赤芍药典芍药苷含量测定.docx

《赤芍药典芍药苷含量测定.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《赤芍药典芍药苷含量测定.docx（5页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、赤芍药典芍药苷含量测定 摘要：目的：建立一种可测定妇乐颗粒中芍药苷的RPHPLC方法。方法：采纳Shimpack VPODS色谱柱；流淌相为乙腈水(20:80)；检测波长为230nm。结果：芍药苷在1.008-504.0gmL-1范围内呈良好的线性关系，(r=0.9998)，平均回收率(n=9)为101.7；RSD 2.32。结论：本法简便，牢靠，精确，可用于该制剂的质量限制。 关键词：芍药苷：妇乐颗粒；高效液相色谱法 中图分类号：11285.5文献标识码：A文章编号：16737717(2007)09196602 妇乐颗粒是由赤芍、牡丹皮、忍冬藤、延胡索、大血藤等中药组方制成的中药制剂，具有清

2、热凉血、活血化瘀、消肿止痛功效，用于急性盆腔炎、急性附件炎、急性子宫内膜炎等引起的带下、腹痛等症。收载于卫生部药品标准中药成方制剂第18册，原标准对主要药味赤芍和牡丹皮中的芍药苷没有含量测定限制。本文采纳高效液相色谱法测定妇乐颗粒中芍药苷，结果精确，操作便利，可用于该制剂的质量限制。经方法学探讨，证明本法可行。现报道如下。 1仪器与试药 日本岛津LC2010 A高效液相色谱仪，自动进样系统；Lesolution Version 1.11 SPI色谱数据工作站；日本岛津UV2450紫外分光光度计；KQ250B型超声波清洗器(功率：250W，频率：40kHz)。乙腈、甲醇为色谱纯；水为重蒸溜水；芍

3、药苷比照品由中国药品生物制品检定所供应，批号：11073600423(供含量测定用)。妇乐颗粒(市售，批号：20041106BG、200601021BG、20050621BG、20051108TM、20050614LZ)。 2色谱条件 色谱柱：Shimpack VPODS(250mm4.6mm，5m)为色谱柱；乙腈水(20:80)；检测波长为230hm；流速为1.0mL/min；柱温为40；峰面积外标法定量。 3方法与结果 31 供试品溶液的制备 311样品溶液的制备取本品适量，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理30min(功率：250W，

4、频率：40kHz)，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液用0.45m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 312阴性空白比照溶液的制备按其质量标准中的处方，制备缺味(赤芍、牡丹皮)中药的阴性空白样品比照液，照上述样品溶液的制备方法制成阴性空白比照溶液。 313比照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥24h的芍药苷比照品适量，甲醇溶解定容，制成每1mL含芍药苷约50g的比照品溶液。 32 系统适用性试验 取芍药苷比照品溶液、阴性空白比照溶液和样品溶液，按上述色谱条件下进样10L，得HPLC图谱。阴性空白比照溶液在芍药苷比照品出峰处域没有干扰峰出现，故样品中的其他组分对芍药苷

5、测定无干扰作用。理论塔板数按芍药苷峰计算不应低于4000，分别度大于1.5，对称因子在0.951.05之间。 33线性关系的考察 精密称取芍药苷比照品约10.08mg，置100mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为芍药苷比照品储备液。分别精密吸取比照品溶液0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、8.0、10、15、20、25、50L，注入高效液相色谱仪，按上述条件测定，记录峰面积，以峰面积(Y)为纵坐标、芍药苷进样浓度(X)为横坐标进行线性回来，得回来方程：Y=6.42421066.8328103，r=0.9998。结果表明芍药

6、苷的溶液在1.008504.00gmL-1之间呈良好的线性关系。 34精密度试验 取同一批供试品溶液(批号：20041106BG)，进样10L，重复进样5次，测得：芍药苷峰面积的RSD为0.11。再取芍药苷比照品溶液，重复进样5次，测得：芍药苷峰面积的RSD为0.06。 35重复性试验 取同一批号样品5份(批号：20041106BG)，按311项下样品溶液的制备方法制备供试液，平行测定得：芍药苷的含量为1.0932mgg-1，RSD为1.51(n=5)。说明方法重现性良好。 36稳定性试验 取同一批号样品溶液(批号：20041106BG，芍药苷含量为1.0932mgg-1)，在常温下放置12h

7、，每间隔2h测定1次，连续共测定6次，得：芍药苷峰面积RSD为0.46。表明样品溶液在12h内稳定性良好。 37 回收率试验 采纳加样回收试验方法，取已知芍药苷含量(批号：20041106BG，芍药苷含量为1.0932mgg-1)的样品粉末9份，每份约0.5g，精密称定，分别加入肯定量比照品(加入量分为3个浓度：低、中、高)，照311项下操作，分别按上述色谱条件测定。 38 样品含量测定 精密量取样品0.5g，按311项下方法制备供试样品溶液。另精密称取芍药苷比照品适量，同313项下制备比照品溶液，按上述色谱条件进样10L，记录芍药苷峰面积，按外标法计算含量。 4讨论 检测波长的选择：取上述芍

8、药苷比照品溶液，在紫外分光光度计上于波长200400nm处扫描，结果在230hm波特长有最大汲取。故以230nm为检测波长。 提取方法的选择：笔者曾用甲醇，分别超声提取10、20、30、45、60min后进样测定峰面积比较，结果超声处理30min以后芍药苷峰面积基本不变，故选用超声处理30min。 柱温的选择：柱温虽对组分的分别度影响较小，但对样品组分的保留时间(tR值)影响较大，经反复试验：柱温在40时既可加快分析速度，又可保持出峰时间的恒定，从而保证试验结果的重复性和精确性。 流淌相的确定：笔者比较了甲醇水(25:75)、乙腈0.2磷酸(20:80)、甲醇0.2磷酸(50:50)、乙腈水(20:80)等4种流淌相，结果以乙腈水(20:80)分别效果最好，故选用此为流淌相。 赤芍和牡丹皮具清热凉血、散瘀止痛、活血化瘀功效，是处方中清热凉血、消肿止痛的主要药味，赤芍和牡丹皮中主要成分为芍药苷，为此，选择芍药苷为含量测定指标，建立质量限制标准，结果精确，方法简便且重现性好。 从5批不同厂家批号样品测定芍药苷结果看出，芍药苷含量相差很大，故应尽快建立建全该中成药的质量标准，以使各厂生产品具有相同质量，相同功效，便于临床平安、有效运用。