乳品检验员培训包 高级技师.docx

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1、天津市“职业培训包”乳品检验员培训包标准包一高级技师（2018年1月第1版）开发单位：天津职业大学主管单位：天津市人力资源和社会保障局的开展；有助于提高全社会道德水平。1-1-4我国职业道德基本规范：爱岗敬业、忠于职守；遵纪守法、老实守信；和睦相处、团结协作；服务群众、奉献社会；勇于竞争、不断创 新。1-2乳品检验工职业守那么：科学求实、公正公平、严守秘密；秉公执法、工作认真、程序规范；遵章守纪、忠于职守、爱岗敬业。1-3相关法律知识（1）食品卫生法；（2）产品质量法；（3）计量法；（4）标准化法。2-1实验室平安知识（1）实验室平安操作知识；（2）电工基础知识；（3）实验室用电常识；2-2计

2、量基础知识法定计量单位的要领和常用量的法定计量单位；（2）测量误差和数据处理2-3乳品检验员高级技师基本知识（详见上表）1.3乳品检验员高级技师资格单元要素和实作指标适用范围汇总表乳品检验工（TJB6260108）高级技师资格（1） J培训包培训标准能力单元要素和实作指标适用范围汇总表职业功能 （模块）工作内容 （能力单元）适用范围实作对象工作标准工具材料场所环境1理化工程 检验1-1 （1）婴幼儿乳品中牛磺酸的测定（基 础模块）第一法OPA柱后衍生法婴幼儿乳品GB 5413.262010食品平安国家标准 婴幼儿食品和乳品中牛磺酸的测定高效液相色谱仪、柱后反响 器、荧光衍生溶剂输液泵、 超声波

3、振荡器、pH计、离 心机、微孔滤膜、天平普通乳品分 析实验室1-1 （2）婴幼儿乳品中牛磺酸的测定（基 础模块）第二法单磺酰氯柱前衍生法婴幼儿乳品GB 5413.262010食品平安国家标准 婴幼儿食品和乳品中牛磺酸的测定高效液相色谱仪、pH计、 涡旋混合器、超声波振荡 器、离心机、微孔滤膜、天 平普通乳品分 析实验室1-2婴幼儿乳品中反式脂肪酸的测定（基 础模块）婴幼儿乳品GB 5413.362010食品平安国家标准 婴幼儿食品和乳品中反式脂肪酸的测 定气相色谱仪、旋转蒸发器、 恒温水浴、涡旋振荡器、离 心机、毛氏抽脂瓶、脂肪收 集瓶、天平普通乳品分 析实验室1-3（1）乳和乳制品中黄曲霉毒

4、素Ml的 测定（行业模块）第一法 免疫亲和层析 净化液相色谱一串联质谱法乳和乳制品GB 5413.372010食品平安国家标 准乳和乳制品中黄曲霉毒素Ml的测 定液相色谱-质谱联用仪、天 平、匀浆器、超声波清洗器、 离心机、pH计、免疫亲和柱、 固相萃取装置普通乳品分 析实验室1-3（2）乳和乳制品中黄曲霉毒素Ml的 测定（行业模块）第二法免疫亲和层析乳和乳制品GB 5413.372010食品平安国家标 准乳和乳制品中黄曲霉毒素Ml的测真空系统、离心机、高效液 相色谱仪、紫外分光光度普通乳品分 析实验室净化高效液相色谱法定计、天平1-3(3)乳和乳制品中黄曲霉毒素Ml的 测定(行业模块)第三法

5、免疫层析净化 荧光分光度法乳和乳制品GB 5413.372010食品平安国家标 准乳和乳制品中黄曲霉毒素Ml的测 定荧光光度计、离心机、玻璃 纤维滤纸、黄曲霉毒素皿 免疫亲利柱、空气压力泵普通乳品分 析实验室1-3(4)乳和乳制品中黄曲霉毒素Ml的 测定(行业模块)第四法双流向酶联免 疫法乳和乳制品GB 5413.372010食品平安国家标 准 乳和乳制品中黄曲霉毒素Ml的测 定样品试管、移液器、酶联免 疫检测加热器、双流向酶联 免疫检测读数仪普通乳品分 析实验室1-4(1)食品中硒的测定(扩展模块) 第一法氢化物原子荧光光谱法乳和乳制品GB 5009.93201()食品平安国家标准 食品中硒

6、的测定原子荧光光谱仪、电热板、 微波消解系统、天平、粉碎 机、烘箱普通乳品分 析实验室1-4 (2)食品中硒的测定(扩展模块) 第二法荧光法乳和乳制品GB 5009.932010食品平安国家标准 食品中硒的测定荧光分光光度计、天平、烘 箱、粉碎机、电热板、水浴 锅普通乳品分 析实验室1-5乳和乳制品中苯甲酸和山梨酸的测 定(基础模块)乳和乳制品GB 217032010食品平安国家标准 乳和乳制品中苯甲酸和山梨酸的测定高效液相色谱仪、天平普通乳品分 析实验室2高级技师职业资格培训包培训标准乳品检验员（TJB6260108）高级技师资格（1）培训标准乳品检验员能力单元要素和实作指标细目职业功能 （

7、模块）工作内容 （能力单元）能力单元要素（阐述能力单元基本学习 目标包括职业知识、职业 技能、职业道德）实作指标（确定能力要素的技术水平）1理化工程 检验1-1 （1）婴幼儿乳 品中牛磺酸的测定 （基础模块）第一法OPA柱后衍生 法1-1-1试样的处理1-1-1-1准确称取固体样品1g5 g试样，液体样品5 g20 g （精确至0.01g,试样中含牛 磺酸5 ng以上），加30mL偏磷酸溶液（412）溶解，充分摇匀，移入100 mL容量瓶。 1-1-1-2放入超声波振荡器中振荡1（） min15 min,取出冷却至室温后，用水定容至刻度。1-1-1-3样液在5000转/分钟条件下离心10 mi

8、n,取上清液经0.45 u m微孔膜（5.7）过滤， 接取中间滤液以备进样。1-1-2试样的测定1-1-2-1参考色谱条件为：色谱柱：钠离子氨基酸分析专用柱（250 mmX4.6 mm）或同等 性能的色谱柱；流动相：柠檬酸缓冲液（4.13）；流动相流速：0.30 mL/min；荧光衍生溶 剂流速：0.30 mL/min；柱温：55 ；检测波长：激发波长：338 nm,发射波长：425 nm； 进样量：20 uLo1-1-2-2将牛磺酸标准系列工作液依次经衍生后按上述推荐色谱条件上机测定，记录色谱峰 面积。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。1-1-2-3将试液按上述推荐色谱条件上机测

9、定，从标准曲线中查得试液相应的浓度。1-1-3结果与分析1-1-3-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保存三位有效数 字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %。1-1 （2）婴幼儿乳 品中牛磺酸的测定 （基础模块）第二 法单磺酰氯柱前 衍生法1-1-1试样的处理称取固体样品1 g5 g,液体样品5 g30 g试样（精确至0.01 g,假设用紫外检测 器，试样中含牛磷酸宜在1 Ug以上，假设用荧光检测器，试样中含牛磺酸宜在5（） Mg以 上）于100 mL容量瓶中，加入8（） mL温水（5（） 60 ）溶解，充分混匀，置超声波 振荡

10、器上振荡10 min,冷却到室温。力口 1.0 mL沉淀剂I ,涡旋混合，1.0 mL沉淀剂H,涡旋混合，用水定容至刻度， 充分混匀，试液于5000转/分钟下离心10 min,取上清液备用。上清液在4 c暗处保存 放置24h稳定。1-1-1-3吸取1.00 mL上述上清液到10 mL具塞玻璃试管中，加入1.00 mL碳酸钠缓冲液， 1.00 mL丹磺酰氯溶液，充分混合,室温避光衍生反响2 h （1 h后需摇晃1次），加入0.10 mL盐酸甲胺溶液涡旋混合，以终止反响，避光静置至沉淀完全。1-1J-4取上清液经0.45 um微孔滤膜过滤，取滤液备用。衍生物在4 C可避光保存48 h。 1-1-1

11、-5另取1.00 mL标准工作液，与试液同步进行衍生。1-1-2试样的测定参考色谱条件为：色谱柱：C18反相色谱柱（粒径5 Rm, 250 mmX4.6 mm）或 同等性能色谱柱；流动相：10 mmol/L乙酸钠缓冲液（10.16）一乙月青（10.1） =70+30； 流速：l.OOmL/min；柱温：室温；检测波长:紫外检测器或二极管阵列检测器:254nm； 或荧光检测器：激发波长：330 nm；发射波长：530nm；进样量：20 u L。1-1-2-2将牛磺酸标准系列工作液（紫外检测用）（10.17.2）或牛磺酸标准系列工作液（荧 光检测用）（10.17.3）的衍生物依次按上述推荐色谱条件

12、上机测定，记录色谱峰面积，色 谱图参见附录A。以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。1-1-2-3将试液衍生物按上述推荐色谱条件上机测定，从标准曲线中查得试液相应的浓度。1-1-3结果与分析1-1-3-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保存三位有效数 字。1-1-3-2在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。1-2婴幼儿乳品中 反式脂肪酸的测定 (基础模块)1-2/试样的处理1-2-1-1称取混合均匀的固体试样约1.5 g,液体试样约5 g (精确到0.1 mg)于毛氏抽脂瓶 中，加入约().1 g淀粉酶(酶活力1.5 U/m

13、g),混合均匀后，加入8 mL10mL45 2 的水，摇匀。1-2-1-2盖上瓶塞置于55 2 C水浴中2h,每隔lOmin摇混一次。加入两滴约0.1 mol/L 的碘溶液，检验淀粉是否水解完全。假设无蓝色出现，那么水解完全，否那么将毛氏抽脂瓶重新 置于水浴中，直至蓝色消失，取出冷却至室温。1-2-1-3称取混合均匀的固体试样约1.5 g,液体试样约10g (精确到0.1 mg)于毛氏抽脂瓶 中，加入10 mL 45 2 C的水，将试样洗入毛氏抽脂瓶的小球中，充分混合，直到试 样完全散开，冷却至室温。向毛氏抽脂瓶中加入3.() mL氨水，混匀。1-2-1-4置于60 2 水浴中15 min20

14、 min,冷却至室温。加入1() mL乙醇和1滴 刚果红溶液，混匀。再加入25mL乙醛，塞上软木塞，放到毛氏抽脂瓶摇混器上震荡1 min, 也可采用手动振摇方式，再加入25mL石油酸，震荡1 min,不低于4000转/分钟离心分 层。1-2-14倾出上清液于脂肪收集瓶中，为第一次提取。在剩余试样液中再加入5 mL乙醇， 25 mL乙醛，25 mL石油麟按上述操作步骤进行第二次提取。1-2-1-6用离心机离心分层后倾出上清液与第一次的上清液合并。将脂肪收集瓶置于旋转蒸 发器上，在60 C 2 通入氮气条件下旋转蒸发除去溶剂，保存残渣，即为脂肪。1-2-1-7将上述脂肪用正己烷溶解并定容至10.(

15、) mL,取出3.() mL于1() mL具塞试管中， 加入0.3 mL氢氧化钾-甲醇溶液。盖紧瓶盖，涡旋振荡器上剧烈振摇2 min, 4000转/分钟 离心5 min后将上清液转入气相色谱试样瓶中，此为试样测定液。1-2-2试样的测定参考色谱条件为：色谱柱：填料为氧丙基芳基聚硅氧烷的毛细管柱，柱长100 m, 内径0.25 mm,膜厚0.2 u m；进样口温度：250 ；载气(N2)；检测器温度：300 。 分流比：10： 1；进样量：1.0 UL；程序升温。1-2-2-2在仪器最正确工作条件下，对系列标准工作液分别进样，以峰面积为纵坐标，标准工 作液浓度为横坐标绘制标准工作曲线。1-2-2

16、-3对脂肪酸甲酯标准混合溶液进样，进行顺反脂肪酸甲酯别离程度及定性的鉴定。反十八碳一烯酸甲酯和反十八碳二烯酸甲酯色谱峰的位置参见附录A中的图A.1。1-2-2-4将试样测定液注入气相色谱仪。分别测定区域C18： It和区域C18： 2t的峰面积， 查标准曲线得到试样测定液中反十八碳一烯酸甲酯和反十八碳二烯酸甲酯的质量浓度。1-2-3结果与分析1-2-3-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保存三位有效数 字。1-2-3-2在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %o1-3 (1)乳和乳制 品中黄曲霉毒素 Ml的测定(行业 模块)第一法免疫

17、 亲和层析净化液 相色谱一串联质谱 法1-3-1试液提取1-3-1-1 ?L：称取50 g(精确至0.01 g)混匀的试样,置于50 mL具塞离心管中,在水浴中加 热到35c37 o在6000转/分钟下离心15 min。收集全部上清液，供净化用。1-3-1-2发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型)：称取50 g(精确至0.01g)混匀的试样， 用0.5mol/L的氢氧化钠溶液在酸度计指示下调pH至7.4,在9500转/分钟下匀浆5 min。 1-3-1-3乳粉和粉状婴幼儿配方食品：称取10g(精确至().()lg)试样，置于250mL烧杯中。 将5()mL已预热到5() 的水加入到乳粉中，用

18、玻璃棒将其混合均匀。如果乳粉仍未完全 溶解,将烧杯置于50的水浴(5.8)中放置30 min。溶解后冷却至2() C,移入100 mL容 量瓶中，用少量的水分次洗涤烧杯，洗涤液一并移入容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀后 分别移至两个50 mL离心管(5.7)中，在6000转/分钟下离心15 min,混合上清液，用移液 管移取50mL上清液供净化处理用。1-3-1-4干酪：称取经切细、过10目圆孔筛混匀的试样5g(精确至0.01 g),置于50 mL离 心管中，加2 mL水和30 mL甲醇，在9500转/分钟下匀浆5 min,超声提取30 min,在 6000转/分钟下离心15 mino收集上清液

19、并移入250 mL分液漏斗中。在分液漏斗中加入 30 mL石油酸，振摇2 min,待分层后，将下层移于50 mL烧杯中，弃去石油酸层。重复 用石油酸提取2次。将下层溶液移到l()0mL圆底烧瓶中，减压浓缩至约2 mL,浓缩液倒 入离心管中，烧瓶用乙厝-水溶液(1+4)5 mL分2次洗涤，洗涤液一并倒入50 mL离心管中， 加水稀释至约50 mL,在6000转/分钟下离心5 min,上清液供净化处理。1-3-L5奶油：称取5g(精确至0.01g)试样,置于50mL烧杯中,用20mL石油酸将其溶解 并移于250mL具塞锥形瓶中。加20 mL水和30 mL甲醇，振荡30 min后，将全部液体移 于分

20、液漏斗中，待分层后，将下层溶液全部移到100 mL圆底烧瓶中，在旋转蒸发仪中减压浓缩至约5 mL,加水稀释至约50mL,供净化处理。1-3-2净化1-3-2-1将一次性的50 mL注射器筒与亲和柱上顶部相串联，再将亲和柱与固相萃取装置连 接起来。根据免疫亲和柱的使用说明书要求，控制试液的pH值。1-3-2-2将试液提取液移至5（） mL注射器筒中，调节固相萃取装置的真空系统，控制试样以 2mL/分钟3 mL/分钟稳定的流速过柱。1323取下50mL的注射器筒，装上10mL注射器筒。注射器筒内加入水，以稳定的流 速洗柱，然后，抽干亲和柱。1-3-2-4脱开真空系统，在亲和柱下部放入10 mL刻度

21、试管，上部装上另一个10 mL注射 器筒，加入4 mL乙脂，洗脱黄曲霉毒素Ml,洗脱液收集在刻度试管中中，洗脱时间不少 于60秒。1-3-2-5然后用氮气缓缓地在3（） C下将洗脱液蒸发至近干（如果蒸发至干，会损失黄曲霉 毒素Ml ）,用乙月青-水溶液（1+9）稀释至1 mLo1-33仪器参考条件1-3-3-1液相色谱参考条件为：流动相：A液，0.1%甲酸溶液；B液，乙盾-甲醇溶液（1 + 1）； 流动相流动速度：0.3mL/min；柱温：35 ；试液温度：20 ；进样量：10 u L。1332质谱参考条件为：检测方式：多离子反响监测（MRM）,详见表中母离子、子离子 和碰撞能量。1-3-4测

22、定1-3-4-1试样中黄曲霉毒素Ml色谱峰的保存时间与相应标准色谱峰的保存时间相比拟，变 化范围应在2.5%之内。1-3-4-2黄曲霉毒素Ml的定性离子的重构离子色谱峰的信噪比应大于等于3 （S/N23）, 定量离子的重构离子色谱峰的信噪比应大于等于10（S/N21（）。每种化合物的质谱定性离 子必须出现，至少应包括一个母离子和两个子离子，而且同一检测批次，对同一化合物， 样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度比与浓度相当的标准溶液相比，其允许偏差不 超规定的范围。1-3-4-3各检测目标化合物以保存时间和两对离子（特征离子对/定量离子对）所对应的LC-MS/MS色谱峰面积相对丰度进行定性。要

23、求被测试样中目标化合物的保存时间与标准 溶液中目标化合物的保存时间一致（一致的条件是偏差小于20%）,同时要求被测试样中 目标化合物的两对离子对应LC-MS/MS色谱峰面积比与标准溶液中目标化合物的面积比 一致。1-3-4-4按照6.3和6.4确立的条件，测定试液和标准系列溶液中黄曲霉毒素M1的离子 强度，外标法定量。色谱参考保存时间：黄曲霉毒素Ml 3.23 min。1-3-4-5不称取试样，做空白实验。应确认不含有干扰被测组分的物质。1-3-4-6将标准系列溶液由低到高浓度进样检测，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归 方程。1-3-4-7待测样液中被测组分的响应值应在标准曲线线性范围内，

24、超过线性范围时，那么应将 样液用空白基质溶液稀释后重新进样分析或减少取样量，重新进行处理后再进样分析。1-3-5结果与分析1-3-5-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保存三位有效数 字。1-3-5-2在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。1-3 （2）乳和乳制 品中黄曲霉毒素 Ml的测定（行业 模块）第二法免疫 亲和层析净化高效 液相色谱法1-3-1试样制备1-3-1-1乳：将试样在水浴中加热到3537C。用滤纸过滤（根据情况，可以使用多层 滤纸进行过滤），或者在7000转/分钟离心15 min。至少收集50 mL试样，按照4.4

25、继续 操作。乳粉：称取10 g样品（精确到0.1g）,置于250 mL的烧杯中。将50 mL已预热到 50C的水屡次少量地加入到乳粉中，用搅拌棒将其混合均匀。如果乳粉不能完全溶解，将 烧杯在50的水浴中放置至少30 min,仔细混匀。将溶解的乳粉冷却至20后，移入100 mL 容量瓶中，用少量的水分次淋洗烧杯，淋洗液一并移入容量瓶中，再用水定容至刻度。用 滤纸过滤乳，或者在7000转/分钟下离心15 min。至少收集50 mL的乳试样,按照12.4继 续进行分析。发酵乳：按照“第一法”中的前处理方法进行。干酪：按照“第一法”中的前处理方法进行。1-3-1-5奶油：按照“第一法”中的前处理方法进

26、行。1 -3-2免疫亲和柱的准备1-3-2-1将一次性的50 mL注射器筒与亲和柱的顶部相连，再将亲和柱与真空系统连接起 来。1-3-3试样的提取与纯化1-3-3-1用移液管移取5() mL试样到50 mL注射器中，调节真空系统，控制试样以2 mL/min3 mL/min稳定的流速过柱。1-3-3-2取下5() mL的注射器，装上1() mL注射器。注射器内加入10 mL水，以稳定的流 速洗柱，然后，抽干亲和柱。脱开真空系统，装上另一个10 mL注射器，加入4 mL乙懵。 1-3-33缓缓推动注射器栓塞，通过柱塞控制流速，洗脱黄曲霉毒素Ml,洗脱液收集在徘 形管中，洗脱时间不少于60s。1-3

27、-3-4然后用和缓的氮气在30 c下将洗脱液蒸发至体积为50 UL500 uL(如果蒸发至 干，会损失黄曲霉毒素Ml)。1-3-3-5再用水稀释10倍至最终体积为Vf(即500 u L5000 u L)。1-3-4高效液相色谱分析1-3-4-1高效液相色谱分析:色谱柱：C18,长25cm,内径4.6mm；流动相：25 %乙廉水溶 液；流速：1 mL/min。1-3-4-2根据高效液相色谱仪进样环容积，选择适当进样体积数Vi,分别注入含有0.05 ng、 0.1 ng、0.2 ng和0.4 ng的黄曲霉毒素MI标准溶液。绘制成峰面积或峰高对黄曲霉毒素 Ml质量的标准曲线。1-3-4-3根据样品洗

28、脱液色谱图中黄曲霉毒素Ml的峰高或峰面积值,从标准曲线上得出样 品洗脱液中所含有的黄曲霉毒素Ml质量数(ng)。1-3-4-4如果样品洗脱液的黄曲霉毒素Ml的峰面积或峰高值高于标准曲线范围，用水定容 稀释样品洗脱液后，重新进样分析。1-3-5结果与分析1-3-5-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保存三位有效数 字。1-3-5-2在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %01-3 (3)乳和乳制 品中黄曲霉毒素 Ml的测定(行业1-3-1试样提取1-33-1乳:取50.0 mL试样，加入1.0 g氯化钠，7000转/分钟下离心10 mi

29、n,小心移取 用于分析的乳底脱脂层，不要碰触顶部脂肪层，将脱脂的乳以玻璃纤维滤纸过滤，滤液备 用。天津市“职业培训包”乳品检验员培训包 标准包一高级技师 （2018年1月第1版）开发单位：天津市职业大学合作开发单位：天津香飘飘食品工业 主管单位：天津市人力资源和社会保障局模块)第三法免疫 层析净化荧光分光 度法1-3-1-2乳粉：称取5 g试样(精确至0.01 g),用30 60 水将其慢慢溶解，定容至50 mL,加入1.0g氯化钠，以下按18.2的步骤操作。1-3-2净化1-3-2-1将免疫亲和柱连接于10 mL玻璃注射器下。1-3-2-2准确移取10.0 mL上述滤液注入玻璃注射器中，将空

30、气压力泵与注射器连接，调节 压力使溶液以约6 mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2 mL3 mL空气通过柱体。1-3-2-3以10 mL甲醇-水(1+9)清洗柱子两次，弃去全部流出液，并使2 mL3 mL空气通 过柱体。L3-2-4准确加入l.OmL(Vl)甲醇-水(8十2)洗脱液洗脱，流速为1 mL/min2 mL/min,收 集全部甲醇-水洗脱液于玻璃试管中，备用。1-3-3测定1-3-3-1在激发波长360 nm,发射波长450 nm条件下，以0.05 mol/L的硫酸溶液为空白， 调节荧光光度计的读数值为().()ug/L；以荧光光度计校准溶液调节荧光光度计的读数值 2.0 ug

31、/Lo1-3-3-2取上述洗脱液加入1.()011(丫)0.()02%澳溶液，1 min后立即于荧光光度计测定样液 中黄曲霉毒素Ml含量cl。1333用水代替试样，做空白试验。1_3-4结果与分析1-3-4-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保存三位有效数 字。1-3-4-2在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %。1-3 (4)乳和乳制 品中黄曲霉毒素 Ml的测定(行业 模块)第四法双流 向酶联免疫法1-3-1试样的测定1-3-1-1加热器预热到45 5 ,并至少保持15 min。1-3-1-2液体试样或乳粉试样复原后振摇混匀，移取

32、45() UL至样品试管中，充分振摇，使 其中的酶联免疫试剂颗粒完全溶解。1-3-1-3将样品试管和酶联免疫检测试剂盒同时置于预热过的加热器内保温，保温时间 5min-6min。使试样中的黄曲霉毒素Ml和酶联免疫试剂颗粒中的醵标记黄曲霉毒素Ml 抗体结合。1-3-1-4将样品试管内的全部内容物倒入试剂盒的样品池中，样品将流经”结果显示窗口” 向绿色的激活环流去。1-3-1-5当激活环的绿色开始消失变为白色时，立即用力按下激活环按键。1-3-1-6试剂盒继续放置在加热器中保温保持4 min,使显色反响完成。1-3-1-7将试剂盒从加热器中取出水平放置，立即进行检测结果判读，结果判读应在1 min

33、 内完成。1-3-2结果与分析1-3-2-1目测判读结果，试样点的颜色深于质控点，或两者颜色相当，检测结果为阴性。I-3-2-2双流向酶联免疫检测读数仪判读结果。数值W1.05,显示Negative,检测结果为阴 性。数值1.05,显示Positive,检测结果为阳性。注:阳性样品需用第一法定量检测方法 进一步确认。1-4 (1)食品中硒 的测定(扩展模块) 第一法氢化物原 子荧光光谱法1-4-1试样制备1-4-1-1粮食：试样用水洗三次，于60 C烘干，粉碎，储于塑料瓶内，备用。1-4-1-2蔬菜及其他植物性食物：取可食部用水洗净后用纱布吸去水滴，打成匀浆后备用。14-1-3其它固体试样：粉

34、碎，混匀，备用。14-1-4液体试样：混匀，备用。1-4-1-5电热板加热消解：称取0.5 g2 g (精确至OOOlg)试样，液体试样吸取1.00mL 10.00 mL,置于消化瓶中，加10.0 mL混合酸及几粒玻璃珠，盖上外表皿冷消化过夜。1-4-1-6次日于电热板上加热，并及时补加硝酸。当溶液变为清亮无色并伴有白烟时，再继 续加热至剩余体积2 mL左右，切不可蒸干。L4-1-7冷却，再加5.0 mL盐酸，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，将六价 硒还原成四价硒。14-1-8冷却，转移至5()mL容量瓶中定容，混匀备用。同时做空白试验。14-1-9微波消解：称取().5 g2 g

35、(精确至0.001g)试样于消化管中，力口 10 mL硝酸、2 mL过氧化氢，振摇混合均匀，于微波消化仪中消化，冷却后转入三角瓶中，加几粒玻璃 珠，在电热板上继续加热至近干，切不可蒸干。1-4-1/0再加5.0 mL盐酸，继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，将六价硒还原 成四价硒。1-4-1-11冷却，转移试样消化液于25 mL容量瓶中定容，混匀备用。同时做空白试验。14-1-12吸取10.0 mL试样消化液于15 mL离心管中，加盐酸2.0 mL,铁氟化钾溶液1.0mL,混匀待测。1-4-2标准曲线的配制1442 分别取 0.00 mL, 0.10 mL, 0.20 mL, 0.30

36、mL, 0.40 mL, 0.50 mL 标准应用液于15 mL离心管中用去离子水定容至10 mL,再分别加盐酸2 mL,铁氟化钾溶液1.0 mL, 混匀，制成标准工作曲线。1-4-3测定14-3-1仪器参考条件：负高压：340 V；灯电流：100 mA；原子化温度：800 ；炉高：8 mm；载气流速：5(X) mL/min；屏蔽气流速：100()mL/min；测量方式：标准曲线法；读数 方式：峰面积；延迟时间：1s；读数时间：15 s；加液时间：8 s；进样体积：2 mLo 14-32设定好仪器最正确条件，逐步将炉温升至所需温度后，稳定10 min20 min后开始 测量。1-4-3-3连续

37、用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。 1-4-3-4转入试样测量，分别测定试样空白和试样消化液，每测不同的试样前应清洗进样器。1-4-4结果与分析1-4-4-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保存三位有效数 字。14测定1-5-4-1准确吸取各不少于2份的10 UL试样溶液和苯甲酸和山梨酸的混合标准工作液， 以色谱峰面积定量。1-5-4-2在上述色谱条件下，出峰顺序依次为苯甲酸、山梨酸，标准溶液的液相色谱图参见 附图。155结果与分析1-5-5-1以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，保存三位有效数字。1-5-5-2在

38、重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的1（）%。培训后到达水平：经过培训，能够依据国家标准独立完成对样品进行理化工程（包括牛磺酸、反式脂肪酸、黄曲霉毒素Ml、硒元素、苯甲 酸和山梨酸），方面的检验，熟练掌握各项指标检验所需方法及仪器操作水平综述乳品高级技师检验员除了能够正确正确进行取样、贮存检验样品外，还能够根据标准选择检测所需的仪器设备，并且掌握检验 所需仪器设备的构造、工作原理、使用方法和保养知识，而且能够依据国家标准独立完成对样品进行有关理化工程的检验，熟 练掌握各项指标检验所需方法及仪器操作。职业道德职业道德基本知识、乳品检验员职业守那么、相关法律知识学习水平

39、（培训对象获得学习成果）能力水平（培训对象展示以下能力）依据国家标准独立完成对样品进行理化工程（包 括牛磺酸、反式脂肪酸、黄曲霉毒素M1、硒元 素、苯甲酸和山梨酸）方面的检验，熟练掌握各 项指标检验所需方法及仪器操作能够熟练掌握对待测样品进行相关理化工程（包括牛磺酸、反式脂肪酸、黄曲霉毒素M1、 硒元素、苯甲酸和山梨酸）从而为产品质量评价提供可靠依据备注3高级技师职业资格培训包考核标准 3.1乳品检验员高级技师职业资格培训包鉴定考核基 本要求1鉴定方式分为理论知识考试和技能操作考核。理论知识考试采用闭卷笔 试方式，技能操作考核采用现场实际操作方式，成绩皆达60分及以 上者为合格。检验师、高级检

40、 验师还须进行综合评审。2考评人员与考生配比理论知识考试考评人员与考生配比为1:15,每个标准教室不少于 2名考评人员；技能操作考核考评员与考生配比为1:5,且不少于3 名考评员。综合评审委员不可少于5人。3鉴定时间理论知识考试时间为90分钟，技能操作考核时间不少于60分钟。3.1乳品检验员高级技师职业资格培训包鉴定考核要点细目乳品检验员（TJB6260108）高级技师资格（1） - I考核标准考核要点细目表职业功能 （模块）工作内容（能力单元）考核内容理论基础知识点实作技能要点（能够按照国标要求精确、熟练、迅速完成以下各项操作，实验结果符合国标要求）1理化工程检验1-1 （1）婴幼儿乳 品中

41、牛磺酸的测定 （基础模块）第一 法OPA柱后衍生 法1-1-1 了解GB 5413.26 2010食品平安国家标准 婴幼儿食品和乳品中牛磺 酸的测定全部内容1-1-2理解婴幼儿乳品中牛 磺酸的测定（第一法OPA 柱后衍生法）的基本原理 1-1-3掌握高效液相色谱 仪、柱后反响器、荧光衍 生溶剂输液泵、超声波振 荡器、pH计、离心机、微 孔滤膜、天平等设备的结 构、工作原理及使用和保 养方法1-1-4掌握结果与分析中所 用到的统计学方法1-1-1试样的处理准确称取固体样品1 g5 g试样，液体样品5 g2（） g （精确至0.01g,试样中含牛 磺酸5 ug以上），力口 30 mL偏磷酸溶液（4. 溶解，充分摇匀，移入100 mL容量瓶 中。1-1-1-2放入超声波振荡器中振荡10 min15 min,取出冷却至室温后，用水定容至刻度。 1-1-1-3样液在5000转/分钟条件下离心10min,取上清液经0.45 Um微孔膜（5.7）过滤， 接取中间滤液以备进样。1-1-2试样的测定1-1-2-1参考色谱条件为：色谱柱：钠离子氨基酸分