糖代谢紊乱的生物化学检验 (2)精选PPT.ppt
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1、关于糖代谢紊乱的生物化学检验(2)第1页,讲稿共53张,创作于星期二掌握糖尿病的概念、诊断标准及分型;血糖及掌握糖尿病的概念、诊断标准及分型;血糖及OGTTOGTT概念、实验原理、操作方法和临床应用;概念、实验原理、操作方法和临床应用;GHbGHb和和GSGSP P测定方法学特点、测定原理和临床应用测定方法学特点、测定原理和临床应用熟悉血糖的来源、去路及调节机制;熟悉胰岛素测定及胰岛熟悉血糖的来源、去路及调节机制;熟悉胰岛素测定及胰岛素释放试验的临床应用;素释放试验的临床应用;C-C-肽测定及肽测定及C-C-肽释放试验的临床应肽释放试验的临床应用;其他体液葡萄糖测定的方法学特点和临床应用用;其
2、他体液葡萄糖测定的方法学特点和临床应用 具有糖类物质检测的能力:能正确采集血液、尿液及其他具有糖类物质检测的能力:能正确采集血液、尿液及其他体液标本,熟悉各种标本处理要求;具有独立的糖尿病检体液标本,熟悉各种标本处理要求;具有独立的糖尿病检测操作能力测操作能力本章学习要求第2页,讲稿共53张,创作于星期二重点讨论糖尿病引起的高血糖症及其相关的实重点讨论糖尿病引起的高血糖症及其相关的实验室检验指标常用的检测指标有:验室检验指标常用的检测指标有:血糖浓度测定;血糖浓度测定;口服葡萄糖耐量试验;口服葡萄糖耐量试验;糖化血红蛋白测定;糖化血红蛋白测定;糖化血清蛋白测定;糖化血清蛋白测定;胰岛素测定及释
3、放试验;胰岛素测定及释放试验;C-C-肽测定及肽测定及C-C-肽释放试验;肽释放试验;酮体、乳酸测定酮体、乳酸测定这些检验指标在糖尿病的病因分类、临床诊断、这些检验指标在糖尿病的病因分类、临床诊断、疗效评估、病情观察及并发症的鉴别诊断方面疗效评估、病情观察及并发症的鉴别诊断方面具有重要的价值具有重要的价值本章主要内容本章主要内容第3页,讲稿共53张,创作于星期二糖糖是是自自然然界界含含量量最最为为丰丰富富的的一一大大类类有有机机化化合合物物,其其化化学学本本质质为为多多羟羟醛醛或或多多羟羟酮酮类类及及其其衍衍生生物物或或多多聚聚物物。植植物物含含量量最最多多约约为为85%-95%85%-95%
4、。人人体体内内的的糖主要指葡萄糖、糖原。糖主要指葡萄糖、糖原。糖的分类糖的分类按其水解产物可分为四类。按其水解产物可分为四类。按其水解产物可分为四类。按其水解产物可分为四类。第4页,讲稿共53张,创作于星期二(四四)结合糖结合糖(glycoconjugate)(一一)单糖单糖(monosacchride)(二二)寡糖寡糖(oligosacchride)(三三)多糖多糖(polysacchride)葡萄糖葡萄糖(glucose)果糖果糖(fructose)半乳糖半乳糖(galactose)核糖核糖(ribose)麦芽糖麦芽糖(maltose)乳乳 糖糖(lactose)蔗蔗 糖糖(sucrose
5、)淀淀 粉粉(starch)糖糖 原原(glycogen)纤维素纤维素(cellulose)糖脂糖脂(glycolipid)糖蛋白糖蛋白(glycoprotein)第5页,讲稿共53张,创作于星期二第一节第一节 概概 述述一、血糖及血糖浓度的调节一、血糖及血糖浓度的调节p血糖及血糖水平的概念血糖及血糖水平的概念:血糖(血糖(BG):指血液中的葡萄糖。):指血液中的葡萄糖。血糖水平:即血糖浓度。血糖水平:即血糖浓度。正常成人空腹血糖(正常成人空腹血糖(FPG)浓度)浓度 为为3.896.11mmol/L。第6页,讲稿共53张,创作于星期二消化吸收消化吸收分解分解糖异生糖异生食物糖类食物糖类肝糖原
6、肝糖原非糖物质非糖物质尿糖尿糖血糖血糖8.910mmol/L其他糖类衍生物其他糖类衍生物非糖物质非糖物质能量、能量、CO2、H2O糖原(肌肉、肝脏等)糖原(肌肉、肝脏等)胰髙糖血素胰髙糖血素促进糖原分解和糖促进糖原分解和糖异生作用异生作用胰岛素促进细胞对葡萄糖胰岛素促进细胞对葡萄糖的摄取和糖原合成、抑制的摄取和糖原合成、抑制糖异生糖异生第7页,讲稿共53张,创作于星期二血糖浓度的调节血糖浓度的调节第8页,讲稿共53张,创作于星期二二、高糖血症与糖尿病二、高糖血症与糖尿病第9页,讲稿共53张,创作于星期二糖尿病(糖尿病(diabetes mellitus,DMdiabetes mellitus,
7、DM)定义:定义:是一种慢性、复杂的代谢紊乱性疾病,是由胰岛素相是一种慢性、复杂的代谢紊乱性疾病,是由胰岛素相对或绝对不足,或利用缺陷引起。对或绝对不足,或利用缺陷引起。临床特征:临床特征:血糖持续升高,甚至出现糖尿。长期患有血糖持续升高,甚至出现糖尿。长期患有糖尿病常伴有脂类、蛋白质代谢紊乱、水、电解质紊乱糖尿病常伴有脂类、蛋白质代谢紊乱、水、电解质紊乱及酸碱平衡紊乱,甚至出现一系列并发症如眼、肾的微及酸碱平衡紊乱,甚至出现一系列并发症如眼、肾的微血管病变及神经病变,重者可致死亡。血管病变及神经病变,重者可致死亡。发病机制发病机制1 1、胰腺、胰腺细胞的自身免疫性损伤细胞的自身免疫性损伤2
8、2、机体对胰岛素的作用产生抵抗、机体对胰岛素的作用产生抵抗临床表现临床表现“三多一少三多一少”多饮、多食、多尿、体重减轻多饮、多食、多尿、体重减轻。第10页,讲稿共53张,创作于星期二多吃多吃多喝多喝多尿多尿体体重重减减轻轻第11页,讲稿共53张,创作于星期二第12页,讲稿共53张,创作于星期二(一)糖尿病分型及特点(一)糖尿病分型及特点第13页,讲稿共53张,创作于星期二第14页,讲稿共53张,创作于星期二(二)糖尿病的诊断标准(二)糖尿病的诊断标准(P119)P119)标准四:糖化血红蛋白标准四:糖化血红蛋白6.5%6.5%第15页,讲稿共53张,创作于星期二三、其他糖代谢紊乱三、其他糖代
9、谢紊乱(一)低血糖症(一)低血糖症 1 1 1 1、概念:、概念:、概念:、概念:n n低血糖症低血糖症低血糖症低血糖症 是指血糖浓度低于参考值下限时临床出现一系列是指血糖浓度低于参考值下限时临床出现一系列因血糖浓度过低引起的症候群。因血糖浓度过低引起的症候群。n发病原因:来源发病原因:来源 去路去路激素效应:升血糖激素缺乏,降血糖激素过剩。激素效应:升血糖激素缺乏,降血糖激素过剩。肝病变:肝功严重损伤致肝糖原减少和糖异生严重障碍。肝病变:肝功严重损伤致肝糖原减少和糖异生严重障碍。长期饥饿或剧烈运动时代谢率增加,血糖消耗过多。长期饥饿或剧烈运动时代谢率增加,血糖消耗过多。第16页,讲稿共53张
10、,创作于星期二n分类:分类:低血糖症低血糖症空腹性低空腹性低血糖血糖刺激性低刺激性低血糖血糖反应性低血糖症反应性低血糖症外源性低血糖症外源性低血糖症酒精性低血糖症酒精性低血糖症半乳糖性低血糖症半乳糖性低血糖症餐后性低血糖症餐后性低血糖症WHOWHO规定的低血糖症诊断标准是:规定的低血糖症诊断标准是:1 1、具有低血糖的症状;、具有低血糖的症状;2 2、发作时血糖、发作时血糖2.8mmol2.8mmolL(50mgL(50mgd1)d1);3 3、服糖、服糖(即碳水化合物即碳水化合物)后可使症状迅速缓解。后可使症状迅速缓解。第17页,讲稿共53张,创作于星期二(三)低血糖症(三)低血糖症n空腹血
11、糖空腹血糖2.78mmol/L(50mg/dl)n临临床表床表现现:战战栗、多汗、栗、多汗、恶恶心、心跳加速、心、心跳加速、轻轻度度头头昏昏头头痛、痛、饥饿饥饿、上腹不适。、上腹不适。n当血糖当血糖1.11mmol/L或或1.67mmol/L(20mg/dl或或30mg/dl)时时,引起,引起严严重的神重的神经经系系统统功能障碍。功能障碍。第18页,讲稿共53张,创作于星期二(二)先天性糖代谢障碍(二)先天性糖代谢障碍 糖代谢的先天性障碍是由于糖代谢相关酶类先天性异常或缺陷,导糖代谢的先天性障碍是由于糖代谢相关酶类先天性异常或缺陷,导致某些单糖或糖原在体内贮存。多数为常染色体隐性遗传,患者症状
12、致某些单糖或糖原在体内贮存。多数为常染色体隐性遗传,患者症状轻重不等,可伴有血糖水平降低。轻重不等,可伴有血糖水平降低。半乳糖代谢紊乱半乳糖代谢紊乱 果糖代谢紊乱果糖代谢紊乱戊糖代谢紊乱戊糖代谢紊乱 糖原贮积症糖原贮积症第19页,讲稿共53张,创作于星期二第二节第二节 糖代谢紊乱的检验糖代谢紊乱的检验n空腹血糖空腹血糖n餐后餐后2小时血糖小时血糖n葡萄糖耐量试验葡萄糖耐量试验n糖化血红蛋白糖化血红蛋白n糖化血清蛋白与糖化白糖化血清蛋白与糖化白蛋白蛋白n胰岛素及胰岛素及C肽肽n胰岛素原胰岛素原n酮体酮体n丙酮酸及乳酸丙酮酸及乳酸n尿微量白蛋白尿微量白蛋白第20页,讲稿共53张,创作于星期二一、体
13、液葡萄糖一、体液葡萄糖空腹血糖(空腹血糖(FPGFPG):):是在隔夜空腹(至少是在隔夜空腹(至少8-10h8-10h未进任未进任何食物)后,早餐前采血所测定的葡萄糖浓度,为何食物)后,早餐前采血所测定的葡萄糖浓度,为糖尿病最常检测的指标,反映胰岛糖尿病最常检测的指标,反映胰岛B B细胞功能,代表细胞功能,代表基础胰岛素的分泌功能。基础胰岛素的分泌功能。随机血糖(随机血糖(RBSRBS):):指任意时间抽取血液作为标本所指任意时间抽取血液作为标本所测定的葡萄糖浓度。测定的葡萄糖浓度。第21页,讲稿共53张,创作于星期二一、体液葡萄糖一、体液葡萄糖无机化学法无机化学法 特异性差,淘汰。特异性差,
14、淘汰。有机化学法有机化学法 干扰因素多,试剂有毒副作用,少用。干扰因素多,试剂有毒副作用,少用。酶法酶法 常用方法常用方法(一)标本的采集与处理(一)标本的采集与处理空腹静脉采血。血清和血浆。抗凝剂最好选择空腹静脉采血。血清和血浆。抗凝剂最好选择草酸钾草酸钾-氟氟化钠抗凝剂。化钠抗凝剂。(二)测定方法(二)测定方法第22页,讲稿共53张,创作于星期二(一)无机化学法:(一)无机化学法:Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性法,基于葡萄糖醛基的还原性(二)有机化学法:邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等(二)有机化学法:邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等Cu2+OH-Cu+Glu磷钼酸磷钼酸显
15、色显色邻甲苯胺邻甲苯胺 +Glu 葡萄糖基胺葡萄糖基胺 希夫氏碱希夫氏碱 蓝绿色化合物蓝绿色化合物缩合缩合脱水脱水分子重排分子重排特异性差特异性差干扰因素多干扰因素多(三)酶法(三)酶法(1 1)己糖激酶法()己糖激酶法(HKHK法)法)(2 2)葡萄糖氧化酶法()葡萄糖氧化酶法(GODGOD法)法)(3 3)葡萄糖脱氢酶法)葡萄糖脱氢酶法 (GDHGDH法)法)第23页,讲稿共53张,创作于星期二 葡萄糖葡萄糖ATP葡萄糖葡萄糖-磷酸磷酸ADP 葡萄糖葡萄糖-6-磷酸磷酸NADP G-6-PD -磷酸葡萄糖内酯磷酸葡萄糖内酯+NADPH NADPH在在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中
16、的葡萄糖浓度成正比有吸收峰,其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比。本法本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化,适用于自动化分析,特别适用急诊应用,为葡萄糖测定的分析,特别适用急诊应用,为葡萄糖测定的参考方法参考方法,但是试剂较贵。,但是试剂较贵。、己糖激酶法(法)、己糖激酶法(法)n原理原理n评价评价第24页,讲稿共53张,创作于星期二2、葡萄糖氧化酶法、葡萄糖氧化酶法(GOD)n原理原理葡萄糖葡萄糖O O2 2+H+H2 2O O GODGOD 葡萄糖酸内酯葡萄糖酸内酯2 2O O2 22 22 2O O2 2+4-+4-氨基安替比林氨基安替比林+酚
17、酚 PODPOD 红色醌类化合物红色醌类化合物 +2 2O+OO+O2 2红色醌类化合物在红色醌类化合物在505nm505nm有吸收峰,其吸光度增加在一定范围内与标本中的葡有吸收峰,其吸光度增加在一定范围内与标本中的葡萄糖浓度成正比萄糖浓度成正比n评价评价1.1.操作简单,操作简单,特异性较高特异性较高,是血糖测定的,是血糖测定的首选首选方法方法2.2.GOD-PODGOD-POD法线性范围可达成法线性范围可达成19mmol/L 19mmol/L,回收率,回收率94%94%105%,105%,变异总数为变异总数为0.7%0.7%2.0%2.0%,准确度和精密度都能达到临床要求,操作简便,可用于
18、自动生化仪。是我国临检中,准确度和精密度都能达到临床要求,操作简便,可用于自动生化仪。是我国临检中心目前新推荐的心目前新推荐的常规方法常规方法第25页,讲稿共53张,创作于星期二 葡萄糖葡萄糖NAD D-葡萄糖酸内酯葡萄糖酸内酯+NADHNADH生成量在一范围内与标本中葡萄糖浓度成正比关系。生成量在一范围内与标本中葡萄糖浓度成正比关系。在在340 nm处增高的光密度可以对该酶(处增高的光密度可以对该酶(GDH)活性或其底物(葡萄)活性或其底物(葡萄糖)进行定量分析。用糖)进行定量分析。用GDH法测定葡萄糖,不仅特异性高,且只需法测定葡萄糖,不仅特异性高,且只需GDH一种酶参与,一步完成,因而被
19、人们广泛接受和应用。一种酶参与,一步完成,因而被人们广泛接受和应用。但是胆红素和血红蛋白含量高时可影响测定结果。脂血标本需做对照管。但是胆红素和血红蛋白含量高时可影响测定结果。脂血标本需做对照管。3.3.葡萄糖脱氢酶法(葡萄糖脱氢酶法(GDHGDH)GDHn原理原理n评价评价第26页,讲稿共53张,创作于星期二空腹血糖:空腹血糖:3.93.96.1mmol/L6.1mmol/L随机血糖:随机血糖:7.8mmol/L7.8mmol/L)肾糖阈:肾糖阈:8.88mmol/L8.88mmol/L,血糖高于此值出现糖尿。,血糖高于此值出现糖尿。临床意义:临床意义:1.1.血糖升高:血糖升高:主要见于糖
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