医学免疫学创新性实验精品文稿.ppt

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1、医学免疫学创新性实验第1页，本讲稿共14页实验目的：实验目的：1.学习家兔、小鼠的免疫方法，饲养技术，学习家兔、小鼠的免疫方法，饲养技术，观察其主要的免疫器官；观察其主要的免疫器官；2.学习采集血液的技术和制备血清的方法；学习采集血液的技术和制备血清的方法；3.学习并利用肥大氏反应检测血清中抗体的学习并利用肥大氏反应检测血清中抗体的效价的方法。效价的方法。第2页，本讲稿共14页实验原理：实验原理：1.灭活伤寒沙门菌注入动物体内后，作为异灭活伤寒沙门菌注入动物体内后，作为异物抗原，将刺激免疫系统，由物抗原，将刺激免疫系统，由B细胞产生多细胞产生多克隆抗体。克隆抗体。2.抗原和抗体在体内外均可以发

2、生特异性结抗原和抗体在体内外均可以发生特异性结合，可利用肥大氏反应检测动物血清中伤合，可利用肥大氏反应检测动物血清中伤寒沙门菌抗体的含量。寒沙门菌抗体的含量。第3页，本讲稿共14页实验材料：实验材料：1.新西兰雄性大白兔共新西兰雄性大白兔共16只，只，2只只/班，昆明鼠班，昆明鼠48只，只，6只只/班班2.灭活伤寒沙门菌灭活伤寒沙门菌3.注射器（免疫用、采血用）、碘酒酒精棉注射器（免疫用、采血用）、碘酒酒精棉球等球等4.肥大氏反应用实验材料肥大氏反应用实验材料第4页，本讲稿共14页第5页，本讲稿共14页一、大白兔耳缘静脉免疫方法一、大白兔耳缘静脉免疫方法1.将大白兔固定，将耳缘静脉附近的毛剪去

3、，将大白兔固定，将耳缘静脉附近的毛剪去，并用酒精棉球消毒。并用酒精棉球消毒。2.用用2ml注射器吸取注射器吸取1ml（初次（初次0.5ml0.5ml）伤寒沙伤寒沙门菌液经耳缘静脉注入大白兔体内。门菌液经耳缘静脉注入大白兔体内。3.每周免疫每周免疫1次，连续次，连续3-4次。次。注意：先自耳缘静脉远端注射。注意：先自耳缘静脉远端注射。第6页，本讲稿共14页二、大白兔皮内免疫方法二、大白兔皮内免疫方法1.先将大白兔固定，剪去背部兔毛，注意不先将大白兔固定，剪去背部兔毛，注意不要剪破皮肤。然后用酒精棉球进行消毒。要剪破皮肤。然后用酒精棉球进行消毒。2.用用2ml注射器吸取注射器吸取1ml伤寒沙门菌液

4、进行皮伤寒沙门菌液进行皮内注射，共内注射，共4-6点，每点大约点，每点大约0.2ml。3.每周免疫每周免疫1次，连续次，连续3-4次。次。第7页，本讲稿共14页三、小鼠腹腔免疫方法三、小鼠腹腔免疫方法1.用左手抓取小鼠固定，消毒腹部皮肤。用左手抓取小鼠固定，消毒腹部皮肤。2.用用1ml注射器吸取伤寒沙门菌注射器吸取伤寒沙门菌0.2ml进行腹腔进行腹腔注射。注射。3.每周免疫每周免疫1次，连续次，连续3-4次。次。第8页，本讲稿共14页四、兔标记方法：四、兔标记方法：1班：剪去头左侧毛班：剪去头左侧毛2班：头右侧班：头右侧3班：脖左侧班：脖左侧4班：脖右侧班：脖右侧5班：腹左侧班：腹左侧6班：腹

5、右侧班：腹右侧7班：臀左侧班：臀左侧8班：臀右侧班：臀右侧第9页，本讲稿共14页五、进行实验记录：五、进行实验记录：包括实验名称包括实验名称 指导教师指导教师 年级专业年级专业 参加实验学生参加实验学生 整个实验过程整个实验过程 意见和建议意见和建议第10页，本讲稿共14页进行实验记录：进行实验记录：包括实验名称包括实验名称 指导教师指导教师 年级专业年级专业 参加实验学生参加实验学生 整个实验过程整个实验过程 意见和建议意见和建议兔标记方法：兔标记方法：1班：剪去班：剪去头左侧头左侧毛毛5班：剪去班：剪去腹左侧腹左侧毛毛第11页，本讲稿共14页一、大白兔耳缘静脉免疫方法：一、大白兔耳缘静脉免

6、疫方法：1.1.将大白兔固定，将耳缘静脉附近的毛剪去，将大白兔固定，将耳缘静脉附近的毛剪去，并用酒精棉球消毒。并用酒精棉球消毒。2.2.用用2ml2ml注射器吸取注射器吸取1ml1ml（初次（初次0.5ml0.5ml）伤寒沙）伤寒沙门菌液经耳缘静脉注入大白兔体内。门菌液经耳缘静脉注入大白兔体内。3.3.每周免疫每周免疫1 1次，连续次，连续3-43-4次。次。注意：先自耳缘静脉远端注射。注意：先自耳缘静脉远端注射。第12页，本讲稿共14页二、大白兔皮内免疫方法二、大白兔皮内免疫方法1.1.先将大白兔固定，剪去背部兔毛，注意不先将大白兔固定，剪去背部兔毛，注意不要剪破皮肤。然后用酒精棉球进行消毒

7、。要剪破皮肤。然后用酒精棉球进行消毒。2.2.用用2ml2ml注射器吸取注射器吸取1ml1ml伤寒沙门菌液进行皮内伤寒沙门菌液进行皮内注射，共注射，共4-64-6点，每点大约点，每点大约0.2ml0.2ml。3.3.每周免疫每周免疫1 1次，连续次，连续3-4次。次。第13页，本讲稿共14页三、小鼠腹腔免疫方法三、小鼠腹腔免疫方法1.1.用左手抓取小鼠固定，消毒腹部皮肤。用左手抓取小鼠固定，消毒腹部皮肤。2.2.用用1ml1ml注射器吸取伤寒沙门菌注射器吸取伤寒沙门菌0.2ml0.2ml进进行腹腔注射。行腹腔注射。3.3.每周免疫每周免疫1 1次，连续次，连续3-43-4次。次。第14页，本讲稿共14页