培养基分装培养基分装灭菌灭菌冷却冷却茎尖接种茎尖接种252533培养。培养。（三）培养方法（三）培

8、养方法第11页，讲稿共40张，创作于星期二2.2.纸桥培养法纸桥培养法滤纸滤纸取代取代琼脂琼脂，液体培养基液体培养基。优点优点营养物质能均衡持久地供给外植体，利于外植体健康生长。营养物质能均衡持久地供给外植体，利于外植体健康生长。缺点缺点操作复杂。操作复杂。第12页，讲稿共40张，创作于星期二茎尖培养可进行植物的茎尖培养可进行植物的无性快繁无性快繁，并且技术较为成熟，也叫并且技术较为成熟，也叫微繁技术微繁技术。三、普通茎尖培养与繁殖技术三、普通茎尖培养与繁殖技术第13页，讲稿共40张，创作于星期二（一）茎尖微繁技术的一般方法（一）茎尖微繁技术的一般方法1.无菌培养体系的建立无菌培养体系的建立外

9、植体外植体制备制备正在生长的正在生长的芽芽或腋芽、茎段、鳞茎切块、块茎、球茎。或腋芽、茎段、鳞茎切块、块茎、球茎。茎尖组织大小为带茎尖组织大小为带2-4个叶原基个叶原基或更多。或更多。操作程序操作程序类似一般无菌操作基本技术，类似一般无菌操作基本技术，基本培养基：基本培养基：MS、B5、White等，等，糖糖2-3%，生长调节剂。生长调节剂。培养条件培养条件1000-3000Lx、16hr、25。第14页，讲稿共40张，创作于星期二茎尖的发育方向及调节是采用茎尖的发育方向及调节是采用生长调节剂生长调节剂，6-BA6-BA、KTKT等促进发芽，等促进发芽，IBAIBA、NAANAA、2,4-D2

10、,4-D促生根。促生根。培养的茎尖可能有几种不同的发育方向培养的茎尖可能有几种不同的发育方向 (1)腋芽腋芽萌发萌发 (2)脱分化后产生脱分化后产生胚状体胚状体 (3)脱分化后脱分化后直接产生直接产生不定器官不定器官 (4)脱分化后形成脱分化后形成愈伤组织愈伤组织 用作悬浮培养细胞或原生质体的起始材料，用作悬浮培养细胞或原生质体的起始材料，或用以分化大量或用以分化大量胚状体胚状体，或不定芽或不定芽.2.2.脱分化和再分化脱分化和再分化第15页，讲稿共40张，创作于星期二3.3.生根成苗生根成苗胚状体胚状体可直接成苗，可直接成苗，腋芽腋芽和不定芽须转入和不定芽须转入生根培养基生根培养基培养。培养

11、。矿质元素矿质元素高利于茎叶生长，高利于茎叶生长，低低利于生根，故生根培养基中无机盐低。利于生根，故生根培养基中无机盐低。芽苗生根采取的措施芽苗生根采取的措施 (1)(1)降低基本培养基无机盐浓度降低基本培养基无机盐浓度 一般采用一般采用1/2MS1/2MS或改良或改良WhiteWhite基本培养基。基本培养基。(2)(2)调节生长素浓度调节生长素浓度 采用采用IBAIBA或或NAANAA0.1-0.5mg/L0.1-0.5mg/L有利于分化根。有利于分化根。(3)(3)添加吸附剂添加吸附剂 如如活性碳活性碳。(4)(4)减少琼脂用量。减少琼脂用量。第16页，讲稿共40张，创作于星期二试管苗的

12、移栽应在生根后不久，当试管苗的移栽应在生根后不久，当小根尚未停止生长小根尚未停止生长之前及时移栽。之前及时移栽。（小根（小根5cm5cm左右）。左右）。即将形成的小植株转移到土壤的过程。即将形成的小植株转移到土壤的过程。这个过程是微繁殖最关键的一步。这个过程是微繁殖最关键的一步。保持小苗保持小苗水分供需平衡水分供需平衡选择选择适当的介质适当的介质 珍珠岩、蛭石、粗砂、炉灰渣、锯木屑等。珍珠岩、蛭石、粗砂、炉灰渣、锯木屑等。防止防止杂菌杂菌滋生滋生 保持环境干净，农药灭菌。保持环境干净，农药灭菌。注意光温管理注意光温管理 避免阳避免阳光光直射、直射、温度温度适宜。适宜。4.4.试管苗的移植试管苗

13、的移植第17页，讲稿共40张，创作于星期二(二二)影响茎尖培养微繁殖的因素影响茎尖培养微繁殖的因素p基因型基因型p外植体的大小外植体的大小p供试植株的生理状态供试植株的生理状态p芽在植株上的部位芽在植株上的部位p供试植株的年龄供试植株的年龄p培养基：培养基：植物生长物质植物生长物质p褐变褐变p玻璃化玻璃化玻璃化苗的玻璃化苗的叶和嫩梢叶和嫩梢呈水晶透明或半透明水渍状；呈水晶透明或半透明水渍状；整株整株矮化肿胀、失绿；矮化肿胀、失绿；叶片叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎；皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎；叶表叶表缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，不具栅栏组织，仅有海绵组织。缺少角质层蜡质，没有功能性气孔，不具栅

14、栏组织，仅有海绵组织。玻璃化苗中因其体内含水量高，玻璃化苗中因其体内含水量高，干物质、叶绿素、蛋白质、纤维素和酶活性降低，干物质、叶绿素、蛋白质、纤维素和酶活性降低，组织畸形，器官功能不全，组织畸形，器官功能不全，分化能力降低，所以很难成活，分化能力降低，所以很难成活，严重影响组培苗严重影响组培苗繁殖率繁殖率的提高。的提高。第18页，讲稿共40张，创作于星期二一、离体叶培养概念及意义一、离体叶培养概念及意义1.1.离体叶培养概念离体叶培养概念 指包括叶原基、叶柄、叶鞘、指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片叶片、子叶子叶等的无菌培养。等的无菌培养。多经脱分化形成多经脱分化形成愈伤组织愈伤组织，再由后者

15、分化出茎和根。再由后者分化出茎和根。第三节第三节 叶的培养叶的培养桫椤叶片桫椤叶片第19页，讲稿共40张，创作于星期二研究研究叶形态建成叶形态建成、光合作用光合作用、叶绿素形成叶绿素形成等理论问题的良好方法。等理论问题的良好方法。叶原基叶原基培养成为培养成为成熟叶成熟叶，从而观察，从而观察叶形态发生叶形态发生的过程。的过程。通过叶片组织的脱分化和再分化培养，以证实叶细胞的通过叶片组织的脱分化和再分化培养，以证实叶细胞的全能性全能性。通过离体叶组织、细胞的培养，通过离体叶组织、细胞的培养，探索离体叶组织、细胞探索离体叶组织、细胞培养的条件和影响因素培养的条件和影响因素。利用离体叶组织的再生特性，

16、建立植物利用离体叶组织的再生特性，建立植物体细胞快速无性繁殖系体细胞快速无性繁殖系，提高某些提高某些不易繁殖不易繁殖植物的繁殖系数。植物的繁殖系数。叶细胞培养物叶细胞培养物是良好的遗传是良好的遗传诱变系统诱变系统，经过自然变异或者人工诱变处理可筛选出突变体应用于经过自然变异或者人工诱变处理可筛选出突变体应用于育种育种实践。实践。2.2.离体叶培养意义离体叶培养意义第20页，讲稿共40张，创作于星期二（一）叶原基培养（一）叶原基培养 叶原基培养是研究形态建成的重要手段。叶原基培养是研究形态建成的重要手段。1.采用采用休眠期顶芽休眠期顶芽，剥去一部分鳞片。，剥去一部分鳞片。2.在在5%次氯酸钠次氯

17、酸钠溶液中浸泡溶液中浸泡20min，进行表面消毒。，进行表面消毒。3.切取柱状叶原基进行培养。切取柱状叶原基进行培养。培养基培养基采用采用Knops无机盐（部分修改）或无机盐（部分修改）或Kundson（1951）配方（大量元素），）配方（大量元素），添加添加Nitsch配方中的微量元素（再加配方中的微量元素（再加CoCl225mg/L）2%蔗糖、蔗糖、pH5.5。部分部分实验中添加维生素、实验中添加维生素、NAA、水解酪蛋白等，、水解酪蛋白等，温度温度24，人工光照，人工光照24h。二、叶培养方法二、叶培养方法第21页，讲稿共40张，创作于星期二第22页，讲稿共40张，创作于星期二1.1.叶

18、组织培养培养的方法叶组织培养培养的方法（二）叶组织培养（二）叶组织培养方法一方法一（幼嫩叶片）（幼嫩叶片）选取植株顶端选取植株顶端未充分展开未充分展开的幼嫩叶片的幼嫩叶片流水流水冲洗冲洗蘸有少量蘸有少量75%酒精酒精的纱布擦拭叶片两面的纱布擦拭叶片两面放入放入0.1%升汞溶液中消毒升汞溶液中消毒5-8min无菌水无菌水冲洗冲洗3-4次次消毒后叶片转入到铺有消毒后叶片转入到铺有滤纸滤纸的无菌的无菌培养皿培养皿内内解剖刀切成解剖刀切成0.5cm0.5cm0.5cm0.5cm左右的左右的小块小块或薄片（如叶柄和子叶）或薄片（如叶柄和子叶）上表皮朝上上表皮朝上接在固体培养基上培养。接在固体培养基上培养

19、。第23页，讲稿共40张，创作于星期二 70%酒精漂洗约酒精漂洗约10秒秒饱和饱和漂白粉漂白粉液中浸液中浸3-15分钟分钟无菌水冲洗数次无菌水冲洗数次放在无菌的干滤纸上吸干水分以供接种用。放在无菌的干滤纸上吸干水分以供接种用。对一些对一些粗糙粗糙或或带绒毛带绒毛的叶片要的叶片要延长延长灭菌时间。灭菌时间。注意要选择成熟的叶片。注意要选择成熟的叶片。同一叶片的同一叶片的栅栏组织栅栏组织比海绵组织较成熟。比海绵组织较成熟。培养叶肉组织时因海绵组织在分裂前就死亡，培养叶肉组织时因海绵组织在分裂前就死亡，如果栅栏组织不发达就难培养。如果栅栏组织不发达就难培养。方法二（成熟叶片）方法二（成熟叶片）第24

20、页，讲稿共40张，创作于星期二叶叶片片愈愈伤伤组组织织诱诱导导形形成成第25页，讲稿共40张，创作于星期二常用常用MS、B5、White、N6等培养基，等培养基，3%糖，糖，培养基中添加培养基中添加椰子汁椰子汁等有机添加物，等有机添加物，有利于叶片组织培养中的形态发生。有利于叶片组织培养中的形态发生。大多数双子叶植物的叶组织培养，大多数双子叶植物的叶组织培养，细胞分裂素细胞分裂素特别是特别是KT、6-BA有利于芽的形成，有利于芽的形成，生长素生长素特别是特别是NAA有利于根的发生，有利于根的发生，2,4-D有利于愈伤组织的形成。有利于愈伤组织的形成。一般一般 6-BA 1-3mg/L NAA

21、0.25-1mg/L 2.2.培养基培养基第26页，讲稿共40张，创作于星期二25-28，光照光照12-14h，光照度光照度 1500-2000Lx，不定芽分化和生长期间不定芽分化和生长期间3000-10000Lx。3.3.培养条件培养条件第27页，讲稿共40张，创作于星期二 直接产生直接产生不定芽不定芽；由由愈伤组织愈伤组织产生不定芽；产生不定芽；胚状体胚状体形成；形成；其他途径。其他途径。叶片的叶片的分化程度分化程度较高，较高，一般需要通过诱导一般需要通过诱导愈伤组织愈伤组织并经再分化才能产生植株，并经再分化才能产生植株，变异率较高变异率较高。再分化能力弱再分化能力弱的植物种类而言，叶片离

22、体再生的难度相当大。的植物种类而言，叶片离体再生的难度相当大。4.4.离体叶组织的茎和芽发生途径离体叶组织的茎和芽发生途径第28页，讲稿共40张，创作于星期二5.5.影响叶肉组织培养的因素影响叶肉组织培养的因素（1）基因型基因型 不同植物不同植物种类种类、同一物种的不同同一物种的不同品种品种间在叶组织培养特性上有间在叶组织培养特性上有一定的差异一定的差异。（2）细胞分裂素与生长素的组合细胞分裂素与生长素的组合 两种细胞分裂素都能促进芽的分化，两种细胞分裂素都能促进芽的分化，6-BA的作用好于的作用好于KT，但但6-BA对不定芽的进一步发育（茎叶的形成）有抑制作用。对不定芽的进一步发育（茎叶的形

23、成）有抑制作用。细胞分裂素与生长素的细胞分裂素与生长素的组合组合 细胞分裂素与生长素配合使用，细胞分裂素与生长素配合使用，诱导诱导芽分化芽分化效果好于单独使用细胞分裂素。效果好于单独使用细胞分裂素。第29页，讲稿共40张，创作于星期二（3 3）供试植株的发育时间和叶龄）供试植株的发育时间和叶龄 个体发育早期的个体发育早期的幼嫩叶片幼嫩叶片较成熟幼嫩叶片较成熟幼嫩叶片分化能力高分化能力高，（4 4）叶脉）叶脉 叶脉、叶柄分化能力叶脉、叶柄分化能力较强较强。（5 5）极性）极性 叶背面叶背面朝上朝上放置就放置就不生长不生长。（6 6）损伤）损伤 损伤后损伤后刺激刺激诱导愈伤组织生长和器官发生。诱导

24、愈伤组织生长和器官发生。第30页，讲稿共40张，创作于星期二一、根培养一、根培养（一）根培养的实践意义（一）根培养的实践意义1.1.进行进行根系生理代谢研究根系生理代谢研究的最优良试验体系。的最优良试验体系。2.2.研究研究器官分化、形态建成器官分化、形态建成的良好体系。的良好体系。3.3.建立快速生长的根无性系，对建立快速生长的根无性系，对药物生产药物生产有重要意义。有重要意义。4.4.对根细胞培养物进行对根细胞培养物进行诱变处理诱变处理，可筛选突变体，用于育种实践。，可筛选突变体，用于育种实践。第四节第四节 其他器官的培养其他器官的培养第31页，讲稿共40张，创作于星期二1.1.培养步骤培

25、养步骤 离体根培养的第一步是要获得离体根培养的第一步是要获得无性繁殖系无性繁殖系。直接直接取室外植物的取室外植物的根系根系培养；培养；植物植物种子种子，经灭菌后，在无菌条件下发芽，获得，经灭菌后，在无菌条件下发芽，获得无菌苗无菌苗，取根取根培养。培养。种子表面消毒种子表面消毒无菌条件下萌发无菌条件下萌发根伸长后切取根伸长后切取1.0cm1.0cm长的根尖长的根尖接种于培养基接种于培养基侧根生长侧根生长切取侧根的根尖扩大培养切取侧根的根尖扩大培养获离体根无性系获离体根无性系 （二）离体根的培养方法（二）离体根的培养方法第32页，讲稿共40张，创作于星期二胡萝卜根培养胡萝卜根培养第33页，讲稿共4

26、0张，创作于星期二在一个培养瓶中，有液体和固体培养在一个培养瓶中，有液体和固体培养两个组成部分两个组成部分：根尖根尖部分处于液体培养中，部分处于液体培养中，而而根茎根茎部分则插入含有有机成分的固体部分则插入含有有机成分的固体 培养基中。培养基中。可进行根系生长发育，营养代谢或结瘤试验。可进行根系生长发育，营养代谢或结瘤试验。2.2.离体根培养的试验系统离体根培养的试验系统第34页，讲稿共40张，创作于星期二此装置由此装置由2个部分组成，个部分组成，下部下部是是试管试管，管中装有含无机盐的，管中装有含无机盐的营养液营养液，并接种根瘤菌；并接种根瘤菌；上部上部是是玻璃盖玻璃盖，盖中有一单向开口的管

27、状凹槽，盖中有一单向开口的管状凹槽，槽中盛放含有有机化合物的槽中盛放含有有机化合物的琼脂固体培养基琼脂固体培养基。故故有机营养有机营养从根基部吸收，从根基部吸收，无机营养无机营养从根尖吸收。从根尖吸收。Bunting和和Horrocks1964年年修改了修改了Raggio等的装置等的装置，变为在变为在粗沙中提供无机盐粗沙中提供无机盐。利用这一技术研究菜豆、大豆等离体根利用这一技术研究菜豆、大豆等离体根根瘤菌的固氮根瘤菌的固氮情况，情况，结果表明这些根瘤菌含有血红蛋白，并能固定大气中的氮。结果表明这些根瘤菌含有血红蛋白，并能固定大气中的氮。Raggio1965年等设计了离体根的年等设计了离体根的

28、结瘤实验装置结瘤实验装置。第35页，讲稿共40张，创作于星期二离体根培养多用离体根培养多用无机离子浓度低无机离子浓度低的的WhiteWhite培养基或其他培养基，培养基或其他培养基，MSMS、B5B5等也可采用，但必须将其浓度等也可采用，但必须将其浓度稀释稀释到到2/32/3或或1/21/2。（三）离体根培养所用的培养基（三）离体根培养所用的培养基成份成份 苜蓿浓度苜蓿浓度(mg/L)(mg/L)西红柿浓度西红柿浓度(mg/L)(mg/L)Ca(NO3)2.4H2O 200 143.9Na2SO4 200 100KCl 65 40KNO3 82 NaH2PO4.2H2O 18.6 10.6Mg

29、SO4.7H2O 740 368.5MnSO4.4H2O 4.5 3.35FeC6H5O7.3H2O 4 2.25ZnSO4.7H2O 2.7 1.34H3BO3 1.5 0.75KI 0.8 0.38CuSO4.5H2O 0.004 0.002MoO3 0.02 0.01甘氨酸甘氨酸 3 4 烟酸烟酸 0.5 0.75维生素维生素B1 0.1 0.1维生素维生素B6 0.1 0.1蔗糖蔗糖 20000 15000pH 5.5 5.2 第36页，讲稿共40张，创作于星期二1.1.基因型基因型 不同植物的根对培养的反应不同，不同植物的根对培养的反应不同，番茄、烟草、马铃薯、小麦可番茄、烟草、马铃

30、薯、小麦可快速生长快速生长并继代培养无限生长。并继代培养无限生长。萝卜、豌豆需萝卜、豌豆需长时间长时间且有限。且有限。木本植物木本植物很难很难生长。生长。2.2.营养条件营养条件 硝酸盐硝酸盐是最好氮源，是最好氮源，蔗糖是最好碳源，蔗糖是最好碳源，低低，1-3%1-3%。铁、锰、硼、硫、维生素不能缺少铁、锰、硼、硫、维生素不能缺少。3.3.激素：激素：生长素生长素利于根的形成和生长，不同植物反应不同。利于根的形成和生长，不同植物反应不同。4.pH4.pH：5-65-6，不同材料有差异。，不同材料有差异。5.5.光照和温度：光照和温度：黑暗黑暗有利于根的形成，有利于根的形成，16-2516-25

31、。（四）影响离体根生长的因素（四）影响离体根生长的因素P57-58P57-58第37页，讲稿共40张，创作于星期二二、花的培养二、花的培养整朵花整朵花或花器官（花托、花柄、花瓣、花丝、或花器官（花托、花柄、花瓣、花丝、子房、花药、胚珠子房、花药、胚珠等）等）利用花的培养利用花的培养进行进行花性别决定研究花性别决定研究是可行的，是可行的，特别是对黄瓜、南瓜等雌雄异花植物；特别是对黄瓜、南瓜等雌雄异花植物；果实和种子发育果实和种子发育；花形态发生花形态发生。Galum(1959）最早研究了生长素和赤霉素对黄瓜性别表现的作用。最早研究了生长素和赤霉素对黄瓜性别表现的作用。培养结果：成熟果实；不定芽或

32、丛生芽；愈伤组织。培养结果：成熟果实；不定芽或丛生芽；愈伤组织。第38页，讲稿共40张，创作于星期二三、幼果的培养三、幼果的培养幼果培养幼果培养可以方便地进行可以方便地进行果实果实内内结构变化结构变化与营养、激素、外界条件等关系的研究，与营养、激素、外界条件等关系的研究，以探究以探究果实发育的机制果实发育的机制。Nitsch等（等（1951）首先进行首先进行草莓草莓等植物的幼果培养；等植物的幼果培养；后来，后来，Nicherson（1978）将）将越桔越桔幼果培养成熟，幼果培养成熟，佐藤洋一等（佐藤洋一等（1989）把）把葡萄葡萄的幼果培养成熟，等。的幼果培养成熟，等。培养结果：成熟果实或愈伤组织。培养结果：成熟果实或愈伤组织。第39页，讲稿共40张，创作于星期二感感谢谢大大家家观观看看第40页，讲稿共40张，创作于星期二