外界因素对酶活性的影响幻灯片.ppt
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1、外界因素对酶活性的影响第1页,共11页,编辑于2022年,星期五(一一一一)pH)pH值对酶活性的影响值对酶活性的影响值对酶活性的影响值对酶活性的影响 酶酶的的活活性性受受环环境境pH的的影影响响极极为为显显著著,通通常常各各种种酶酶只只有有在在一一定定的的pH范范围围内内才才能能表表现现它它的的活活,一一种种酶酶表表现现其其最最高高活活性性时时的的pHpH值值称称为为该该酶酶的的最最适适pH。高高高高于于于于或或或或低低低低于于于于最最最最适适适适pHpH值值值值时时时时,酶酶酶酶的的的的活活活活性性性性降降降降低低低低。酶酶酶酶的的的的最最最最适适适适pH值值值值受受受受酶酶酶酶的的的的纯
2、纯纯纯度度度度、底底底底物物物物的种类和浓度、缓冲液的种类和浓度以及环境温度等条件影响。的种类和浓度、缓冲液的种类和浓度以及环境温度等条件影响。的种类和浓度、缓冲液的种类和浓度以及环境温度等条件影响。的种类和浓度、缓冲液的种类和浓度以及环境温度等条件影响。(二二二二)温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响 每每每每种种种种酶酶酶酶都都都都有有有有其其其其最最适适温温度度,高高高高于于于于或或或或低低低低于于于于此此此此温温温温度度度度酶酶酶酶的的的的活活活活性性性性都都都都降降降降低低低低。一一一一般般般般而而而而言言言言,酶酶酶酶处处处处于于于于过过过过高高高高的的的的温温温温度度度度环环环环
3、境境境境中中中中,会会会会使使使使酶酶酶酶活活活活性性性性永永永永久久久久地地地地丧丧丧丧失失失失;而而而而处处处处于于于于极极极极低低低低温温温温度度度度的的的的环环环环境境境境中中中中只只只只会会会会使使使使酶酶酶酶活活活活性性性性受受受受到到到到抑抑抑抑制制制制,一旦温度适宜,酶又会全部或部分地恢复其活性。一旦温度适宜,酶又会全部或部分地恢复其活性。一旦温度适宜,酶又会全部或部分地恢复其活性。一旦温度适宜,酶又会全部或部分地恢复其活性。第2页,共11页,编辑于2022年,星期五(三三)酶浓度对酶促反应速度的影响酶浓度对酶促反应速度的影响 在在其其它它条条件件不不变变的的情情况况下下,若若
4、反反应应物物浓浓度度大大大大高高于于酶酶浓浓度度时时,则则反反应应速速度度随随酶酶浓浓度度增增加加而而增增加加,两两者者间间成正比关系,即:成正比关系,即:V=kEV=kE 但但但但若若若若反反反反应应应应底底底底物物物物浓浓浓浓度度度度较较较较低低低低,而而而而且且且且酶酶酶酶的的的的浓浓浓浓度度度度足足足足够够够够高高高高时时时时,增加酶浓度,反应速度基本不变。增加酶浓度,反应速度基本不变。增加酶浓度,反应速度基本不变。增加酶浓度,反应速度基本不变。(四四)离子对酶活性的影响离子对酶活性的影响 就就就就唾唾唾唾液液液液淀淀淀淀粉粉粉粉酶酶酶酶而而而而言言言言,低低低低浓浓浓浓度度度度ClC
5、l一一一一可可可可以以以以增增增增加加加加酶酶酶酶活活活活性性性性,高高高高浓浓浓浓度度度度的的的的Cl一一一一或或或或者者者者低低低低浓浓浓浓度度度度的的的的Cu2+2+则则则则会会会会抑抑抑抑制制制制酶酶酶酶的的的的活活活活性性性性,而而而而低低低低浓浓浓浓度度度度的的的的NaNa+、SOSO4 42-等等等等对对对对酶酶酶酶活活活活性性性性没没没没有有有有影影影影响响响响。不不不不同同同同的的的的酶酶酶酶对对对对不不不不同同同同的的的的离子具有不同的效应。离子具有不同的效应。离子具有不同的效应。离子具有不同的效应。第3页,共11页,编辑于2022年,星期五 三、实验操作三、实验操作(一一
6、)pH对酶活性的影响对酶活性的影响1缓冲溶液的配制缓冲溶液的配制取取6只洁净的三角烧瓶,按表只洁净的三角烧瓶,按表1编号和加试剂:编号和加试剂:表表1.磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液的配制磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液的配制 三角烧瓶编号三角烧瓶编号 123456pH值值 5.4 5.4 6.2 6.2 6.8 6.8 7.0 7.0 7.47.48.08.00.2 mol0.2 molL L磷酸氢二钠磷酸氢二钠磷酸氢二钠磷酸氢二钠(m1)(m1)11.15 11.15 13.2213.22 15.4515.45 16.4716.47 18.1718.17 19.4519.45 0.1 mol0.1
7、molL L柠檬酸柠檬酸柠檬酸柠檬酸(m1)(m1)8.858.858.858.85 6.786.78 4.554.55 3.533.53 1.831.83 0.550.55第4页,共11页,编辑于2022年,星期五2.2.pHpH对酶活性的影响对酶活性的影响对酶活性的影响对酶活性的影响 取取取取6 6 6 6支洁净试管,分别编号后,按表支洁净试管,分别编号后,按表支洁净试管,分别编号后,按表支洁净试管,分别编号后,按表2 2 2 2操作:操作:操作:操作:表表表表2 pH2 pH2 pH2 pH对酶活性的影响对酶活性的影响对酶活性的影响对酶活性的影响管管管管 号号号号 123456pHpH值
8、值 5.46.26.87.0 7.48.0缓冲液量缓冲液量(m1)(m1)333333含含NaClNaCl的的0.50.5淀粉淀粉(m1)(m1)222222稀释稀释100100倍唾液倍唾液(m1)(m1)222222充分摇匀充分摇匀充分摇匀充分摇匀 37373737保温,保温,保温,保温,l minl minl minl min后,用滴管从后,用滴管从后,用滴管从后,用滴管从3 3 3 3#管中吸管中吸管中吸管中吸l l l l滴反应液,放白瓷板用碘液检验滴反应液,放白瓷板用碘液检验滴反应液,放白瓷板用碘液检验滴反应液,放白瓷板用碘液检验(1(1(1(1滴滴滴滴)。以后每隔。以后每隔。以后每
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