天然产物提取方法与技术.ppt
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1、关于天然产物提取方法和技术第一张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月第一节第一节 天然产物开发利用方案确定天然产物开发利用方案确定大致可分为:大致可分为:选定研究对象、生物材料采集选定研究对象、生物材料采集和品种鉴定、文献资料调研、化学成分预试和品种鉴定、文献资料调研、化学成分预试验、活性提取部位和活性化合物跟踪分离和验、活性提取部位和活性化合物跟踪分离和结构鉴定、构效关系、药理、毒理、制剂工结构鉴定、构效关系、药理、毒理、制剂工艺、临床实验、中试、正式生产等步骤。艺、临床实验、中试、正式生产等步骤。根据研究目的的不同:根据研究目的的不同:第二张,PPT共一百五十四页,创作于2022年
2、6月一、研究对象的确定一、研究对象的确定根据古代医学典籍、民族医学实践提供的根据古代医学典籍、民族医学实践提供的资料或民间经验和临床观察;资料或民间经验和临床观察;根据当地植物样品随机选取;根据当地植物样品随机选取;根据天然产物成分信息确定;根据天然产物成分信息确定;根据已有的天然产物、医药学及相关科学根据已有的天然产物、医药学及相关科学研究成果的基础上,通过大量的文献检索研究成果的基础上,通过大量的文献检索根据市场商品要求确定研究对象。根据市场商品要求确定研究对象。第三张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月n传统中医药有其丰富的医药学和文化内涵。传统中医药有其丰富的医药学和文化内涵。
3、n根据古今记载的临床有效处方,收集整理临根据古今记载的临床有效处方,收集整理临床治病的单秘验方的单味药或复方药进行研床治病的单秘验方的单味药或复方药进行研究,筛选活性天然产物。究,筛选活性天然产物。第四张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月如:冬凌草如:冬凌草冬凌草冬凌草(Rabdosia rubescens(Hemls.)Hara)为为唇形科香茶菜属药用植物广布于我国黄河长唇形科香茶菜属药用植物广布于我国黄河长江流域,河南济源江流域,河南济源民间用于治疗食管癌,贲民间用于治疗食管癌,贲门癌门癌的民间药物;研究发现它的有效化学成的民间药物;研究发现它的有效化学成分是一个二萜类化合物,分
4、是一个二萜类化合物,冬凌草素。冬凌草素。活性跟踪纯化活性跟踪纯化第五张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月当归芦荟丸:当归芦荟丸:临床具有泻肝作用;临床具有泻肝作用;中国医学科学院用其治疗白血病,也有好效果。中国医学科学院用其治疗白血病,也有好效果。处方中:除去麝香后,疗效仍有;处方中:除去麝香后,疗效仍有;但除去青黛和芦荟后,则无一例有效;但除去青黛和芦荟后,则无一例有效;再进行小鼠筛选:再进行小鼠筛选:发现青黛是抗白血病的活性植物。发现青黛是抗白血病的活性植物。继续研究:继续研究:发现青黛的有效成分为靛玉红,发现青黛的有效成分为靛玉红,研制出研制出抗慢性粒细胞白血病的有效新药。抗慢
5、性粒细胞白血病的有效新药。第六张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月生物亲缘关系确定研究对象生物亲缘关系确定研究对象 如:苦木苦味素类成分的研究如:苦木苦味素类成分的研究n从苦木科鸦胆子属抗痢鸦胆子从苦木科鸦胆子属抗痢鸦胆子(B.antidysenterica Mill)植植物中得到有显著抗肿瘤活性的化合物鸦胆丁;物中得到有显著抗肿瘤活性的化合物鸦胆丁;n后从苦木科后从苦木科16属属35种植物中也得到了约种植物中也得到了约140个苦木苦味素个苦木苦味素类成分,其中类成分,其中30个有不同程度的抗肿瘤活性。个有不同程度的抗肿瘤活性。鸦胆子鸦胆子第七张,PPT共一百五十四页,创作于2022
6、年6月与天然产物提取分离有关的期刊杂志主要有:与天然产物提取分离有关的期刊杂志主要有:nNatural Product Report,1984年开始出版年开始出版(英国皇家化学会),刊登天然产物研究方面(英国皇家化学会),刊登天然产物研究方面的热点研究领域综述性文章。的热点研究领域综述性文章。nJournal of Natural Product,美国化学会与美美国化学会与美国生药学会合办,刊登药用活性天然产物研究国生药学会合办,刊登药用活性天然产物研究的原始研究论文。的原始研究论文。二、查阅文献资料和收集信息二、查阅文献资料和收集信息第八张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月期刊杂志
7、主要有:期刊杂志主要有:nPhytochemistry,国际植物生物化学与天然有国际植物生物化学与天然有机化学的专业期刊,刊登天然产物、植物分子机化学的专业期刊,刊登天然产物、植物分子生物学等研究的原始论文。生物学等研究的原始论文。nJournal of Asian Natural Product Research,中国与日本合办,发表亚洲国家天然产物分离、中国与日本合办,发表亚洲国家天然产物分离、结构鉴定、合成、生物转化、生药学和药理评结构鉴定、合成、生物转化、生药学和药理评价方面的原始研究论文。价方面的原始研究论文。第九张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月化学文摘(化学文摘(C.
8、A.)收录收录1967年以后的内容,年以后的内容,可通过中国科技信息研究所可通过中国科技信息研究所(http:/www.C)实现检索实现检索 美国化学会网站美国化学会网站,(http:/www.chemistry.org)收录几十种主办的化学类刊物,收录几十种主办的化学类刊物,英国皇家化学会网站,英国皇家化学会网站,(http:/www.rsc.org)收录英国皇家化学会的刊物收录英国皇家化学会的刊物数据库主要有:数据库主要有:第十张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月n天然产物生产工艺资料;天然产物生产工艺资料;n生物资源、组织特性、地理分布;生物资源、组织特性、地理分布;n化学成分
9、和质量标准等资料;化学成分和质量标准等资料;n有效成分体内代谢变化的资料;有效成分体内代谢变化的资料;n有效成分的结构、性质和生物活性等方面的资有效成分的结构、性质和生物活性等方面的资料;料;n结构相似化学成分的各种研究资料等等。结构相似化学成分的各种研究资料等等。文献内容可包括:文献内容可包括:第十一张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月实验设计:实验设计:1.1.观察项目的可比性观察项目的可比性:n实验条件控制的要非常严格,否则实验结果实验条件控制的要非常严格,否则实验结果将不可靠。将不可靠。n同一个实验要重复多次,以观察它的精确度、同一个实验要重复多次,以观察它的精确度、重现性和
10、可靠性。重现性和可靠性。n若差别较大时,还需对数据进行统计学处理,若差别较大时,还需对数据进行统计学处理,以计算它们的实验误差和可信性。以计算它们的实验误差和可信性。三、实验设计和工艺流程的选择三、实验设计和工艺流程的选择第十二张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月实验设计:实验设计:2.2.选择测试指标:选择测试指标:在实验中所使用的分析方法测定速度快,在实验中所使用的分析方法测定速度快,结果要精确可靠;结果要精确可靠;三、实验设计和工艺流程的选择三、实验设计和工艺流程的选择第十三张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月3.3.不能直接搬用植物化学的提取方法作为工不能直接搬用植
11、物化学的提取方法作为工业生成的方法?业生成的方法?n植物化学提取的目的:新化合物、鉴定结构、植物化学提取的目的:新化合物、鉴定结构、发现新成分、不计算成本、收率、经济效益;发现新成分、不计算成本、收率、经济效益;n天然产物生产提取目的:要考虑收率、成本和天然产物生产提取目的:要考虑收率、成本和经济效益等;经济效益等;n在生产天然产物提取物时使用植物化学或中草在生产天然产物提取物时使用植物化学或中草药化学中的有效成分提取分离方法是不经济的,药化学中的有效成分提取分离方法是不经济的,在技术上也是不行的。在技术上也是不行的。n因此,因此,不能直接搬用植物化学的提取方法作为不能直接搬用植物化学的提取方
12、法作为工业生产的方法。工业生产的方法。第十四张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月仍必须大量参考有关的植物化学提取流程和仍必须大量参考有关的植物化学提取流程和被提取有效成分的结构及其物理化学性质。被提取有效成分的结构及其物理化学性质。必要时以这些资料作为科学依据,根据这些必要时以这些资料作为科学依据,根据这些资料做实验设计。资料做实验设计。做天然产物提取生产工艺的实验研究时,一做天然产物提取生产工艺的实验研究时,一定要从工业生产的要求和实验情况出发,定要从工业生产的要求和实验情况出发,*以经济的观点设计生产工艺:流程简单、经以经济的观点设计生产工艺:流程简单、经济可行,收率高、产品质量
13、高和成本低。济可行,收率高、产品质量高和成本低。第十五张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月1.1.分离纯化的早期:分离纯化的早期:n由于提取液中的成分复杂、目的物浓度较稀、由于提取液中的成分复杂、目的物浓度较稀、与目的物理化性质相似的杂质多,所以与目的物理化性质相似的杂质多,所以不宜不宜选择分辨能力较高的纯化方法;选择分辨能力较高的纯化方法;n宜采用萃取、沉淀、吸附等分辨能力低的方宜采用萃取、沉淀、吸附等分辨能力低的方法有利;法有利;n这些方法负荷能力大,分离量多兼有分离提这些方法负荷能力大,分离量多兼有分离提纯和浓缩作用,为进一步分离纯化创造良好纯和浓缩作用,为进一步分离纯化创造良
14、好的基础。的基础。工艺流程中注意事项:工艺流程中注意事项:第十六张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月1.1.分离纯化的早期:分离纯化的早期:n总的来说,早期分离方法的选择原则是从总的来说,早期分离方法的选择原则是从低分辨能力到高分辨能力,而且负荷量较低分辨能力到高分辨能力,而且负荷量较大者较为合适大者较为合适第十七张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月2.2.安排纯化顺序:安排纯化顺序:考虑到有利于减少工序、提高效率;考虑到有利于减少工序、提高效率;n如:在盐析后采取吸附法,必然会因离子如:在盐析后采取吸附法,必然会因离子过多而影响吸附效果,如增加透析除盐,过多而影响吸附效果
15、,如增加透析除盐,则使操作大大复杂化。则使操作大大复杂化。n如果倒过来进行,先吸附,后盐析就比较如果倒过来进行,先吸附,后盐析就比较合理。合理。第十八张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月3.3.分离操作的后期:分离操作的后期:n必须注意避免产品的损失,主要是器皿的吸必须注意避免产品的损失,主要是器皿的吸附,样品液体残留,空气氧化及无法了解的附,样品液体残留,空气氧化及无法了解的原因。原因。n为取得足够量的样品,常需要加大原材料的为取得足够量的样品,常需要加大原材料的用量,并在后期纯化工序中注意保持样品溶用量,并在后期纯化工序中注意保持样品溶液由较高的浓度,以防止制备物在稀溶液中液由较
16、高的浓度,以防止制备物在稀溶液中的变性,的变性,第十九张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月n一个制备物是否纯,常以一个制备物是否纯,常以“均一性均一性”表示表示n均一性是指所获得的制备物只具有一种完均一性是指所获得的制备物只具有一种完全相同的成分。全相同的成分。n均一性的评价需经过数种方法的验证才能均一性的评价需经过数种方法的验证才能肯定。肯定。n纯度的鉴定方法很多,常用的有:溶解度纯度的鉴定方法很多,常用的有:溶解度法、结晶法、熔点法、色谱法、质谱法等法、结晶法、熔点法、色谱法、质谱法等多种多种第二十张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月进入新实验研究阶段:进入新实验研究阶
17、段:即小型或放大生产实验阶段即小型或放大生产实验阶段这个阶段的主要任务这个阶段的主要任务:检查生产工艺流程:检查生产工艺流程的可行性和存在的问题,并为中间生产实的可行性和存在的问题,并为中间生产实验或正式工业生产提供科学依据。验或正式工业生产提供科学依据。二、实验设计和工艺流程的选择二、实验设计和工艺流程的选择第二十一张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月小实验:小实验:原料用量少,使用设备以玻璃仪原料用量少,使用设备以玻璃仪器为主,参加实验人少;器为主,参加实验人少;放大实验:放大实验:投料量大,设备多用小型工业投料量大,设备多用小型工业设备,参加实验人多;设备,参加实验人多;小实验
18、为放大实验小实验为放大实验提供数据和经验提供数据和经验,可,可节约节约放大实验所需要的放大实验所需要的时间、人力、物时间、人力、物力的投入力的投入。二、实验设计和工艺流程的选择二、实验设计和工艺流程的选择第二十二张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月进入中试前的考虑:进入中试前的考虑:1.1.产率达到一定的稳定程度,质量可靠;产率达到一定的稳定程度,质量可靠;2.2.工艺路线及操作步骤确定,建立和确定工艺路线及操作步骤确定,建立和确定产品、中间体及原料的分析方法;产品、中间体及原料的分析方法;3.3.确定和鉴定产品的生物材料的资源;确定和鉴定产品的生物材料的资源;四、天然产物提取中试设
19、计四、天然产物提取中试设计第二十三张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月进入中试前的考虑:进入中试前的考虑:3.3.确定和鉴定产品的生物材料的资源;确定和鉴定产品的生物材料的资源;4.4.物料的衡算,物料的衡算,“三废三废”的处理方法;的处理方法;5.5.中试规模及原料的规格和数量;中试规模及原料的规格和数量;6.6.安全生产措施和方法。安全生产措施和方法。四、天然产物提取中试设计四、天然产物提取中试设计第二十四张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月n天然产物提取中试放大工艺特点:中试天然产物提取中试放大工艺特点:中试放大是由小试转入工业化生产的过渡性放大是由小试转入工业化生产
20、的过渡性研究工作,对小试工艺能否成功地进入研究工作,对小试工艺能否成功地进入规模生产至关重要规模生产至关重要n研究工作主要围绕着如何提高收率、改研究工作主要围绕着如何提高收率、改进操作、提高质量、形成生产等方面进进操作、提高质量、形成生产等方面进行。行。n一个一个工艺研究项目的最终目的是能在生工艺研究项目的最终目的是能在生产上采用。产上采用。第二十五张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月1.1.原辅材料规格的过渡试验;原辅材料规格的过渡试验;n小试时:一般采用的原辅材料规格较高。小试时:一般采用的原辅材料规格较高。目的:目的:是为了排除原料中所含杂质的不良是为了排除原料中所含杂质的不良
21、影响,确保实验的准确性。影响,确保实验的准确性。n大规模生产时:应改为生产时容易获得的大规模生产时:应改为生产时容易获得的原辅材料进行过渡性实验。原辅材料进行过渡性实验。转入中试放大生产的过渡性试验:转入中试放大生产的过渡性试验:第二十六张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月2.2.设备选型与材料质量试验;设备选型与材料质量试验;n小试阶段:大部分实验时在小型玻璃仪器小试阶段:大部分实验时在小型玻璃仪器中进行;中进行;n中试阶段:要对设备材料的质量和设备的中试阶段:要对设备材料的质量和设备的选型进行实验,为工业化生产提供数据。选型进行实验,为工业化生产提供数据。转入中试放大生产的过渡性
22、试验:转入中试放大生产的过渡性试验:第二十七张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月3.3.反应条件限度实验;反应条件限度实验;目的目的:找到最适宜的工艺条件(如培养基找到最适宜的工艺条件(如培养基种类、反应温度、压力、种类、反应温度、压力、pHpH等),一般均等),一般均匀一个许可范围。匀一个许可范围。转入中试放大生产的过渡性试验:转入中试放大生产的过渡性试验:第二十八张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月4.4.原辅材料、中间体及产品质量分析方法研究原辅材料、中间体及产品质量分析方法研究 中间体和新产品均无现成分析方法,须研究中间体和新产品均无现成分析方法,须研究他们的鉴定方
23、法,制定简便易行、准确可靠的他们的鉴定方法,制定简便易行、准确可靠的检验方法。检验方法。转入中试放大生产的过渡性试验:转入中试放大生产的过渡性试验:第二十九张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月5.5.下游工艺研究下游工艺研究 上游工艺:以生物材料资源生产为核心的研究内容;上游工艺:以生物材料资源生产为核心的研究内容;下游工艺:以产品的后处理为研究内容的操作。下游工艺:以产品的后处理为研究内容的操作。必须研究尽量简化下游工艺操作,采用新工必须研究尽量简化下游工艺操作,采用新工艺、新技术和新设备,提高劳动生产率,降艺、新技术和新设备,提高劳动生产率,降低成本。低成本。转入中试放大生产的过
24、渡性试验:转入中试放大生产的过渡性试验:第三十张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月中试放大的方法:中试放大的方法:1.1.经验法:经验法:主要是凭借经验通过逐级放大主要是凭借经验通过逐级放大(小试装置中间装置中小试装置中间装置中型装置大型装置型装置大型装置)来摸索反应器的特征。它也是目前药物合成来摸索反应器的特征。它也是目前药物合成中采用的主要方法。中采用的主要方法。2.2.相似法:相似法:主要是应用相似原理进行放大。此法有一定局限性,只适主要是应用相似原理进行放大。此法有一定局限性,只适用于物理过程放大。而不适用于化学过程的放大。用于物理过程放大。而不适用于化学过程的放大。3.3.
25、数学模型法数学模型法:是应用计算机技术的放大,它是今后发展的方向。是应用计算机技术的放大,它是今后发展的方向。第三十一张,PPT共一百五十四页,创作于2022年6月中试放大的研究主要内容:中试放大的研究主要内容:1,工艺路线和单元反应操作方法的最终确定。特别当原来选定的路线和单元反应方法在中试放大阶段暴露出难以解决的重大问题时,应重新选择其他路线,再按新路线进行中试放大。2,设备材质和型号的选择。对于接触腐蚀性物料的设备材质的选择问题尤应注意。3,搅拌器型式和搅拌速度的考察。反应很多是非均相的,且反应热效应较大。在小试时由于物料体积小,搅拌效果好,传热传质问题不明显,但在中试放大时必须根据物料
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