第六章 实验动物基本操作PPT讲稿.ppt
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1、第六章 实验动物基本操作第1页,共63页,编辑于2022年,星期三第一节 动物实验前的准备一、动物实验室的选择二、实验动物的购买三、实验动物编号与标记 第2页,共63页,编辑于2022年,星期三一、动物实验室的选择1.根据实验目的选择合适的实验室及饲养室。2.动物实验室要与实验动物同等级别。3.饲养室应符合实验动物的生活习性及国家实验动物设施各项标准。第3页,共63页,编辑于2022年,星期三二、实验动物的购买1.应购买有实验动物生产供应许可证的单位所生产繁殖的实验动物,并应索取相应实验动物的质量合格证明。2.如果从外地购买的动物,应考虑运输中的各种因素对实验动物的影响,并应查阅运输检疫证明。
2、3.购买的动物需要经过3-7天的隔离检疫、观察。第4页,共63页,编辑于2022年,星期三三、实验动物编号与标记方法(一)染色法:1、单色涂染法:在每组动物不超过l0只或一个实验不超过40只的情况下适用。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂:3-5苦味酸溶液,可染成黄色。第5页,共63页,编辑于2022年,星期三 方法步骤:方法步骤:(1)(1)涂染原则:从左到右、从上到下。涂染原则:从左到右、从上到下。(2)(2)左前肢为左前肢为l l号、左侧腹部号、左侧腹部2 2号、号、左后肢左后肢3 3号。号。(3)(3)两耳后部两耳后部4 4号、背中部号、背中部5 5号、号、后肢背部后肢背部6 6号。号。
3、(4)(4)右前肢右前肢7 7号、号、右侧腹部右侧腹部8 8号、号、右后肢右后肢9 9号。号。(5)(5)尾巴根尾巴根为为1010号。号。(6 6)额额部部为为2020号号第6页,共63页,编辑于2022年,星期三 2 2、双色涂染法:双色涂染法:在每组动物不超过在每组动物不超过100100只的情况下只的情况下 适用。适用。实验动物:大鼠、小鼠。实验动物:大鼠、小鼠。常用染色剂常用染色剂:(1)3-5(1)3-5苦味酸溶液苦味酸溶液,可染成黄色。,可染成黄色。作为作为“个个”位数。位数。(2)0.5%(2)0.5%中性中性红红或品或品红红溶液溶液,可染,可染 成成红红色。色。作作为为“十十”位
4、数。位数。第7页,共63页,编辑于2022年,星期三 方法步骤:方法步骤:(1)(1)用两种颜色同时进行染色标记。用两种颜色同时进行染色标记。(2)(2)用苦味酸用苦味酸(黄色黄色)染色染色标记标记作作为为个位数,个位数,个位数的染色个位数的染色标记标记方法同方法同单单色涂染法。色涂染法。(3)(3)用品红用品红(红色红色)染色标记作为十位数,染色标记作为十位数,第8页,共63页,编辑于2022年,星期三(4 4)左前肢为)左前肢为1010号、号、左侧腹部左侧腹部2020号、号、左后肢左后肢3030号,号,两耳后部两耳后部4040号、号、背部背部5050号、号、后肢背部后肢背部6060号,号,
5、右前肢右前肢7070号、号、右右侧侧腹部腹部 8080号、号、右后肢右后肢9090号号 第第100100号不作染色号不作染色标记标记。第9页,共63页,编辑于2022年,星期三(二)穿耳孔法 用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口表示一定号码的方法,原则是:左耳代表十位,右耳代表个位。实验动物:兔、犬、猪(三)标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上或 实验动物:犬、猴(四)烙印法(五)剪毛法第10页,共63页,编辑于2022年,星期三第二节 实验动物的捉拿与固定n大小鼠的捉拿与固定n豚鼠的捉拿与固定n兔的捉拿与固定n犬的捉拿与固定第11页,共63页,编辑于2022年,星期三 一、小鼠的抓
6、取保定:一、小鼠的抓取保定:器材:小鼠饲养盒器材:小鼠饲养盒+面罩面罩1 1套。套。方法步骤:方法步骤:1 1、用右手拇指和食指捏、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提住小鼠尾巴中部将小鼠提 起,放在饲养合的面罩上。起,放在饲养合的面罩上。2 2、用左手拇指和食指迅速、用左手拇指和食指迅速、准确地捏住小鼠的两耳后及准确地捏住小鼠的两耳后及 颈背部的皮肤,将小鼠提起。颈背部的皮肤,将小鼠提起。第12页,共63页,编辑于2022年,星期三 3 3、翻翻转转左左手手掌掌,以以左左手手掌掌心心和和中中指指夹夹 小鼠背部的皮肤,使小鼠整个呈一条直线。小鼠背部的皮肤,使小鼠整个呈一条直线。4 4、用
7、左手无名指、用左手无名指 压住小鼠背部的压住小鼠背部的 皮肤,小指压住皮肤,小指压住 小鼠的尾巴根部。小鼠的尾巴根部。5 5、松开捏住小鼠尾、松开捏住小鼠尾 巴的右手拇指和食指。巴的右手拇指和食指。此法适用于肌注、腹腔注射、灌胃等此法适用于肌注、腹腔注射、灌胃等 第13页,共63页,编辑于2022年,星期三二、大鼠的抓取保定:二、大鼠的抓取保定:大鼠的抓取保定:大鼠的抓取保定:器材:大鼠饲养盒器材:大鼠饲养盒 +面罩面罩 1 1套。套。方法步骤:方法步骤:4-54-5周内的大鼠,方法同小鼠。周内的大鼠,方法同小鼠。周龄较大的,则:周龄较大的,则:1 1、首先戴好防、首先戴好防护护手套。手套。2
8、 2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起,放在大鼠饲养盒的面罩上。大鼠提起,放在大鼠饲养盒的面罩上。3 3、左手顺势按、卡在大鼠躯干、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部,稍加压力向头颈部滑行。背部,稍加压力向头颈部滑行。4 4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤,其余三指和手掌后部的头颈皮肤,其余三指和手掌握住大鼠背部皮握住大鼠背部皮肤,完成抓取保定。肤,完成抓取保定。第14页,共63页,编辑于2022年,星期三三、豚鼠的抓取保定三、豚鼠的抓取保定器材:大鼠器材:大鼠饲饲养盒养盒+带带面罩面罩 l l套。套。方法步骤:
9、方法步骤:1 1、先用左手轻轻扣、先用左手轻轻扣、按住豚鼠背部。按住豚鼠背部。2 2、顺势抓紧其肩胛上方皮肤,、顺势抓紧其肩胛上方皮肤,拇指和食指环箍其颈部。拇指和食指环箍其颈部。3 3、用右手、用右手轻轻轻轻托住其臀部,托住其臀部,即可将豚鼠抓取保定。即可将豚鼠抓取保定。抓豚鼠抓豚鼠时时,一般不要抓腰腹部位,一般不要抓腰腹部位,否否则则易造成肝破裂而引起死亡。易造成肝破裂而引起死亡。第15页,共63页,编辑于2022年,星期三 四、兔的抓取保定:四、兔的抓取保定:(一一)方法方法1 1:步骤:步骤:1 1、用用右右手手抓抓住住兔兔颈颈部部的的被被毛毛和和皮皮肤肤,轻轻轻轻把兔提起。把兔提起。
10、2 2、用左手托住、用左手托住兔兔的臀部。的臀部。第16页,共63页,编辑于2022年,星期三(二二)方法方法2 2:器材:兔保定架器材:兔保定架1 1个。个。步骤:步骤:1 1、打开保定架的上盖,抓取、打开保定架的上盖,抓取并将并将兔放兔放进进架架内,迅速关上保定架的上盖。内,迅速关上保定架的上盖。2 2、右手抓住兔耳朵将头部拉过保定架的卡、右手抓住兔耳朵将头部拉过保定架的卡栓,将兔的脖子保定。栓,将兔的脖子保定。3 3、如果兔、如果兔挣挣扎,可用手扎,可用手在它的背上在它的背上轻轻抚轻轻抚摸,摸,使其安静。使其安静。第17页,共63页,编辑于2022年,星期三五、犬的抓取与固定n用特制的长
11、柄狗头钳夹住狗颈部,将其按在地,由助手用绳子将其四肢及嘴固定好。扎口时注意松紧,保证动物正常呼吸。第18页,共63页,编辑于2022年,星期三第三节 实验动物的麻醉n动物麻醉是消除动物手术疼痛,便于实验操作,保证动物安全,为手术创造良好的条件。n动物全身麻醉分四期:1.第一期:随意兴奋期,出现运动与运动失调;2.第二期:不随意兴奋期,由意识完全丧失至规则的自动呼吸开始时止。3.第三期:外科麻醉期,4.第四期:延髓麻醉期,进入此期,麻醉已严重过量。第19页,共63页,编辑于2022年,星期三麻醉方法与麻醉药n麻醉方法:全身麻醉和局部麻醉,通过吸入、注射(静脉、皮下、肌肉、腹腔)、口服、灌胃等方法
12、使动物麻醉。n常用麻醉药物:乙醚(吸入),戊巴比妥钠、硫贲妥钠、氯胺酮(静脉),普鲁卡因、利多卡因(局麻),第20页,共63页,编辑于2022年,星期三常用麻醉药的剂量及注射途径种类戊巴比妥硫贲妥钠盐酸氯胺酮水合氯醛乌拉坦mg/kg途径mg/kg途径mg/kg途径mg/kg途径mg/kg小鼠3550IVIP2550I.V.IP22-44IM400IP-大鼠2550IVIP2040IVIP22-44IM300IP0.75IP豚鼠3040IVIP2055IVIP22-44IM200-300IP1.5IP家兔3040IVIP20IV22-441.0IVIP狗30IV25IV125IV1.0IV猪45
13、kg30-2015IVIV10-95IVIV10-1510-15IMIM第21页,共63页,编辑于2022年,星期三麻醉注意事项n麻醉前应禁食8h以上n麻醉前应准确称体重n注意麻醉剂量n麻醉过程中注意观察动物的反应情况n注意保温n静脉注射时必须缓慢,n在寒冷冬季,麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平第22页,共63页,编辑于2022年,星期三第四节 给药方法n实验动物常用的给药方法有口服、注射、吸入等一、经口给药1.自动口服给药:2.灌胃给药:是借器械将药物直接灌入动物胃内的方法。此法可以准确控制给药量,但如果操作不当易造成动物死亡。(1)大小鼠灌胃:第23页,共63页,编辑于2022年,星期三
14、 方法步骤:方法步骤:1 1、将灌胃针连接在注射器上,吸入一定量的药液。、将灌胃针连接在注射器上,吸入一定量的药液。2.2.操操作作前前,大大致致量量一一下下从从口口到到胃胃的的距距离离,估估计计灌灌胃胃针针头头插插入入的深度。的深度。3.3.左手捉持动物,使头部向上。左手捉持动物,使头部向上。3 3、右手持针,把灌胃针头的前端放进动物的口腔,顺着上腭右手持针,把灌胃针头的前端放进动物的口腔,顺着上腭部插入咽部,顺咽后壁轻轻往下推,灌胃针会顺着食管滑部插入咽部,顺咽后壁轻轻往下推,灌胃针会顺着食管滑入动物的胃内,入动物的胃内,此时没有抵触感。此时没有抵触感。4 4、用右手食指将针栓慢慢往下压,
15、将注射器中的药液灌入、用右手食指将针栓慢慢往下压,将注射器中的药液灌入动物的胃中。动物的胃中。第24页,共63页,编辑于2022年,星期三剂量:小鼠约剂量:小鼠约剂量:小鼠约剂量:小鼠约0.1-0.5ml0.1-0.5ml10g10g体重。最大体积为体重。最大体积为体重。最大体积为体重。最大体积为1.0ml/1.0ml/只只只只 大鼠约大鼠约大鼠约大鼠约1-2 ml1-2 ml100g100g体重,最大体积为体重,最大体积为体重,最大体积为体重,最大体积为1.0ml/1.0ml/只只只只注意:在灌胃过程中,避免误插入气管。注意:在灌胃过程中,避免误插入气管。注意:在灌胃过程中,避免误插入气管。
16、注意:在灌胃过程中,避免误插入气管。第25页,共63页,编辑于2022年,星期三(2)兔灌胃原理:将药液直接注入兔的胃内。原理:将药液直接注入兔的胃内。器材:兔开口器、器材:兔开口器、1414号胃管、注射器号胃管、注射器1 1支、生理支、生理盐盐水、水、烧烧杯、石蜡油。杯、石蜡油。第26页,共63页,编辑于2022年,星期三 步骤:步骤:1、将兔放进保定架内,助手用手轻轻压住兔的背部,避免兔的挣扎。2、灌胃者用左手拇指和中指挤压兔两颊,将下颌挤开使兔被动张口。3、右手将开口器从一侧口角插入口腔并固定。4、用泡在石蜡油中的胃管,经开口器的孔插入,向前推进约15cm,可达胃内。5、在插管时应将胃管
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