实验基本组织观察幻灯片.ppt
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1、实验基本组织观察实验基本组织观察第1页,共39页,编辑于2022年,星期五【实验目的】学习显微镜使用,了解人体基本组织结构特征、分布学习显微镜使用,了解人体基本组织结构特征、分布【实验对象】四大基本组织切片:四大基本组织切片:运动神经元切片运动神经元切片 横纹肌纵横切片横纹肌纵横切片 上皮组织切片(复层鳞状上皮)上皮组织切片(复层鳞状上皮)疏松结缔组织疏松结缔组织 马蛔虫卵有丝分裂切片马蛔虫卵有丝分裂切片 人血涂片人血涂片第2页,共39页,编辑于2022年,星期五【实验原理】光学显微镜的成像原理光学显微镜的成像原理【实验方法与步骤】1 1、取出显微镜、取出显微镜 从显微镜镜盒,以正确方式(一手
2、托镜臂从显微镜镜盒,以正确方式(一手托镜臂一手托镜底)取出显微镜。一手托镜底)取出显微镜。2 2、安装、安装 正确安装目镜和物镜(高倍镜正确安装目镜和物镜(高倍镜4040和低倍镜和低倍镜1010),),正确放置切片于载物台上,使组织位于视野中央,调整聚光镜至适正确放置切片于载物台上,使组织位于视野中央,调整聚光镜至适当亮度。当亮度。3 3、观察、观察 先在低倍镜下观察,再在高倍镜下观察。依次观察先在低倍镜下观察,再在高倍镜下观察。依次观察四大基本组织。四大基本组织。4 4、选择一张切片,画出基本组成结构的形态,并标注名称。、选择一张切片,画出基本组成结构的形态,并标注名称。第3页,共39页,编
3、辑于2022年,星期五【注意事项】1、用擦镜纸擦拭镜头,勿用手擦拭镜头。、用擦镜纸擦拭镜头,勿用手擦拭镜头。2 2、调节粗准焦旋钮和细准焦旋钮时,需小心,勿损、调节粗准焦旋钮和细准焦旋钮时,需小心,勿损伤切片。伤切片。第4页,共39页,编辑于2022年,星期五实验实验2 生理实验的常用仪器、生理实验的常用仪器、器械和一般操作方法器械和一般操作方法 第5页,共39页,编辑于2022年,星期五 随着科学技术的发展,先进的科学仪器设备在动物生理学研随着科学技术的发展,先进的科学仪器设备在动物生理学研究中广泛地得到应用,才使我们对生命活动有了更为本质的究中广泛地得到应用,才使我们对生命活动有了更为本质
4、的认识。因此学习和掌握动物生理常用仪器、设备的使用方法认识。因此学习和掌握动物生理常用仪器、设备的使用方法对做好动物生理实验也十分重要。进行动物生理学实验所需对做好动物生理实验也十分重要。进行动物生理学实验所需的仪器总体上可分为的仪器总体上可分为4 4大系统(图大系统(图2 2l l)。)。第6页,共39页,编辑于2022年,星期五(1 1)刺激系统:是对欲研究的对象施加刺激,引起其生理功能变化(即产生兴奋)刺激系统:是对欲研究的对象施加刺激,引起其生理功能变化(即产生兴奋)的一套仪器设备。多种刺激因素,如光、声、电、温度、机械及化学因素都可兴奋的一套仪器设备。多种刺激因素,如光、声、电、温度
5、、机械及化学因素都可兴奋组织,使其产生生理活动的变化。但生理实验中应用最多的还是电刺激,因为电刺组织,使其产生生理活动的变化。但生理实验中应用最多的还是电刺激,因为电刺激较容易控制、对组织没有或损伤很小,引导方便,可重复使用。电刺激系统包括激较容易控制、对组织没有或损伤很小,引导方便,可重复使用。电刺激系统包括电子刺激器、刺激隔离器和各种电极。电子刺激器、刺激隔离器和各种电极。(2 2)引导、换能系统:生理功能变化的信号只有用一定的议器设备)引导、换能系统:生理功能变化的信号只有用一定的议器设备显示、记录下来才有研究的价值。因此需要有一定的装置能将其引导到显显示、记录下来才有研究的价值。因此需
6、要有一定的装置能将其引导到显示、记录仪器上。若生理信号是电信号引导系统可能是引导电极。包括记示、记录仪器上。若生理信号是电信号引导系统可能是引导电极。包括记录单细胞活动的玻璃微电极和记录一群细胞电活动的金属电极。若生理现录单细胞活动的玻璃微电极和记录一群细胞电活动的金属电极。若生理现象为其他能量形式时,如机械收缩、压力、振动、温度和某种化学成分变象为其他能量形式时,如机械收缩、压力、振动、温度和某种化学成分变化等,都需要将原始生理信号转换为电的信号加以引导,这就是各种形式化等,都需要将原始生理信号转换为电的信号加以引导,这就是各种形式的换能器。的换能器。(3 3)信号调节放大系统:有的生理信号
7、较为微弱,尚需进行适当)信号调节放大系统:有的生理信号较为微弱,尚需进行适当的放大。信号调节系统是一种放大器或放大器的组合,对信号基线的的放大。信号调节系统是一种放大器或放大器的组合,对信号基线的位置和输出信号幅度的高低(增益,信号的位置和输出信号幅度的高低(增益,信号的Y Y轴)进行调节。最原始的经典轴)进行调节。最原始的经典仪器是各式各样的杠杆、玛利式气鼓、各种检压计等、现代仪器设备包括示波器、仪器是各式各样的杠杆、玛利式气鼓、各种检压计等、现代仪器设备包括示波器、记录仪中的放大器部分和专用的前置放大器、微电极放大器等。记录仪中的放大器部分和专用的前置放大器、微电极放大器等。(4 4)显示
8、与记录系统有用纸带记录、显示屏记录或显示信号的仪)显示与记录系统有用纸带记录、显示屏记录或显示信号的仪器。通过调节相关的旋钮调节走纸速度或扫描速度(信号的器。通过调节相关的旋钮调节走纸速度或扫描速度(信号的X X轴)将信轴)将信号扩展开来。记纹鼓是一种较为原始的经典记录仪。号扩展开来。记纹鼓是一种较为原始的经典记录仪。由于计算机技术的发展。计算机生物信号采集处理系统已在生理学实由于计算机技术的发展。计算机生物信号采集处理系统已在生理学实验中广泛应用,有替代刺激器、放大器、示波器和记录仪的趋势。验中广泛应用,有替代刺激器、放大器、示波器和记录仪的趋势。第7页,共39页,编辑于2022年,星期五实
9、验实验3 运动系统(一)运动系统(一)骨骼骨骼 第8页,共39页,编辑于2022年,星期五【实验内容】【实验内容】1、观察、辨识、记忆人体骨骼的分布。2、观察、辨识、记忆人体206块骨骼的形态、名称、位置。3、观察、辨识、记忆人体主要骨连结的形态、名称、位置。4、观察、辨识、记忆骨骼重要组成结构的名称、组成及意义:胸廓、脊柱、骨盆、足弓。第9页,共39页,编辑于2022年,星期五实验实验4 运动系统(二)运动系统(二)肌肉肌肉 第10页,共39页,编辑于2022年,星期五【实验内容】【实验内容】1、观察、辨识、记忆人体骨骼肌的形态和分类、起止和作用2、观察、辨识、记忆人体全身骨骼肌名称、位置:
10、头颈肌、躯干肌、四肢肌,见教材人体解剖生理学p.43 表21第11页,共39页,编辑于2022年,星期五实验实验5.1神经肌肉标本制备(蛙神经肌肉标本制备(蛙坐骨神经腓肠肌标本制坐骨神经腓肠肌标本制 备)备)第12页,共39页,编辑于2022年,星期五【实验目的】学习生理学实验基本的组织分离技术;学习生理学实验基本的组织分离技术;学习和掌握制备蛙类坐骨神经腓肠肌标本的方法;学习和掌握制备蛙类坐骨神经腓肠肌标本的方法;了解刺激的种类了解刺激的种类。【实验原理】蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似,若将蛙的神经一肌肉标蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似,若将蛙的神经一肌肉标本
11、放在任氏液中,其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺本放在任氏液中,其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激,可在神经和肌肉上产生一个动作电位,肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次,表明激,可在神经和肌肉上产生一个动作电位,肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次,表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学实验中常利用蛙的坐骨神经腓肠肌标本研究神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学实验中常利用蛙的坐骨神经腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、兴奋性。刺激与反应的关系和肌肉收缩的特征等。制备坐骨神神经、肌肉的兴奋、兴奋性。刺激与反应的关系和肌肉收缩的特征等。制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验的
12、一项基本操作技术。经腓肠肌标本是生理学实验的一项基本操作技术。第13页,共39页,编辑于2022年,星期五【实验对象】蟾蜍或蛙【实验药品】任氏液、食盐、任氏液、食盐、l lH2SO4H2SO4【仪器与器械】普通剪刀、手术剪、眼科镊(或尖头无齿镊)、金属探针(解剖针)破璃分针、蛙板(或玻璃板)、蛙钉、细线、培养皿、滴管、锌铜弓(或电子刺激器)、酒精灯第14页,共39页,编辑于2022年,星期五【实验方法与步骤】【实验方法与步骤】1 1破坏脑、脊髓破坏脑、脊髓 取蟾蜍,用自来水冲洗干净(勿用手搓)、左手握住蟾蜍取蟾蜍,用自来水冲洗干净(勿用手搓)、左手握住蟾蜍使其背部向上,用拇指或示指使头前俯(以
13、头颅后缘稍稍拱起为宜)。右使其背部向上,用拇指或示指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管(图手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管(图5.l5.ll l)。然后将探针改向)。然后将探针改向前刺人颅腔内,左右搅动探针前刺人颅腔内,左右搅动探针2 23 3次,捣毁脑组织。如果探针在颅腔内。应有次,捣毁脑组织。如果探针在颅腔内。应有碰及颅底骨的感觉。再将探针退回至枕骨大孔,使针尖转向尾端,捻动探针碰及颅底骨的感觉。再将探针退回至枕骨大孔,使针尖转向尾端,捻动探针使其刺人椎管,捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉使其刺人椎管,捣毁脊髓。此
14、时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是,进针时有一定的阻力,而且随着进什赌赊出现下波僵直或尿失禁现象是,进针时有一定的阻力,而且随着进什赌赊出现下波僵直或尿失禁现象若脑和脊髓破坏完全蟾蜍下颌呼吸运动消失,四肢完全松软,失去一切反若脑和脊髓破坏完全蟾蜍下颌呼吸运动消失,四肢完全松软,失去一切反射活动此时可将探针反向捻动,退出椎管。如蟾蜍仍有反射活动。表示脑射活动此时可将探针反向捻动,退出椎管。如蟾蜍仍有反射活动。表示脑和脊随破坏不彻底,应重新破坏。和脊随破坏不彻底,应重新破坏。2 2剪除躯干上部、皮肤及内脏用左手捏住蟾蜍的脊柱。右手持粗剪刀在前肢剪除躯干上部、皮肤及内脏用左手捏住蟾蜍的脊柱。
15、右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮肤,腹肌、脊柱一并剪断,然后左手握住蟾蜍的后肢,紧靠脊柱两腋窝处连同皮肤,腹肌、脊柱一并剪断,然后左手握住蟾蜍的后肢,紧靠脊柱两侧将腹壁及内脏剪去,注意避开坐骨神经,并剪去肛门周围的皮肤,图下脊柱和侧将腹壁及内脏剪去,注意避开坐骨神经,并剪去肛门周围的皮肤,图下脊柱和后肢。后肢。3.3.剥皮一只手捏住脊柱的断端(注意不要捏住脊柱两侧的神经),另一只手捏住其剥皮一只手捏住脊柱的断端(注意不要捏住脊柱两侧的神经),另一只手捏住其皮肤的边缘,向下剥去全部后肢的皮肤(图皮肤的边缘,向下剥去全部后肢的皮肤(图5.l5.l2 2)。将标本放在干净的任氏液)。将标本放在干净的任
16、氏液中将手及使用过的探针、剪刀全部冲洗干净。中将手及使用过的探针、剪刀全部冲洗干净。第15页,共39页,编辑于2022年,星期五 4.4.分离两腿用镊子取出标本,左手捏住脊柱断端。使标本背面朝上,右手用分离两腿用镊子取出标本,左手捏住脊柱断端。使标本背面朝上,右手用粗剪刀剪去突出的骶骨(也可不进行此步)。然后将脊柱腹侧向上,左手的两粗剪刀剪去突出的骶骨(也可不进行此步)。然后将脊柱腹侧向上,左手的两个手指捏往脊柱断端的横突,另一手指将两后肢担起,形成一个平面。此时用个手指捏往脊柱断端的横突,另一手指将两后肢担起,形成一个平面。此时用粗剪刀沿正中线将脊柱盆骨分为两半(注意,勿伤坐骨神经)。将一半
17、后肢标粗剪刀沿正中线将脊柱盆骨分为两半(注意,勿伤坐骨神经)。将一半后肢标本置于盛有任氏液的盘中备用,另一半放在蛙板上进行下列操作本置于盛有任氏液的盘中备用,另一半放在蛙板上进行下列操作 5.5.辨认蛙后肢的主要肌肉辨认蛙后肢的主要肌肉 蛙类的坐骨神经是由第蛙类的坐骨神经是由第7 7、8 8、9 9对脊神经对脊神经从相对应的椎间孔穿出汇合而成,行走于脊柱的两侧,到尾端(肛门处)绕过坐骨从相对应的椎间孔穿出汇合而成,行走于脊柱的两侧,到尾端(肛门处)绕过坐骨联合,到达后肢背侧,行走于梨状肌下的股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟内,联合,到达后肢背侧,行走于梨状肌下的股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟
18、内,到达膝关节腘窝处有分支进入腓肠肌(图到达膝关节腘窝处有分支进入腓肠肌(图5.15.13 3)。)。6 6游离坐骨神经和腓肠肌用蛙钉或左手的两个手指将标本绷直、游离坐骨神经和腓肠肌用蛙钉或左手的两个手指将标本绷直、固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神经与周边的结缔组织分离侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神经与周边的结缔组织分离直到腘窝。但不要伤及神经,其分支待以后用手术剪剪断。直到腘窝。但不要伤及神经,其分支待以后用手术剪剪断。同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的结缔组织分
19、离井在其跟健处穿线、结扎。同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的结缔组织分离井在其跟健处穿线、结扎。第16页,共39页,编辑于2022年,星期五 7 7剪去其他不用的组织操作从脊柱向小腿方向进行剪去其他不用的组织操作从脊柱向小腿方向进行 (1 1)剪去多余的脊柱和肌肉将后肢标本腹面向上,将坐骨神经连)剪去多余的脊柱和肌肉将后肢标本腹面向上,将坐骨神经连同同2 23 3节脊椎用粗剪刀从脊柱上剪下来。再将标本背面向上,用镊子轻轻提起脊节脊椎用粗剪刀从脊柱上剪下来。再将标本背面向上,用镊子轻轻提起脊椎,自上而下剪去支配腓肠肌以外的神经分支,直至腘窝(图椎,自上而下剪去支配腓肠肌以外的神经分支,直至腘窝(图5
20、.l5.l4A4A),并搭),并搭放在腓肠肌上。沿膝关节剪去股骨周围的肌肉,并将股骨刮净,用粗剪刀放在腓肠肌上。沿膝关节剪去股骨周围的肌肉,并将股骨刮净,用粗剪刀剪去股骨上端的剪去股骨上端的1 13 3(保留(保留2 23 3),制成坐骨神经),制成坐骨神经小腿的标本。小腿的标本。(2 2)完成坐骨神经腓肠肌标本)完成坐骨神经腓肠肌标本 将脊椎和坐骨神经从腓肠肌上取下,提将脊椎和坐骨神经从腓肠肌上取下,提起腓肠肌的结扎线剪断跟腱。用粗剪刀剪去膝关节以下部位,便制成了坐骨神起腓肠肌的结扎线剪断跟腱。用粗剪刀剪去膝关节以下部位,便制成了坐骨神经腓肠肌标本(图经腓肠肌标本(图5 51 14B4B)。
21、)。8 8检验标本检验标本 用沾有任氏液的锌铜弓触及一下(或电刺激刺激)坐骨神用沾有任氏液的锌铜弓触及一下(或电刺激刺激)坐骨神经或用镊子夹持坐骨神经中枢端,如腓肠肌发生迅速而明显的收缩,说明标本经或用镊子夹持坐骨神经中枢端,如腓肠肌发生迅速而明显的收缩,说明标本的兴奋性良好。标本浸人盛有任氏液的培养皿中备用。的兴奋性良好。标本浸人盛有任氏液的培养皿中备用。然后再依次用热玻璃棒、食盐(或然后再依次用热玻璃棒、食盐(或1 1H2SO4H2SO4滤纸)刺激坐骨神经中枢滤纸)刺激坐骨神经中枢端(或肌肉),观察肌肉收缩有何变化?如果放上食盐肌肉无动静,用任端(或肌肉),观察肌肉收缩有何变化?如果放上食
22、盐肌肉无动静,用任氏液将盐冲洗掉,再观察冲洗过程中肌肉收缩有何变化?氏液将盐冲洗掉,再观察冲洗过程中肌肉收缩有何变化?第17页,共39页,编辑于2022年,星期五【注意事项】【注意事项】1 1避免蟾蜍体表毒液和血液污染标本,压挤、损伤避免蟾蜍体表毒液和血液污染标本,压挤、损伤和用力牵拉标本,不可用金属器械触碰神经干。和用力牵拉标本,不可用金属器械触碰神经干。2 2在操作过程中,应给神经和肌肉滴加任氏液,在操作过程中,应给神经和肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影响标本的兴奋性。防止表面干燥,以免影响标本的兴奋性。3 3标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟,使标标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟,
23、使标本兴奋性稳定,再开始实验效果会较好。本兴奋性稳定,再开始实验效果会较好。4热玻璃棒的温度防止过高,以免烫伤标本。第18页,共39页,编辑于2022年,星期五【思考题】【思考题】1用各种刺激检验标本兴奋性时,为什么要从中枢端开始?2刺激有几种形式?如何解释对食盐的不同处理后对肌肉收缩的影响?第19页,共39页,编辑于2022年,星期五实验实验5.2 骨骼肌收缩(刺激强骨骼肌收缩(刺激强度对肌肉收缩的影响)度对肌肉收缩的影响)第20页,共39页,编辑于2022年,星期五【实验目的实验目的】学习神经肌肉实验的电刺激方法和记录肌肉收缩的方法;观察刺激强学习神经肌肉实验的电刺激方法和记录肌肉收缩的方
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