动物细胞培养与核移植技术(6).ppt
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1、关于动物细胞培养和核移植技术(6)第一张,PPT共二十六页,创作于2022年6月动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞工程常用的技术手段:1 1 动物细胞培养技术动物细胞培养技术 2 2 动物细胞核移植技术动物细胞核移植技术3 3 动物细胞融合技术动物细胞融合技术 4 4 生产单克隆抗体技术生产单克隆抗体技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。植物细胞工程常用的技术手段植物细胞工程常用的技术手段:1 植物组织培养技术植物组织培养技术2 植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术第二张,PPT共二十六页,创作于2022年6月20012001年年11
2、11月月3 3日下午日下午6 6点零点零5 5分,分,在莱阳农学院动物胚胎工程中在莱阳农学院动物胚胎工程中心实验场,一头名叫心实验场,一头名叫“桂花桂花”的黑白花奶牛,只用了的黑白花奶牛,只用了1515分钟,分钟,就顺利产出一头全身黑色的雌就顺利产出一头全身黑色的雌性肉牛,专家们给它起了一个性肉牛,专家们给它起了一个吉祥的名字吉祥的名字“康康康康”。经过现。经过现场公证,这是到目前为止我国场公证,这是到目前为止我国唯一健康存活的体细胞克隆牛,唯一健康存活的体细胞克隆牛,它体重它体重3030公斤,体长公斤,体长6464厘米,厘米,心跳、呼吸都很正常。出生后心跳、呼吸都很正常。出生后5555分钟,
3、康康经过几番努力,分钟,康康经过几番努力,终于稳稳地站了起来,赢得了终于稳稳地站了起来,赢得了现场专家们的热烈掌声。现场专家们的热烈掌声。第三张,PPT共二十六页,创作于2022年6月“康康康康”和和“双双双双”的合影的合影第四张,PPT共二十六页,创作于2022年6月“康康康康”有三个有三个母亲,它更象母亲,它更象哪一个呢?哪一个呢?第五张,PPT共二十六页,创作于2022年6月第六张,PPT共二十六页,创作于2022年6月高产肉牛(供体)高产肉牛(供体)采集卵母细胞(屠宰场)采集卵母细胞(屠宰场)卵母细胞去核卵母细胞去核去核卵母细胞去核卵母细胞胚胎皮肤细胞胚胎皮肤细胞供体细胞培养供体细胞培
4、养重组细胞重组细胞细胞融合细胞融合重组胚胎重组胚胎诱导分裂和发育诱导分裂和发育代孕母牛代孕母牛胚胎移植胚胎移植 康康康康(克隆高产肉牛)(克隆高产肉牛)体外培养减二中期卵母细胞体外培养减二中期卵母细胞第七张,PPT共二十六页,创作于2022年6月1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的重要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前,必须将
5、受体细胞的遗传细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。物质去掉或将其破坏。第八张,PPT共二十六页,创作于2022年6月 培养的动物细胞一般当传代至培养的动物细胞一般当传代至1050代代左右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细左右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而胞遗传物质可能会发生突变,而10代以内的代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此,在细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此,在体细胞核移植中,为了保证供体细胞正常的遗体细胞核移植中,为了保证供体细胞正常的遗传基础,通常采用传代传基础,通常采用传代10代以内的细胞。代以内的细胞。2
6、.用于核移植的供体细胞一般都选用传代用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代代以内的细胞,想一想,这是为什么?以内的细胞,想一想,这是为什么?第九张,PPT共二十六页,创作于2022年6月3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?的复制吗?为什么?绝大部分绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还有少量的来自于供体细胞核,但其核外还有少量的DNA,即线粒体中的,即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。是来自于受体卵母细胞。此外,即便动物的遗传基础完全相同,但动物的一些行为
7、、习此外,即便动物的遗传基础完全相同,但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系,核供体动物生活的环境与克性的形成与所处环境有很大关系,核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同,其形成的行为、习性也不隆动物所生活的环境不会完全相同,其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同,从这一角度看,克隆动物不会是可能和核供体动物完全相同,从这一角度看,克隆动物不会是核供体动物核供体动物100%的复制。的复制。第十张,PPT共二十六页,创作于2022年6月 将动物的一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核的将动物的一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成为一个新的
8、胚胎,这个卵母细胞中,使其重组并发育成为一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体(克隆动物)新的胚胎最终发育为动物个体(克隆动物)胚胎细胞核移植:胚胎细胞核移植:体细胞核移植:体细胞核移植:细胞分化程度低,恢复全能性容易细胞分化程度低,恢复全能性容易 细胞分化程度高,恢复全能性不容易细胞分化程度高,恢复全能性不容易 动物细胞核移植概念:动物细胞核移植概念:第十一张,PPT共二十六页,创作于2022年6月为什么要进行动物细胞培养?动物细胞培养的概念动物细胞培养的概念 从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞个细
9、胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。生长和增殖。第十二张,PPT共二十六页,创作于2022年6月动物细胞培动物细胞培养过程:养过程:原代培养原代培养传代培养传代培养第十三张,PPT共二十六页,创作于2022年6月动物细胞培养过程动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液细胞悬液10代细胞代细胞50细胞细胞剪碎胰蛋白酶洗涤、稀释、分离原代培养贴壁生长接触抑制传代培养胰蛋白酶真的胰蛋白酶真的不会把细胞消不会把细胞消化掉吗?化掉吗?用胃蛋白酶可用胃蛋白酶可以吗?以吗?第十四张,PPT共二十六页,创作于2022年6月 分散细胞的目的:单个细胞容易摄取所需的营
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