细菌鉴定工作的注意问题（四）.doc

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1、细菌鉴定工作的注意问题 （一）、选用合适的鉴定系统 细菌鉴定系统并非分类模式，尽管它们表面看来有些相似，对一群病原体的鉴定系统设计，基于一种或多种该细菌都具备，而其他群细菌皆不具备的特征谱.用于该群鉴定的特性，通常不是用来分类，如分类用杂交研究，而鉴定则基于与基因信息密切相关的表现型特征.常规鉴定试验应该选择方法简单，反应判断明确，价廉等如琼脂.琼脂。 血清学反应在分类上价值有限，但在鉴定中常常有极大作用，由于方法学上操作简单、快速，而且特异性高，它给细菌鉴定提供快速诊断方法。对许多菌属、种的鉴定，常用整试验图谱得出，肠杆菌科菌种是个例子，为减少需要大量培养基，已设计种简便、快速多试验系统，并

2、有商品供应，用于各种微生物鉴定，特别是医学重要微生物鉴定。每个制造商提供的图、表、编码、计算机数据和鉴定概率等，皆以配合各自出产的多试验系统运用。因此盲目接受一种鉴定模式，而不去考设计者所要求的特定条件，如接种量、育温度、时间、培养基的分，培养基的表面化与容量的比率及确定阴性、阳性结果的标准，就会导致错误。虽然商品性多试验统，因严格的培养基和试剂的质量控制，给各实验室提高标准化系带来好处，但至今还没有一种系统对各种病原菌鉴定均达到很高的符合率.因此，当选用鉴定具有种特性的检菌时，应与已知的典型或标准菌株作对照比较，以保证在自已实验条件下，试验结果的可靠性. （二）正确判断阳性与阴性的反应界限

3、现已发现，一些试验是基于质粒或噬菌体介导的有较高可变的特性，因而用于鉴定是不可靠的。理想中某试验应当给予明显的阳性或阴性可重复试验结果，而没有模糊反应。某些细菌的革兰染色是可变的，只形成少量芽胞的细菌，仅通过染色和对热耐受试验确定也很困难。糖类分解试验很难把产少量酸从不产酸中区分开，用于鉴定系统试验，精确、具体的阳性和阴性结果反应界限很重要。 （三）纯化培养物的必要性 人们在使用表现型特征进行鉴定病原菌之前，纯培养物几乎是必需折。从选择性平板佻单个菌落不能保证纯度。活的但不生长的污染菌，常可在于挑选的菌落之中或附近，并随选择菌一起行次代培养。因此，选择性培养基更适用于最后分离。纯培养细菌在固体

4、培养基上，菌落总是彼此相像，显示分纯的迹象。另一种纯度的标准是形态学，纯培养细菌在染色涂片上，通常表达形态学高度相似性。虽然如此，但也有例外，如-r变异荚膜变异、色素无色素变异，可在某一基质、温度或其他生长条件下出现，也因培养物菌龄、所用培养基以包括球形体、包、芽胞形式和多形态性等发生改变. （四）细菌鉴定的步骤 鉴定是一个未知株按其生物学特征，经过与有已知的菌种进行比较后划归到一已知菌种的分析过程。 、明确鉴定菌种已获得纯培养。 、确定革兰染色形态，然后按科、属、种走步骤鉴定下去。 、利用已具备条件，尽可能地缩小鉴定范围。 、把知识、经验运用于每一鉴定步骤。 、应用最小数量的试验方法作出鉴定。 、将分离菌株与相关的典型或参考菌作比较，以保证实际应用鉴定系统，在你的个别实验条件下是有效的。 细菌鉴定错误的常见三个因素是形态、革兰染色反应和动力。在多数情况下，鉴定分离到属级水平不会发生困难，而明确至种级和亚种，需要特殊参考实验室的帮助。 第 3 页 共 3 页免责声明：图文来源于网络搜集，版权归原作者所以若侵犯了您的合法权益，请作者与本上传人联系，我们将及时更正删除。