OLYMPUS钠、钾、氯测定作业指导书.doc

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1、OLYMPUS 钠、钾、氯测定作业指导书1 1. . 实实验验原原理理1传统的血液样品的离子检测方法是用火焰光度学方法，样品被已知离子（通常为锂离子或铯离子）浓度的溶液稀释，雾化并通过火焰成为离子态。这些离子象不同频率的光子一样稀放能量，光的强度与样品中的离子浓度有关。新发现的钠离子选择性玻璃、和选择性吸收钾和氯的有机化合物使得探测器可以直接接触生物体液进行测量，这些感受器即所谓离子选择性电极。OLYMPUS 电解质分析仪使用离子选择性电极技术检测生物体液中的钠、钾、氯离子浓度。钠、钾电极采用对钠、钾离子敏感的膜电极；氯电极采用分子机制的PVC 膜，仅对氯离子敏感。电极电位可与内参比电极产生的

2、稳定电位比较而测得。离子选择性电极使得电位随样品的离子浓度的改变而改变，变化的电位与离子浓度呈对数关系，以能斯特方程表示：RT（C）EE0NF其中： E在样品溶液中的电极电位E在标准状态下的电极电位RT/nF一个与电极反应值有关的常量取自然对数r溶液中的离子活度c溶液中的离子浓度检测时利用了比较法。首先，加入样品，再加入稀释液，混匀后吸进装载电极的分析单元中，测量电位，然后加入标准液测量电位，测量电位，二者的差与样品中钠、钾、氯离子浓度和它们在标准液中的浓度之比存在对数关系，因已知电位与标准液中钠、钾、氯离子浓度的关系，计算机可据能斯特方程计算出样品中钠、钾、氯离子浓度。2 2. . 标标本本

3、采采集集2， 32.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素锂抗凝血浆或尿液。3 3. . 标标本本采采集集、处处理理与与贮贮存存：应尽量避免标本溶血或严重脂血。溶血标本，红细胞中的钾会释放到血清或血浆中，造成假性钾便高。因此血清、肝素锂抗凝血浆标本应及时离心分离血清或血浆并避免残留红细胞。严重脂血的标本，会造成假性低、钠钾血症，应通过超速离心消除脂血的影响。血清或血浆标本的稳定性：在225贮存，氯稳定7 天，钾 6 周，钠 2 周。 24 小时尿液标本不添加防腐剂，混浊尿应离心后吸取上清液，严禁酸化尿液。尿标本的稳定性：在225贮存，氯稳定7 天

4、6，钾在 28贮存稳定 2 个月，在 1525贮存稳定45 天4，钠在 225贮存稳定 45 天4。4 4. . 标标本本运运输输： 室温条件下运输5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染、溶血、严重脂血的不能做测定。6 6. . 实实验验材材料料 ：6.1 日本 OLYMPUS ISE 试剂与标准液货号货号试剂名称试剂名称规格规格成分成分浓度浓度（单位：（单位：mol/Lmol/L）试剂稳定试剂稳定性性66320ISE 缓冲液42000mlTriethanolamine防腐剂0.1适量2 个月66319ISE 中值标准液42000mlNaKCl防腐剂4.30.133.1适量1 个月

5、66318ISE 参比液41000ml氯化钾防腐剂1.0适量2 个月66317ISE 低值血清标准液4100mlNaKCl防腐剂1303.585适量90 天66316ISE 高值血清标准液4100mlNaKCl防腐剂1606120适量90 天66315ISE 低/高值尿标准液4100mlNaKCl防腐剂低（50）高（200）低（10）高（100）低（50）高（180）适量90 天66314ISE 内参比液225ml氯化钾氯化银防腐剂3.3饱和适量90 天66317ISE Na/K 选择性监测液225mlNa防腐剂150适量90 天6.1.1 试剂组成：见上表。6.1.2 试剂准备：试剂为即用式

6、。6.1.3 试剂稳定性与贮存货号为 66314 的试剂应保存于1525，若开启使用，在1525保存可稳定 90 天。其它试剂未开启前在225保存可稳定至失效期；一旦开启在225保存其有效期见上表。6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染或过失效期不能继续使用。6.1.5 注意事项：货号为66317、66316、66315、66314 和 66313 的试剂在每次使用后均应立即盖好盖子。ISE 内参比液在保存期间可有部分沉淀释出，这不会影响试剂性能，但在使用前应充分混匀试剂。试剂中含防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2 校准品：使用OLYMPU

7、S 公司提供的ISE 低/高值血清标准液或ISE 低/高值尿标准液对自动分析仪进行校准，每天开机前校准或在下列情况下校准：试剂批号更换、质控数值明显漂移或失控、更换电极、主要的预防性保养后或关键部件更换后。6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯AU640 ISE 分析仪8 8. . 操操作作步步骤骤 ：参见 AU640ISE 分析仪操作规程 .SOP 文件9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控警告

8、限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。1 11 1. . 计计算算方方法法： 使用 OLYMPUS 公司提供的ISE 低/高值血清标准液或ISE 低/高值尿标准液校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以 mmol/L 报告。1 12 2. . 参参考考值值范范围围（成成人人）见见下下表表：钠钾氯血清136-146mmol/L3.5-5.1mmol/L98-106mmol/L血浆136-146mmol/L3.4-4.5mmol/L98-106mmol/L尿液（ 24 小时）40-220mmol/天25-125mmol

9、/天110-250mmol/天参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。（由于分析方法局限性，应注意对高脂血症和高蛋白血症的病人标本检测结果的解释。）1 13 3. . 临临床床意意义义13.1 钾离子是细胞内液中的主要阳离子。钾离子测定可用于诊断电解质失衡，心律不齐，肌无力，肝脑病变和肾衰竭，并在糖尿病和静脉输液治疗中检测酮酸中毒。并发醛固酮过多症的高血压患者，超过90%的人 K+ 浓度很低。呕吐，腹泻，嗜酒和叶酸缺乏症都可引起K+ 浓度降低。快速输入K+ ，晚期肾衰，溶血性病变，外伤， Addison 氏综合症，代谢性酸中毒，急性饥饿

10、症，脱水和急救等均可引起 K+浓度升高。通常情况下， K+ 经肾小球过滤掉，但在K+浓度较低时， K+会保留下来。在饮食增加，高醛固酮症，肾小管性酸中毒和碱中毒发病时，尿液中 K+的含量上升。13.2 钠离子是细胞外液中的主要阳离子，人体内的钠平衡由肾脏维持。尿液排泄过多，腹泻， Addison 氏综合症，肾小管肾炎等都可引起钠浓度降低。严重脱水，某些类型的脑外伤，糖尿病昏迷和盐摄入过量可导致钠浓度升高。13.3 氯离子是细胞外液中的主要阴离子，它的生理重要性在于能保持人体正常的水代谢，渗透压和细胞外液中正常的离子平衡。在脱水，肾小管酸中毒（高氯代谢酸中毒），食盐摄入过多等情况下，氯的浓度会升

11、高。在水含量过多，慢性呼吸性酸中毒，失盐性肾炎，代谢性碱中毒和充血性心脏衰竭等情况下，氯的浓度会降低。1 14 4. . 操操作作性性能能14.1 线性范围钠钾氯血清50-200mmol/L1.0-10.0mmol/L50-200mmol/L血浆50-200mmol/L1.0-10.0mmol/L50-200mmol/L尿液10-400mmol/L2.0-200mmol/L15-400mmol/L14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法，AU1000 批内重复性小于 3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。N=80批 内 精 密

12、 度总 精 密 度血清：血清：平均值（mmol/L）SDCV%SDCV%钠1380.660.490.890.64钾4.80.030.650.040.76氯900.580.640.630.71N=80批 内 精 密 度总 精 密 度尿液：尿液：平均值（mmol/L）SDCV%SDCV%钠1660.730.441.290.78钾1000.480.481.301.29氯2451.060.432.220.9014.3 方法学比较：奥林巴斯AU640 ISE 分析仪（方法1）与其它商品化的ISE 分析仪（方法2） ，共同做同一批病人标本。相关系数及回归方程如下：钠钠方方法法 1=（钠方法 2）1.016

13、-2.428，r=0.981(N=239，病人结果数值分布： 118.0-157.0mmol/L)。钾钾方方法法 1 1=（钾方法 2）0.977+0.107，r=0.991(N=238，病人结果数值分布： 1.5-7.0mmol/L)。氯氯方方法法 1 1=（氯方法 2）1.024-2.302，r=0.977(N=233，病人结果数值分布： 80-125.0mmol/L)。14.4 灵敏度：本法线性下限为血清/血浆钠为 50mmol/L，钾为 1.0mmol/L，氯为 50mmol/L；尿钠为 10mmol/L，钾为 2.0mmol/L，氯为 15mmol/L。14.5 病人结果可报告范围：

14、血清/血浆钠为 50-200mmol/L，钾为 1.0-10.0mmol/L，氯为 50-200mmol/L；尿钠为 10-400mmol/L，钾为 2.0-200mmol/L，氯为 15-400mmol/L。1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法线性上限为血清/血浆钠为 200mmol/L，钾为10mmol/L，氯为 200mmol/L；尿钠为 400mmol/L，钾为 200mmol/L，氯为400mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用去离子水作1：1 稀释，重新测定，结果乘以2。1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理：当血清 /血浆：钠 160

15、mmol/L 或120mmol/L；钾6.20mmol/L 或2.80mmol/L，氯 125mmol/L 或75mmol/L 时，应在复查该标本检测结果后，及时报告临床医生，必要时可以再抽血复查。1 17 7. . 方方法法局局限限性性17.1 本法线性上限为血清/血浆钠为 200mmol/L，钾为 10mmol/L，氯为200mmol/L；尿钠为 400mmol/L，钾为 200mmol/L，氯为 400mmol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用去离子水作1：1 稀释，重新测定，结果乘以2。17.2 干扰物质：某些抗凝剂、防腐剂、药物、有机化合物会干扰测定，具体参考文献。1 18 8

16、. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障无法自行解决时，迅速联系仪器厂家进行维修。1 19 9. . 参参考考文文献献： OLYMPUS ISE 试剂说明书和操作手册1. Tietz NW,Pruden EL,Siggaard-Anderson O. Electrolytes. In Teitz NW, ed. Fundamentals of clinical chemistry. Philadelphia： WB Saunders Company, 1987：614-624.2.Tietz NW, ed. Clinical guide to laboratory tests, 3rd ed

17、. Philadelphia： WB Saunders company, 1995：124pp,502-504,562-564.3. Scolt MG, Heusel JW, LeGry VA, Siggaard-Anderson O. Electrolytes and bloog gases. In： Burtis CA,Ashwood ER,eds. Tietz textbook of clinical chemistry. Philadephia： WB Saunders Company, 1999;1061.4.Ehret W, Heil W, Scgmitt Y, Topfer G,

18、 et al. Use of anticoagulants in diagnostic laboratory investigation and stability of blood ,plasma and serum samples. WHO/DIL/LAB/99.1 Rev.2：26,39,41,48pp.5.NCCLS. Urinalysis and collection, transportation, and preservation of urine apecimens, approved guideline. NCCLS Document GP16-A2, 2nd ed. Pennsylvania： NCCLS, 2001.6.Young DS. Effects of preanalytical variables on clinical laboratory tests. 2nd ed. Washington. AACC Press, 1997.2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。