高考生物大一轮复习 细胞融合技术 干细胞工程 克隆技术 中图版选修精选文档.ppt
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1、高考生物大一轮复习 细胞融合技术 干细胞工程 克隆技术课件 中图版选修本讲稿第一页,共四十八页第三节细胞融合技术第四节干细胞工程第五节克隆技术本讲稿第二页,共四十八页【考纲考情考纲考情】最新考纲及要求三年考情(以山东高考卷为例)2014年2013年2012年动物体细胞克隆无T35非选择题T35非选择题细胞融合与单克隆抗体无无无胚胎干细胞的移植T36非选择题T35非选择题无本讲稿第三页,共四十八页【知识梳理知识梳理】考点一考点一 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体1.1.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较:植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较:比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细
2、胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理先除去细胞壁先使细胞分散开使用的酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶本讲稿第四页,共四十八页比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合诱导手段物理法:离心、电激、振动化学法:聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外,也可用灭活的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞应用培育植物新品种主要用于制备单克隆抗体意义突破远源杂交不亲和的障碍,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合相同点原生质体融合原理相同,原生质体融合的方法相似本讲稿第五页,共四十八页2.2.单克隆抗体的制备:单克隆抗体的制备:(1)(1)取相应取相应B B淋巴细胞前必须先注射相应抗原蛋白,否则不能获得单克隆
3、抗淋巴细胞前必须先注射相应抗原蛋白,否则不能获得单克隆抗体。体。(2)(2)细胞融合后需经二次筛选。细胞融合后需经二次筛选。第一次:在特定的选择性培养基上,未融合的亲本细胞第一次:在特定的选择性培养基上,未融合的亲本细胞(B(B淋巴细胞淋巴细胞和骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞和融合的具有同种核的细胞(BB(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡,只有融合的杂交细胞都会死亡,只有融合的杂交细胞(杂交瘤细胞杂交瘤细胞)才能生长。这种杂交细胞的特才能生长。这种杂交细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生单一的特异性抗体。点是既能迅速大量繁殖,又能产生单一的特异性抗
4、体。本讲稿第六页,共四十八页第二次:经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞第二次:经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞(很很多种杂交瘤细胞多种杂交瘤细胞),需经克隆化培养和抗体检测,经筛选后才可获得足够,需经克隆化培养和抗体检测,经筛选后才可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。数量的能分泌所需抗体的细胞。本讲稿第七页,共四十八页【高考警示高考警示】(1)(1)植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同,纤维素酶和果胶酶作用植物体细胞杂交与动物细胞融合中酶的作用对象不同,纤维素酶和果胶酶作用于细胞壁,而胰蛋白酶等作用于细胞间的蛋白质。于细胞壁,而胰蛋白酶等作用于
5、细胞间的蛋白质。(2)(2)灭活的病毒保持了其抗原性,但毒性消失。灭活的病毒保持了其抗原性,但毒性消失。(3)(3)植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性,但动物杂交细胞的全能性植物杂交细胞在激素诱导下能表达出全能性,但动物杂交细胞的全能性不能表达。不能表达。本讲稿第八页,共四十八页考点二考点二 干细胞干细胞1.1.种类:种类:类别来源或举例特点全能干细胞受精卵能发育成完整个体多能干细胞骨髓的造血干细胞能分化出动物的多种组织细胞专能干细胞神经干细胞分化出特定的组织本讲稿第九页,共四十八页2.2.比较三种造血干细胞移植的优点和缺点:比较三种造血干细胞移植的优点和缺点:优点缺点骨髓移植是经典的移植
6、方法,效果可靠寻找配型相同的骨髓难,捐献者和患者都要遭受很大的痛苦外周血干细胞移植方法比较简单,对供者安全,影响小,几乎无不适反应外周血干细胞数量采集困难,不能满足移植所需数量;收集的外周血干细胞可能混杂有肿瘤细胞;费用较高脐带血干细胞移植脐带血资源丰富、采集简单;异体间排斥反应小,再生能力强;纯度高;配型相合的要求相对较低,可扩大供者范围;成功率高目前不适用于高体重成人,另外,血小板恢复较慢本讲稿第十页,共四十八页考点三考点三 克隆技术克隆技术1.1.克隆羊克隆羊“多利多利”的培育过程:的培育过程:本讲稿第十一页,共四十八页2.2.克隆动物:克隆动物:(1)(1)性状不完全与供体相同的原因。
7、性状不完全与供体相同的原因。克隆动物的细胞质遗传物质来自受体卵母细胞的细胞质。克隆动物的细胞质遗传物质来自受体卵母细胞的细胞质。生物的性状不仅与遗传物质有关,还受环境的影响。生物的性状不仅与遗传物质有关,还受环境的影响。(2)(2)基因型与供体相同:核移植过程中细胞核只来自供体,因此核遗传基因型与供体相同:核移植过程中细胞核只来自供体,因此核遗传物质是对供体核遗传物质的物质是对供体核遗传物质的100%100%复制,其基因型与供体相同。复制,其基因型与供体相同。(3)(3)克隆技术是一种无性繁殖技术。克隆技术是一种无性繁殖技术。本讲稿第十二页,共四十八页【高考警示高考警示】(1)(1)克隆动物的
8、遗传物质的来源:克隆动物具备两个生物的遗传特性。核克隆动物的遗传物质的来源:克隆动物具备两个生物的遗传特性。核遗传物质来源于供核细胞,细胞质遗传物质来源于提供细胞质的细胞。遗传物质来源于供核细胞,细胞质遗传物质来源于提供细胞质的细胞。(2)(2)在进行核移植时,受体细胞去核的原因:保证克隆动物的遗传物质在进行核移植时,受体细胞去核的原因:保证克隆动物的遗传物质最大程度地来自有重要利用价值的动物最大程度地来自有重要利用价值的动物(供核动物供核动物)。本讲稿第十三页,共四十八页类型一类型一 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体【典例典例1 1】(2014(2014新课标全国卷新课标全国
9、卷)某研究者用抗原某研究者用抗原(A)(A)分别免疫分别免疫3 3只同种小鼠只同种小鼠(X(X、Y Y和和Z)Z),每只小鼠免疫,每只小鼠免疫5 5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如图所示。若要制备杂交瘤细胞,结果如图所示。若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的需取免疫后小鼠的B B淋巴细胞淋巴细胞(染色体数目染色体数目4040条条),并将该细胞与体外培养的小,并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞鼠骨髓瘤细胞(染色体数目染色体数目6060条条)按一定比例加入试
10、管中,再加入聚乙二醇诱导细按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A A抗体的杂交瘤细胞。抗体的杂交瘤细胞。本讲稿第十四页,共四十八页回答下列问题:回答下列问题:(1)(1)制备融合所需的制备融合所需的B B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到到16 00016 000以上,则小鼠最少需要经过以上,则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的合要求的。达到要求后的X X、Y Y、Z Z这这3 3只免疫小鼠中,最适合用于制备只免
11、疫小鼠中,最适合用于制备B B淋巴细胞的是淋巴细胞的是_小鼠,理由是小鼠,理由是_。本讲稿第十五页,共四十八页(2)(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有瘤细胞外,可能还有_,体系中出现多种类型细胞的原,体系中出现多种类型细胞的原因是因是_。(3)(3)杂交瘤细胞中有杂交瘤细胞中有_个细胞核,染色体数目最多是个细胞核,染色体数目最多是_条。条。(4)(4)未融合的未融合的B B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是_。本讲稿第十六页,共四十八页【解题指南解
12、题指南】(1)(1)题干关键词:题干关键词:“效价效价”“”“杂交瘤细胞杂交瘤细胞”“”“传代培养传代培养”。(2)(2)隐含信息:柱形图中效价越高,能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释隐含信息:柱形图中效价越高,能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数越大,说明免疫后小鼠的倍数越大,说明免疫后小鼠的B B淋巴细胞产生抗体的能力越强。淋巴细胞产生抗体的能力越强。(3)(3)关键知识:制备单克隆抗体的技术流程和动物细胞体外培养的过程。关键知识:制备单克隆抗体的技术流程和动物细胞体外培养的过程。本讲稿第十七页,共四十八页【解析解析】本题考查制备单克隆抗体的相关知识。本题考查制备单克隆抗体的相关知识。(
13、1)(1)据图中数据分析,第四次注射后据图中数据分析,第四次注射后Y Y、Z Z小鼠的血清抗体效价均达到小鼠的血清抗体效价均达到16 00016 000以上,以上,免疫后小鼠免疫后小鼠Y Y的的B B淋巴细胞产生抗体效价最高,最适用于制备单克隆抗体。淋巴细胞产生抗体效价最高,最适用于制备单克隆抗体。(2)B(2)B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合在一起融合时,可能发生淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合在一起融合时,可能发生B B淋巴细胞之间的融合,淋巴细胞之间的融合,骨髓瘤细胞之间的融合和骨髓瘤细胞之间的融合和B B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,故体系中会出现淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,故体系中会出现多种类型的细胞。
14、多种类型的细胞。本讲稿第十八页,共四十八页(3)(3)杂交瘤细胞形成后,小鼠的杂交瘤细胞形成后,小鼠的B B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个细胞核。染色体可达细胞核。染色体可达100100条,有丝分裂后期染色体数目最多为条,有丝分裂后期染色体数目最多为200200条。条。(4)(4)未融合的未融合的B B淋巴细胞经多次传代培养后,仍然不是能恶性增殖的细胞,分淋巴细胞经多次传代培养后,仍然不是能恶性增殖的细胞,分裂次数是有限的。裂次数是有限的。本讲稿第十九页,共四十八页答案:答案:(1)(1)四四Y YY Y小鼠的抗体效价最高小鼠的抗体效价最高(2
15、)B(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞,骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是淋巴细胞相互融合形成的细胞,骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的,没有特异性且融合率达不到随机的,没有特异性且融合率达不到100%100%(3)1(3)1200200(4)(4)不能无限增殖不能无限增殖本讲稿第二十页,共四十八页【典例典例2 2】如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图,据图回答下列问题:如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图,据图回答下列问题:本讲稿第二十一页,共四十八页(1)(1)图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后,所获得的免疫抗图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后,所获得的免
16、疫抗血清实际上是含有血清实际上是含有_(_(填写抗体的名称填写抗体的名称)的混合物,的混合物,这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低、而且纯度低。与多克隆抗这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低、而且纯度低。与多克隆抗体相比,单克隆抗体突出的优点在于它的体相比,单克隆抗体突出的优点在于它的_,并能,并能大量制备。大量制备。(2)(2)图中选用图中选用B B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,说明细胞淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,说明细胞膜具有膜具有_,如果仅考虑细胞的两两融合,其融合细胞有,如果仅考虑细胞的两两融合,其融合细胞有_种类型。种类型。本讲稿第二十二页,共四十八页(3)(3)图中两
17、次筛选的目的不同,其中筛选图中两次筛选的目的不同,其中筛选的目的是筛选出的目的是筛选出_,筛选,筛选的目的是筛选出的目的是筛选出_。筛选时所用的培养基是特定的筛选时所用的培养基是特定的_培养基。培养基。(4)(4)科学工作者正在研究的用于治疗癌症的科学工作者正在研究的用于治疗癌症的“生物导弹生物导弹”就是就是_。用。用“生物导弹生物导弹”治疗癌症的方法优于化疗的原因是治疗癌症的方法优于化疗的原因是_。本讲稿第二十三页,共四十八页【解析解析】(1)(1)结合题图可看出获得的免疫抗血清实际上是结合题图可看出获得的免疫抗血清实际上是Ab1Ab1、Ab2Ab2、Ab3Ab3、Ab4Ab4多种抗体的混合
18、物,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的优点,还能多种抗体的混合物,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的优点,还能大量制备。大量制备。(2)(2)动物细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性;仅考虑两个细胞的融合,动物细胞融合的过程体现了细胞膜的流动性;仅考虑两个细胞的融合,可得到可得到B B淋巴细胞淋巴细胞+B+B淋巴细胞、瘤细胞淋巴细胞、瘤细胞+瘤细胞及瘤细胞及B B淋巴细胞淋巴细胞+瘤细胞瘤细胞3 3种类型种类型的融合细胞。的融合细胞。本讲稿第二十四页,共四十八页(3)(3)在单克隆抗体的制备过程中,筛选在单克隆抗体的制备过程中,筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞,筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞,筛选的的
19、目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。筛选时所用的培养基是特定的选择目的是获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。筛选时所用的培养基是特定的选择性培养基。性培养基。(4)(4)把单克隆抗体跟抗癌药物相结合制成把单克隆抗体跟抗癌药物相结合制成“生物导弹生物导弹”,注入患者体内,借,注入患者体内,借助单克隆抗体的导向作用,能将药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌助单克隆抗体的导向作用,能将药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞。这样既不损伤正常细胞,又减小了用药剂量,而且疗效高、毒副作用小。细胞。这样既不损伤正常细胞,又减小了用药剂量,而且疗效高、毒副作用小。本讲稿第二十五页,共四十八页答案:答
20、案:(1)Ab1(1)Ab1、Ab2Ab2、Ab3Ab3、Ab4Ab4特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高(2)(2)流动性流动性3 3(3)(3)杂交瘤细胞能产生所需抗体的杂交瘤细胞选择性杂交瘤细胞能产生所需抗体的杂交瘤细胞选择性(4)(4)单克隆抗体上连接抗癌药物可以原位杀死癌细胞,还不损伤正常细胞,单克隆抗体上连接抗癌药物可以原位杀死癌细胞,还不损伤正常细胞,且用药剂量小,疗效高、毒副作用小且用药剂量小,疗效高、毒副作用小本讲稿第二十六页,共四十八页类型二类型二 干细胞工程干细胞工程【典例典例3 3】(2015(2015东营模拟东营模拟)下图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示下图为哺乳动
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