2022《龙门亮剑》高三生物一轮复习-专题5-DNA和蛋白质技术练习-新人教版选修1.doc

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1、1. 在“DNA的粗提取与鉴定实验中，将提取获得的DNA黏稠物(还含有许多杂质)分别处理如下：第一，放入0.14 mol/L的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得滤液A和黏稠物a。第二，放入2 mol/L的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得滤液B和黏稠物b。第三，放入冷却的95%的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤液C和黏稠物c。以上过程获得的滤液和黏稠物中，因含DNA少而可以丢弃的是_。【解析】在不同浓度的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同。在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度最小，DNA析出，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物a中；在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度最大，所以DNA溶解，

2、过滤后存在于滤液B中；酒精可使DNA分子凝集，因此，在冷却的95%的酒精溶液中DNA凝集，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物c中。【答案】AbC2(2021年镇江质检)用凝胶色谱法别离蛋白质时，分子量大的蛋白质()A路程较长，移动速度较慢B路程较长，移动速度较快C路程较短，移动速度较慢 D路程较短，移动速度较快【解析】在小球体内部有许多贯穿的通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。【答案】D3以下操作过程的表达中错误的选项是()AP

3、CR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌BPCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在20 储存CPCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化D在微量离心管中添加反响成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换【答案】C4在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是(多项选择)()A防止血红蛋白被氧气氧化B血红蛋白是一种碱性物质，需要酸中和C防止色谱柱内产生气泡，影响洗脱效果D让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能【解析】在血红蛋白的提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是防止色谱柱内产生气泡，影响洗脱效果，同时为了让血红蛋白保持在

4、体内所处的环境，以维持其结构和功能。【答案】CD5(2021年海南模拟)PCR利用了DNA热变性的原理，PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。对PCR过程中“温度的控制的以下说法错误的选项是()A酶促反响需要高的温度，是为了确保模板是单链B延伸的温度必须大于复性温度，而小于变性温度CDNA聚合酶不能热变性，要用耐高温的聚合酶DDNA解旋酶不能热变性，为了确保模板是单链【解析】PCR是一种体外DNA扩增技术。DNA双链的解开不需要解旋酶，靠高温使其变性，双螺旋结构解体，双链分开；复性前，在耐高温的DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原那么合成新的DNA，因此延伸的温度要大于复性温度，小于变

5、性温度。【答案】D6(2021年南京质检)以下有关蛋白质提取和别离的说法，错误的选项是()A透析法别离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物别离开来C离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质别离D蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动【解析】带电离子或分子在电场中向着与其所带电荷相反的电极移动。【答案】D7(2021年苏州模拟)以下关于血红蛋白提取和别离的过程及原理表达正确的选项是()A红细胞洗涤过程中要参加5倍体积的蒸馏水，重复洗涤3次B将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的NaCl溶液中透析12小时C凝胶装填在色谱柱

6、内要均匀，不能有气泡存在D蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢【解析】 红细胞洗涤过程中要参加5倍体积的生理盐水，重复洗涤3次目的是除去杂蛋白。透析时使用物质的量浓度为20 mol/L的磷酸缓冲液，而不是用0.9%的NaCl溶液。蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的在凝胶外部移动，移动速度快。在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低别离效果。【答案】C8如以下列图所示是关于“DNA的粗提取与鉴定的实验：(1)实验前由教师制备鸡血细胞液供学生作实验材料，而不是选用鸡全血，其原因是：_。(2)生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，假设他们按实验要求完

7、成实验步骤后，结果是_，这是因为这些动物和人类一样_。但假设改用动物肝脏作实验材料，实验能顺利进行，这是因为_。(3)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是_；图B所示实验步骤中加蒸馏水的目的是_。(4)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可滴加_试剂，沸水浴加热，结果丝状物被染成蓝色。【答案】(1)DNA主要存在于细胞核中，而血浆中不含(2)很难提取到DNA成熟红细胞中无细胞核肝细胞中有细胞核(3)使鸡血细胞吸水涨破稀释NaCl溶液，促进丝状物析出(4)二苯胺9PCR(多聚酶链式反响)技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，以下列图表示合成过程，请据图分析答复：(1)A过

8、程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理表达正确的选项是()A该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键B该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键C该过程不需要解旋酶的作用D该过程与人体细胞的过程完全相同(2)C过程要用到的酶是_。这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以_参加，_(需要/不需要)再添加。PCR反响除提供酶外，还需要满足的根本条件有_。(3)如果把模板DNA的两条链用N15标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“95 55 72 温度循环3次，那么在形成 的子代DNA中含有N15标记的DNA占_。(4)如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，那么该DNA复制10次，需要参加胸腺嘧

9、啶脱氧核苷酸_个。(5)PCR中由碱基错配引起的变异属于_。假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，那么扩增假设干次后检测所用DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占_。【解析】(1)高温所起的作用类似于解旋酶，使双链DNA变为单链。(2)C过程为PCR技术的延伸阶段，当系统温度上升至72左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在NDA聚合酶的作用下合成新的DNA链。DNA聚合酶是耐热的，高温下不变性，所以一次性参加即可。(3)PCR技术遵循半保存复制的特点。经过三次循环，共产生23个DNA分子，其中有2个DNA分子含有15N标记。(4)在一个双链DNA分子中，CT占碱基总数

10、的一半，故T的数目为am，复制10次，相当于新增加了2101个DNA分子。故需补充T的数目为(2101)(am)。(5)基因中的碱基对改变属于基因突变。对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，以后按正常配对方式进行扩增，错配链做模板扩增的都是错误的DNA分子，原正常链扩增得到的DNA分子都是正常DNA分子，故假设干次后检测所用DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占1/2。【答案】(1)C(2)DNA聚合酶一次不需要DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，通过控制温度使DNA复制在体外反复进行(3)25%(4)(2101)(am)(5)基因突变5

11、0%10(2021年海南模拟)红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和别离血红蛋白。请答复以下有关问题：(1)血红蛋白提取和别离的程序可分为四步：_、_、_和_。(2)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先参加柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。参加柠檬酸钠的目的是_。在样品处理中包括红细胞的洗涤、_、别离血红蛋白溶液、透析。洗涤红细胞的目的是_，你如何知道红细胞已洗涤干净？_别离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是_。假设离心速度过高和时间过长结果会怎样？

12、_。(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗别离。透析的目的是_。透析的原理是_。(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是_。血红蛋白有什么特点？_。这一特点对进行蛋白质的别离有什么意义？_。【解析】 别离提取血红蛋白的实验流程大致是样品处理粗别离纯化纯度鉴定四个步骤。柠檬酸钠属于抗凝剂。血红蛋白是红色含铁的蛋白质。凝胶色谱法别离蛋白质是依据蛋白质的相对分子质量大小来进行的。【答案】 (1)样品处理粗别离纯化纯度鉴定(2)防止血液凝固血红蛋白的释放去除杂蛋白离心后的上清液没有黄色低速短时间离心，如500 r/min离心2 min离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯洁的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度(3)去除相对分子量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出，而大分子那么保存在袋内(4)通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂蛋白除去血红蛋白呈现红色在凝胶色谱别离时可通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的别离过程非常直观，大大简化了实验操作