总胆红素偏高要紧吗_超声波辅助提取猪胆红素技术条件的研究.docx
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1、总胆红素偏高要紧吗_超声波辅助提取猪胆红素技术条件的研究 摘要:目的探讨从猪胆汁中用超声波技术协助提取胆红素的方法。方法考察超声波功率、频率、处理时间及处理温度等因素对胆红素提取的影响,通过SAS8.2统计系统分析正交试验结果。结果优化后的工艺条件为:超声波功率320W,频率72kHz,处理温度30,处理时间20min时,胆红素提取率提高15。结论超声波处理能提高胆汁中胆红素提取率。 关键词:猪胆汁;猪胆红素;超声波;提取 中图分类号:R282.74文献标识码:A文章编号: 1672979X(2009)07002904 胆汁是肝脏的分泌物,贮存于胆囊中。胆红素(bilirubin,BR)是胆汁
2、的成分之一,是含侧吡咯环的直链化合物,属二烯胆素类1,分为游离胆红素和结合胆红素。游离胆红素相对分子质量为584.65,含量较少;胆红素在葡糖醛酸基移换酶催化下转化为结合胆红素(主要是胆红素双葡糖醛酸苷),相对分子质量为937,是胆红素的主要存在方式2,有促进红细胞新生、降低血压、抑制心脏跳动和呼吸等作用3。 从动物胆汁中提取胆红素的技术4主要有钙盐法,树脂法和快速法。钙盐法是传统方法,操作繁琐,收率低;树脂法提取纯度较高,但生产成本高,操作困难;快速法操作简洁,成本较低,是目前广泛应用的方法。超声波提取是目前国内外正在探讨开发的一种协助提取方法,超声波具有较强的空化作用使物质不断运动,超声波
3、次级效应如机械振动乳化、扩散、击碎、化学效应等能加速提取成分的扩散、释放并与溶剂充分混合而利于提取5。我们将超声波技术用于胆汁中胆红素的提取,探究提高胆红素提取率的新方法。 1材料与方法 1.1原料与试剂 胆红素比照品(中国药品生物制品检定所);猪胆(大庆金锣食品公司);二氯甲烷,无水乙醇,浓盐酸,对氨基苯磺酸,亚硝酸钠均为分析纯。 1.2仪器与设备 JBT/CYCL400/3P(D)可调式超声波药品处理机(济宁金百特电子公司);722型分光光度计(上海精密科学仪器公司);DKS24型电热恒温水浴锅(上海森信试验仪器公司)。 1.3胆红素的测定方法 1.3.1标准曲线的绘制精密称取胆红素比照品
4、10.0mg,用二氯甲烷溶于100mL棕色容量瓶中。取10.0mL于50mL棕色容量瓶中,用95乙醇稀释至刻度,每1mL溶液含0.02mg胆红素。精确吸取0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL于具塞试管中,分别加入95乙醇9.0,8.0,7.0,6.0,5.0,4.0mL,再各加重氮化试剂1.0mL,摇匀,静置室温暗处1h,在波长520nm处测吸光度,以吸光度A(Y)为纵坐标,所含胆红素浓度(X)为横坐标(mg/mL),绘制标准曲线6。 1.3.2胆汁中胆红素的测定将簇新胆汁置于试管中并水浴微热,取10.0mL置入100mL棕色容量瓶中,用氯仿、乙醇混合液(4JX-*4:JX*46)稀
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