性传播疾病的实验室诊断幻灯片.ppt
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1、性传播疾病的实验室诊断第1页,共67页,编辑于2022年,星期六.讲授内容 性病概述(性病的概念、危害、研究范围)梅毒的实验室诊断(临床、实验室诊断)淋病的实验室诊断(临床、实验室诊断)非淋菌性尿道炎(临床、实验室诊断)生殖器疱疹(临床、实验室诊断)尖锐湿疣的实验室诊断(临床、实验室诊断)第2页,共67页,编辑于2022年,星期六性病(Venereal diseases,VD)是指通过性交传染的、具有明显生殖器损害症状的全身性疾病,亦称为经典性病。包括梅毒、淋病、软下疳和性病性淋巴肉芽肿。性传播疾病(sexually transmitted diseases,STD):是指通过性接触可以传染的
2、一组传染病,在我国,人们简称为性病。其概念不同于经典性病,包容的病种 20余种。性病防治管理办法:梅毒,淋病,尖锐湿疣,非淋菌性尿道炎,生殖器疱,软下疳,性病性淋巴肉芽肿,艾滋病。STD是自古就有的,只是由于人类活动范围的扩大,交流增多,性行为更随意,性病的范围在不断扩大。性病在我国广泛流行,它不仅危害个人健康,也殃及家庭,遗害后代,同时还危害社会,成为严重的公共卫生和社会问题。.性传播疾病的概念第3页,共67页,编辑于2022年,星期六性病的危害(1)感染性病后不及时发现并彻底治疗,不仅可损害人的生殖器官,导致不孕不育、异位妊娠、早产、流产和死胎等,有些性病还可损害心脏、脑等人体的重要器官,
3、甚至导致死亡。有些性病一旦染上是难以治愈的,如尖锐湿疣、生殖器疱疹。有相当一部分的性病患者症状较轻或没有任何明显的症状,但却可以通过各种性病传播途径传给其他健康人。第4页,共67页,编辑于2022年,星期六性病的危害(2)性病的流行还给家庭带来严重危害。例如淋病,通常情况是,夫妇中的一方由于某种原因而感染上淋病,然后通过夫妻间的性生活,传染给对方,家中的孩子或是通过母婴途径传播,或是通过日常生活的接触而被感染,使得一家人都深受其害。性病还能促进艾滋病的传播和流行。第5页,共67页,编辑于2022年,星期六陕西省皮肤性病防治所 朱参胜1.临床:早期、准确诊断,发现无症状感染者评估治疗效果,判断治
4、愈指导临床用药,耐药性监测2.流行病学监测:2011.7病例报告患病率调查耐药监测3.科研:基础性 应用型研究Generated by Foxit PDF Creator Foxit Softwarehttp:/ For evaluation only.性病实验室诊断的应用第6页,共67页,编辑于2022年,星期六.性病研究范围性病防治管理办法指定的8种性病1.梅毒2.淋病3.尖锐湿疣4.非淋菌性尿道炎5.生殖器疱疹6.软下疳7.性病性淋巴肉芽肿8.艾滋病第7页,共67页,编辑于2022年,星期六梅毒概念:梅毒(英文名称:syphilis)是由苍白(梅毒)螺旋体(Treponema palli
5、dum)引起的慢性、系统性性传播疾病(VD,STD)。绝大多数是通过性途径传播,临床上可表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潜伏梅毒。临床上以阴部糜烂,外发皮疹,筋骨疼痛,皮肤起核而溃烂,神情痴呆为主要表现的传染病。是中华人民共和国传染病防治法中,列为乙类防治管理的病种。.一、梅毒syphilis第8页,共67页,编辑于2022年,星期六一期梅毒:标志性临床特征是硬下疳,潜伏期24周,外生殖器部位发生暗红色硬肿块、浅溃疡,有软骨样硬度,周围淋巴结肿大。二期梅毒:在一期梅毒12个月之后,全身皮肤、粘膜发生对称泛发皮疹、斑疹、丘疹、脓疱疹等。粘膜可发生粘膜斑、扁平湿疣,传染性强。.第9页,共67页
6、,编辑于2022年,星期六三期梅毒:发生在感染后23年乃至10年,皮肤为树胶样肿,还可涉及骨、关节、心、血管,表现为主动脉炎、主动脉瓣闭锁不全和主动脉瘤等,侵及神经为脊髓痨,全身麻痹。第10页,共67页,编辑于2022年,星期六梅毒流行简况(1)全球每年约有1200万新发病例,主要集中在南亚、东南亚和非洲。于1505年经印度传入我广东,至今已500多年。解放前是中国四大性病之首,60年代初基本被消灭,80年代再次发生和流行。1991年报告病例数为1870例,1995年11336例,1997年33668例。呈明显增多趋势,临床经常可见一、二期梅毒,也已发现三期梅毒和先天梅毒。在义务献血员中发现隐
7、性梅毒。第11页,共67页,编辑于2022年,星期六梅毒流行简况(2)梅毒患者的皮肤、粘膜中含梅毒螺旋体,未患病者在与梅毒患者的性接触中,皮肤或粘膜若有细微破损则可得病。极少数可通过输血或其它途径传染。获得性梅毒(后天)的早期梅毒病人是传染源,95%是通过不洁性交传染,少数通过接吻、握手、输血、接触污染的内衣、湿毛巾、茶杯、烟斗、哺乳、尿布等传染。胎儿梅毒(先天):孕妇体内螺旋体,一般在妊娠34月通过胎盘感染婴儿。第12页,共67页,编辑于2022年,星期六 病因:梅毒螺旋体侵入人体后经过23周潜伏期,即发生皮肤损害(典型损害为硬下疳)这是一期梅毒。发生皮肤损害后机体产生抗体,梅毒初期的组织学
8、特征是单核细胞侵润,在感染的第6天,即有淋巴细胞浸润,此时梅毒螺旋体见于硬下疳中的上皮细胞间隙中,以及位于上皮细胞的内陷或吞噬体内,或成纤维细胞、浆细胞、小的毛细血管内皮细胞之间及淋巴管和局部淋巴结中。由于免疫的作用使梅毒螺旋体迅速地从病灶中消除。感染的第24天后,免疫荧光检测未发现梅毒螺旋体的存在,螺旋体大部分被杀死,进入无症状的潜伏期此即一期潜伏梅毒。第13页,共67页,编辑于2022年,星期六梅毒的暗视野显微镜检查(1)暗视野显微镜检查:是一种检查梅毒螺旋体的方法。暗视野,顾名思义即是显微镜下没有明亮的光线,它便于检查苍白的螺旋体。这是一种病原体检查,对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。早
9、期皮肤粘膜损害(一期、二期)可查到苍白螺旋体。一期梅毒苍白螺旋体多在硬下疳的硬结、溃疡的分泌物和渗出液中存在,肿大的淋巴结穿刺也可检出。二期梅毒苍白螺旋体可在全身血液和组织中检出,但以皮肤检出率最高。早期先天性梅毒,可以通过皮肤或粘膜损害处刮片发现梅毒苍白螺旋体。第14页,共67页,编辑于2022年,星期六基本原理:皮损渗出液、淋巴结穿刺液涂片暗视野显微镜下观察形态,运动方式。暗视野显微镜(darkfieldmicroscope):聚光镜中央有挡光片,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至 4200 nm
10、的微粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。标本采集:皮肤黏膜组织液:带乳胶手套,擦去去污物,钝刀轻刮、挤压,避免出血,取渗出液,预先有生理盐水的载玻片上,加盖玻片。淋巴液:无菌穿刺,注入生理盐水,反复抽吸,取少量淋巴液,滴加至载玻片上,加盖玻片。Generated by Foxit PDF Creator Foxit Softwarehttp:/ For evaluation only.暗视野显微镜检查(2)第15页,共67页,编辑于2022年,星期六操作步骤:加镜油至聚光器上(不要将镜油加载盖玻片上)聚光 镜检结果判读:形态:纤细、白色、有折光、螺旋状 运动方式:旋转、蛇行、伸缩结果报告:阳性
11、:见到上述特征的螺旋体阴性:未见到上述特征的螺旋体.暗视野显微镜检查(3)第16页,共67页,编辑于2022年,星期六.暗视野显微镜检查(4)临床意义:阳性:确诊梅毒 阴性:复检,血清学检查 注意事项:避免出血 及时 对废弃物及时处理,梅毒病原体为苍白螺旋体,对外界抵抗力弱,离体后一般1-2小时内死亡,对干燥和热敏感,但对冷抵抗力较强,低效消毒剂也可将其消灭。第17页,共67页,编辑于2022年,星期六镀银染色法(1)基本原理:梅毒螺旋体亲银性银溶液染色镜下观察。标本采集(同暗视野显微镜检查):皮肤黏膜组织液淋巴液第18页,共67页,编辑于2022年,星期六Generated by Foxit
12、 PDF Creator Foxit Softwarehttp:/ For evaluation only.镀银染色法(2)操作步骤:涂片干燥(空气中自然干燥)固定:罗吉固定液(甲醛,乙酸)23 min洗涤:无水酒精媒染:鞣酸媒染剂,微加热,染30sec,水洗银染:银染液,微加热,染30sec,水洗镜检:油镜第19页,共67页,编辑于2022年,星期六镀银染色法(3)结果判读:棕褐色梅毒螺旋体 结果报告:阳性:见到棕褐色梅毒螺旋体阴性:未见到棕褐色梅毒螺旋体 临床意义:阳性:确诊梅毒阴性:复检,血清学检查 注意事项:与其它螺旋体的鉴别第20页,共67页,编辑于2022年,星期六.第21页,共6
13、7页,编辑于2022年,星期六.梅毒的血清学检测方法 梅毒血清学检查对于诊断二期、三期梅毒,以及判定梅毒的发展和痊愈,判断药物的疗效都有十分重要的意义。梅毒血清学检查包括非梅毒螺旋体抗原血清学试验和梅毒螺旋体抗原血清学试验。前者常用于临床筛选及判定治疗的效果,抽血后1小时即可出结果,费用也低廉。后者主要是用于判定试验,但是它不能判定治疗效果,一旦患有梅毒,这一试验将终身阳性。第22页,共67页,编辑于2022年,星期六.梅毒血清学检测方法的分类 非梅毒螺旋体抗原血清试验 VDRL试验 RPR试验 TRUST试验 梅毒螺旋体抗原血清试验 TPPA试验 TPHA试验 FTA-ABS试验 TP-EL
14、ISA试验 TP-WB试验第23页,共67页,编辑于2022年,星期六Venereal Disease ResearchLaboratory基本原理:梅毒螺旋体感染宿主产生抗类脂抗原的抗体与心磷脂、卵磷脂、胆固醇混合物(抗原)凝集反应标本采集:血清:静脉血25ml,及时离心,保存于28,长期保存于-20。脑脊液:专业人员操作,有血细胞,2000rpm离心。操作步骤:VDRL抗原配制 VDRL玻片定性实验 灭活 吸样 加抗原 反应,低倍显微镜观察.VDRL试验(1)第24页,共67页,编辑于2022年,星期六弱阳性或可疑(滴度),或阴性但有临床症状时需做定量试验(前带现象)VDRL定量试验加稀释
15、液样本稀释:系列稀释加抗原反应凝集反应强度分级:3+4+:中到大絮状物,液体清亮 2+:絮状物较小,液体较清亮 1+:小凝集物,均匀分布,液体浑浊:抗原抗体复合物颗粒稍粗-:抗原颗粒均匀、细小VDRL试验(2)当VDRL定性试验为阳性、结果判读第25页,共67页,编辑于2022年,星期六VDRL试验(3)灭活:血清是在56oC加热30分钟,除去非特异性抑制剂(如补体)。VDRL用于脑脊液的测定:对脑脊液的测定诊断神经梅毒,首选定量VDRL。测试中有一些变化:用等量的10盐水稀释样品,脑脊液不能被加热(或灭活),样品体积为0.01毫升,旋转时间为8分钟。其余的程序同血清。第26页,共67页,编辑
16、于2022年,星期六.VDRL试验(4)结果报告:定性 阳性:1+4+阴性 定量 滴度:最高稀释倍数 临床意义:脑脊液VDRL阳性对神经梅毒有诊断意义。患有其它疾病可能产生假阳性结果,包括一些病毒感染(单核细胞增多,肝炎)、药物、怀孕、风湿热、类风湿关节炎、红斑狼疮、麻风。滴度与病情相关(即滴度下降表明成功的治疗),用于预后判定。第27页,共67页,编辑于2022年,星期六RapidPlasmaReagin(RPR)基本原理:VDRL试验的改良。抗原+活性炭颗粒+抗体黑色絮状物(肉眼可见)。反应素:Tp(梅毒病毒)侵入人体破坏组织后,组织中的磷脂粘附于螺旋体表面形成复合抗原。从而使机体产生抗磷
17、脂的自身抗体,这种抗体称为反应素。标本采集:血清:新鲜分离或冻存 血浆:各种抗凝剂操作步骤:定性实验 加样 加抗原 反应 RPR试验(1)第28页,共67页,编辑于2022年,星期六RPR试验(2)定量实验 稀释液准备 加样:系列稀释 加抗原 反应(旋转8min)结果判读凝集反应强度分级:3+4+:中到大黑色絮状物,液体清亮 2+:黑色絮状物小到中,液体较清亮 1+:小黑色凝集物,液体浑浊 -:碳颗粒集中于中央一点或均匀分散第29页,共67页,编辑于2022年,星期六RPR试验(3)结果报告:定性 阳性:1+4+阴性 定量 滴度:最高稀释倍数 临床意义:比VDRL简便(血清不需灭活,加有氯化胆
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