医疗机构消毒监督与检测幻灯片.ppt
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1、医疗机构消毒监督与检测第1页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/202l医疗机构消毒是预防院内感染的重要措施之一,消毒效果的监测是评价其消毒设备运转是否正常、消毒药剂是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否达标的唯一手段,因而在医院消毒、灭菌工作中必不可少。l医疗机构消毒效果监测时需遵循以下原则:监测人员需经过专业培训,掌握一定的消毒知识,熟悉消毒设备和药剂性能,具备熟练的检验技能;选择合理的采样时间(消毒后、使用前);遵循严格的无菌操作。第2页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/203l检测方法和判定标准:l消毒技术规范2002年版。第3页,共57页,编辑于202
2、2年,星期五2022/9/204l一、压力蒸汽灭菌效果监测一、压力蒸汽灭菌效果监测l(1)化学监测法:l1)化学指示卡(管)监测方法:将既能指示蒸汽温度,又能指示温度持续时间的化学指示管(卡)放入大包和难以消毒部位的物品包中央,经一个灭菌周期后,取出指示管(卡),根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。l2)化学指示胶带监测法:将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外,经一个灭菌周期后,观察其颜色的改变,以指示是否经过灭菌处理l3)对预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌,每日进行一次B-D试验。l4)结果判定:检测时,所放置的指示管(卡)、胶带的性状或颜色均变至规定的条件,判为灭菌合格;若其中之一未
3、达到规定的条件,则灭菌过程不合格。l5)注意事项:监测所用化学指示物须经卫生部批准,并在有效期内使用。l(2)生物监测法(略)第4页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/205l二、紫外线消毒效果的监测二、紫外线消毒效果的监测l 紫外线灯管辐照度值的测定l(1)检测方法:l紫外线辐照计测定法:开启紫外线灯 5min 后,将测定波长为 253.7nm 的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离 1m 的中央处,待仪表稳定后,所示数据即为该紫外线灯管的辐照度值。第5页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/206l(2)结果判定:普通 30w 直管型紫外线灯,新灯辐照强度
4、90W/cm2为合格;使用中紫外线灯辐照强度70W/cm2 为合格;30W 高强度紫外线新灯的辐照强度180W/cm2 为合格。l(3)注意事项:测定时电压 220VV,温度 2025,相对湿度60,紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用;指示卡应获得卫生许可批件,并在有效期内使用。第6页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/207UV-2000紫外辐照度计第7页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/208l三、手和皮肤黏膜消毒效果监测三、手和皮肤黏膜消毒效果监测l采样时间:在消毒后立即采样。l采样方法:l(1)手的采样:被检人五指并拢,用浸有含相应中和剂的无菌洗
5、脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦 2 次(一只手涂擦面积约 30cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去操作者手接触部位,将棉拭子投入 10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。l(2)皮肤粘膜采样:用 5cm5cm 的标准灭菌规格板,放在被检皮肤处,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支,在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5 次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入 10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内,立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。第8页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/209第9页,共57页,编辑于2022年,
6、星期五2022/9/2010l 检测方法l细菌总数检测:将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打 80 次,用无菌吸管吸取 1.0ml 待检样品接种于灭菌平皿,每一样本接种2个平皿,内加入已溶化的 4548 的营养琼脂 15ml18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置 361温箱培养 48h,计数菌落数。l采样结果计算方法:l 细菌总数(cfu/cm2)(平板上菌落数 稀释 倍数)/采样面积(cm2)l致病菌检测:参考消毒技术规范3.17.15。l 第10页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2011第11页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2012l四、物品和环境表
7、面消毒效果的监四、物品和环境表面消毒效果的监测测l采样时间:在消毒处理后进行采样。l采样方法:用 5cm5cm 的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,采样面积100cm2,连续采样 4 个,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支,在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5 次,并随之转棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入 10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。l门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。第12页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2013第13页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2014l检测方法l细菌总数检测:检测方法按手和皮肤黏膜消
8、毒效果监测执行。小型物体表面的结果计算,用 cfu/件表示。l致病菌的检测:请参阅消毒技术规范2002版3.17.15。第14页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2015l注意事项l(1)送检时间不得超过 6h,若样品保存于 04,则不得超过24h。l(2)被采样本表面积100cm2取全部表面;被采样本表面积100cm2,取 100cm2。l(3)若消毒因子为化学消毒剂,采样液中应加入相应中和剂。第15页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2016l 结果判定l、类区域:细菌总数5cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。l类区域细菌:总数10cfu/cm2,并未
9、检出致病菌为消毒合格。l类区域细菌:总数15cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。l母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。第16页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2017为什么使用中和剂?为什么使用中和剂?l 中和剂中和剂:在微生物杀灭试验中,用以消除试验微生:在微生物杀灭试验中,用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂,物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂,使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。l 对消毒效果进行监测时,在抽样的同时会将连同残对消毒效果进行监测时,在抽
10、样的同时会将连同残余消毒剂一起被采集到样品中并可能被携带到培养基或余消毒剂一起被采集到样品中并可能被携带到培养基或检验体系内,会对未被杀死的残存细菌生长产生影响,检验体系内,会对未被杀死的残存细菌生长产生影响,使得存活细菌检不出,导致消毒效果高于实际效果或灭使得存活细菌检不出,导致消毒效果高于实际效果或灭菌效果出现假阴性。所以,在对消毒剂杀菌效果进行监菌效果出现假阴性。所以,在对消毒剂杀菌效果进行监测时,必须首先设法去除残余消毒剂,使残存细菌脱离测时,必须首先设法去除残余消毒剂,使残存细菌脱离其影响,获得正常的复苏生长条件,以便有效的检验。其影响,获得正常的复苏生长条件,以便有效的检验。第17
11、页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2018l无菌检验用洗脱液:l 吐温80 1gl 蛋白胨 10gl 氯化钠 8.5gl 蒸馏水 1000mll将各成分加入到1000ml 0.03mol/LPBS液中,加热溶解后调PH至7.27.4,于121压力蒸汽灭菌20min备用。lPBS即磷酸盐缓冲液。第18页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2019l0.03mol/L PBS缓冲液:缓冲液:无水磷酸氢二钠无水磷酸氢二钠 2.83g 磷酸二氢钾磷酸二氢钾 1.36g 蒸馏水蒸馏水 加至加至 1000ml 将各成分加入到将各成分加入到 1000ml 蒸馏水中,待完蒸馏水
12、中,待完全溶解后,调全溶解后,调 pH至至 7.27.4;注意:去结晶水注意:去结晶水第19页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2020去结晶水问题去结晶水问题l磷酸二氢磷酸二氢(Na2HPO412H2O)142142+1218=2.83XX=7.13g(每(每1000mL)第20页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2021去结晶水问题去结晶水问题l硫代硫酸钠硫代硫酸钠(Na2S2O35H2O)158158+518=5XX=7.85g(每(每1000mL)第21页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2022l含相应中和剂的洗脱液种类:l1、卵磷脂
13、1gl 吐温80 1gl 无菌洗脱液 加至100mll此中和剂用于中和75%乙醇、氯已定、苯扎溴铵。l2、卵磷脂 1gl 吐温80 1gl 甘氨酸 0.5gl 无菌洗脱液 加至100mll此中和剂用于中和2%戊二醛。第22页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2023l3、卵磷脂 1gl 吐温80 1gl 硫代硫酸钠 0.5gl 无菌洗脱液 加至100mll此中和剂用于中和0.5%碘伏。l4、卵磷脂 0.5gl 吐温80 2gl 硫代硫酸钠 0.5gl 无菌洗脱液 加至100mll此中和剂用于中和双链季铵盐消毒剂和其他复方消毒剂。第23页,共57页,编辑于2022年,星期五202
14、2/9/2024l5、吐温80 0.3gl 硫代硫酸钠 0.5gl 无菌洗脱液 加至100mll此中和剂用于中和单方含氯消毒剂和过氧化物消毒剂(如过氧乙酸、过氧化氢)。l以上含相应中和剂的洗脱液都要调PH至7.27.4,于121压力蒸汽灭菌20min备用。F保存条件和时间:保存条件和时间:44冰箱半年,常温一个月(出冰箱半年,常温一个月(出现混浊、结晶、长菌等应放弃)。现混浊、结晶、长菌等应放弃)。第24页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2025l五、空气消毒效果的监测五、空气消毒效果的监测l采样时间:在消毒处理后、操作前进行采样。l采样方法:l平板暴露法l(1)布点方法:室
15、内面积30m2,设内、中、外对角线3点,内、外点布点部位距墙壁1m处;室内面积30m2,设 4 角及中央 5 点,4 角的布点部位距墙壁 1m 处。l(2)采样方法:将普通营养琼脂平板(直径为 9cm)放在室内各采样点处,采样高度为距地面 1.5m 采样时将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露 5min,盖好立即送检。第25页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2026第26页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2027l检测方法:将送检的平板置37温箱培养48h,计数菌落数,并分离致病菌。l平板暴露法结果计算公式:l细菌总数(cfu/m3)=50000N/ATl式中A为
16、平板面积(cm2);T为平板暴露时间(min);N为平均菌落数(cfu)。l注意事项l采样前,关好门、窗,在无人走动的情况下,静止10min 进行采样。第27页,共57页,编辑于2022年,星期五公式说明l细菌总数(cfu/m3)=N100/A5/T1000/10l=50000N/ATl这是个经验公式,是基于5分钟内在100cm2培养基上降落的细菌数相当于10升空气中含有的细菌数得出的。2022/9/2028第28页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2029l结果判定l类区域:细菌总数10cfu/m3(或0.2cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格;l类区
17、域:细菌总数200cfu/m3(或4cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格;l类区域:细菌总数500cfu/m3(或10cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。第29页,共57页,编辑于2022年,星期五2022/9/2030v撞击法:v使用撞击式空气微生物采样器采样,由6层孔径不一的撞击器组合成一体,采样时空气中的活性粒子通过各层筛孔由大至小有规律地分别撞击在各层平板上。不仅能测得空气中带菌粒子浓度,还能测出其大小分布情况;v仪器组成:采样器(主体)、抽气泵、流量计及平皿等部件;v选择采样器原则:捕获率高;性能稳定、使用方便、易消毒;噪声低;第30
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