荧光PCR检测原理精选PPT.ppt

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2、团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收

3、，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为化为其他波长的发射光或热能，称之为化为其他波长的发射光或热能，称之为化为其他波长的发射光或热能，称之为化为其他波长的发射光或热能，称之为化为其他波长的发射光或热能，称之为FRETFRETFRET。第4页，讲稿共17张，创作于星期三荧光荧光荧光荧光信号信号信号信号 荧光染料荧光染料荧光染料荧光染料SYBR greenSYBR greenSYBR greenSYBR green特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号 特异性荧光探针特异性荧光探针特异性荧光探针特异性荧光探针TaqmanT

4、aqmanTaqmanTaqman双荧光标记探针双荧光标记探针双荧光标记探针双荧光标记探针molecular Beaconmolecular Beaconmolecular Beaconmolecular Beacon荧光标记探针荧光标记探针荧光标记探针荧光标记探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针第5页，讲稿共17张，创作于星期三TaqmanTaqman特异性荧光双特异性荧光双标记探针标记探针Taqman 5353外外切酶活性切酶活性第6页，讲稿共17张，创作于星期三MolecularMolecular beaconbeacon第7页，讲稿共17张，创作

5、于星期三荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针第8页，讲稿共17张，创作于星期三二、典型的荧光二、典型的荧光二、典型的荧光二、典型的荧光PCRPCRPCRPCR扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线 阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线第9页，讲稿共17张，创作于星期三Bio-rad iCyclerBio-rad iCyclerBio-rad iCyclerBio-rad iCycler扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第10页，讲稿共17张，创作于星期三PE-5700PE-5

6、700PE-5700PE-5700扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第11页，讲稿共17张，创作于星期三PE-7700PE-7700PE-7700PE-7700扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第12页，讲稿共17张，创作于星期三Roche LightCyclerRoche LightCyclerRoche LightCyclerRoche LightCycler扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第13页，讲稿共17张，创作于星期三三、三、三、三、CtCtCtCt值值值值样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数Ct值值第14页，讲稿共17张，创作于星期三四、荧光四、荧光四、荧光四、荧光PCRPCR定量的原理定量的原理定量的原理定量的原理 第15页，讲稿共17张，创作于星期三Unknown未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定 第16页，讲稿共17张，创作于星期三感感谢谢大大家家观观看看第17页，讲稿共17张，创作于星期三