植物生理学实验ppt幻灯片.ppt
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1、植物生理学实验植物生理学实验ppt第1页,共58页,编辑于2022年,星期六植物生理学实验室规则植物生理学实验室规则 1 1、认真预习实验。明确目的,掌握原、认真预习实验。明确目的,掌握原理,列出步骤,提出问题。理,列出步骤,提出问题。2 2、认真操作,仔细观察,从实记录。、认真操作,仔细观察,从实记录。3 3、正确操作仪器,不乱开仪器。、正确操作仪器,不乱开仪器。4 4、注意安全和清洁卫生(包括值日)。、注意安全和清洁卫生(包括值日)。5 5、正确处理废物。、正确处理废物。上上 饶饶 师师 范范 学学 院院生命科学系生物实验示范中心生命科学系生物实验示范中心第2页,共58页,编辑于2022年
2、,星期六实验报告要求 实验原理:简明扼要;实验原理:简明扼要;n n材料:用什么?材料:用什么?n n方法:实际操作过程;方法:实际操作过程;n n数据计算:原始数据,计算公式,结果。数据计算:原始数据,计算公式,结果。n n讨论和分析:针对自己的结果进行。讨论和分析:针对自己的结果进行。n n实验报告在下一次实验时上交,但实验原实验报告在下一次实验时上交,但实验原始数据须经指导老师审核后才可离开。始数据须经指导老师审核后才可离开。上上 饶饶 师师 范范 学学 院院生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心第3页,共58页,编辑于2022年,星期六植物生理学实验评分标准植物生
3、理学实验评分标准n n课上:课上:n n1 1、预习报告、预习报告 n n2 2、认真实验,操作规范,实验结果符合要求、认真实验,操作规范,实验结果符合要求 n n3 3、不迟到,不早退,积极参与卫生清扫、不迟到,不早退,积极参与卫生清扫上上 饶饶 师师 范范 学学 院院生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心第4页,共58页,编辑于2022年,星期六n n课下:实验报告评分标准课下:实验报告评分标准课下:实验报告评分标准课下:实验报告评分标准 n n1 1 1 1、卷面清洁,字迹工整、卷面清洁,字迹工整、卷面清洁,字迹工整、卷面清洁,字迹工整 10101010分分分分n
4、n2 2 2 2、语句通畅,简明扼要,逻辑性强,表达准确无概念错误、语句通畅,简明扼要,逻辑性强,表达准确无概念错误、语句通畅,简明扼要,逻辑性强,表达准确无概念错误、语句通畅,简明扼要,逻辑性强,表达准确无概念错误 20202020分分分分n n3 3 3 3、预习报告、实验原始记录、实验报告齐全、预习报告、实验原始记录、实验报告齐全、预习报告、实验原始记录、实验报告齐全、预习报告、实验原始记录、实验报告齐全 15151515分分分分n n4 4 4 4、实验报告格式规范,重点突出、实验报告格式规范,重点突出、实验报告格式规范,重点突出、实验报告格式规范,重点突出 15151515分分分分n
5、 n5 5 5 5、实验原始记录要如实认真记录实际操作、察及测定结果、实验原始记录要如实认真记录实际操作、察及测定结果、实验原始记录要如实认真记录实际操作、察及测定结果、实验原始记录要如实认真记录实际操作、察及测定结果 20202020分分分分6 6 6 6、对实验结果的讨论要充分有据,论点要正确,与该实验无关、对实验结果的讨论要充分有据,论点要正确,与该实验无关、对实验结果的讨论要充分有据,论点要正确,与该实验无关、对实验结果的讨论要充分有据,论点要正确,与该实验无关的内容不要写入报告中的内容不要写入报告中的内容不要写入报告中的内容不要写入报告中 20202020分分分分n n7 7 7 7
6、、抄袭别人报告者、抄袭别人报告者、抄袭别人报告者、抄袭别人报告者 0 0 0 0分分分分生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第5页,共58页,编辑于2022年,星期六本学期实验内容与安排 1 1 1 1、质壁分离法测定植物组织的渗透势质壁分离法测定植物组织的渗透势 2 2 2 2、植物体内硝态氮含量的测定植物体内硝态氮含量的测定 3 3 3 3、叶绿素叶绿素a a、b b含量的测定含量的测定 4 4 4 4、赤霉素对水稻赤霉素对水稻-淀粉酶的诱导形成淀粉酶的诱导形成 5 5 5 5、植物呼吸强度的测定、植物呼吸强度的测定、植物呼吸强度的
7、测定、植物呼吸强度的测定 6 6 6 6、种子活力的快速测定种子活力的快速测定种子活力的快速测定种子活力的快速测定 氯化三苯基四氮唑氯化三苯基四氮唑氯化三苯基四氮唑氯化三苯基四氮唑(TTC)(TTC)(TTC)(TTC)法法法法 及红及红及红及红墨水法墨水法墨水法墨水法 7 7 7 7、丙二醛含量的测定、丙二醛含量的测定、丙二醛含量的测定、丙二醛含量的测定生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第6页,共58页,编辑于2022年,星期六实验一实验一 质壁分离法测定植物组织的渗质壁分离法测定植物组织的渗透势透势生命科学系生物科学实验教学中心生
8、命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第7页,共58页,编辑于2022年,星期六一、实验目的、原理一、实验目的、原理n n 实验目的实验目的实验目的实验目的 n n 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的测定其用于测定植物组织渗透势的测定n n 实验原理实验原理实验原理实验原理 n n 原生质层(细胞膜、原生质、液泡膜)具有选择透过性,近原生质层(细胞膜、原生质、液泡膜)具有选择透过性,近似于半透膜,一个成熟的植物细胞就是一个完整的渗透装置:当似于半透膜,一个成熟的植物细胞就是一
9、个完整的渗透装置:当外界溶液浓度大于细胞液浓度时外界溶液浓度大于细胞液浓度时(高渗溶液),细胞失水,发生高渗溶液),细胞失水,发生质壁分离;当外界溶液浓度小于细胞液浓度时(低渗溶液),质壁分离;当外界溶液浓度小于细胞液浓度时(低渗溶液),细胞吸水;当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于细胞吸水;当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,当外界溶液浓度等于细胞液浓度时(等渗溶液)渗透平衡状态,当外界溶液浓度等于细胞液浓度时(等渗溶液),植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶,植物细胞内的压力势为零时,细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。细胞水势等于细胞液的渗
10、透势等于外界溶液渗透液的渗透势。细胞水势等于细胞液的渗透势等于外界溶液渗透势。势。生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第8页,共58页,编辑于2022年,星期六 质壁分离及质壁分离复原质壁分离及质壁分离复原 将植物组织置于对其无将植物组织置于对其无毒害的一系列不同浓度的溶毒害的一系列不同浓度的溶液里处理一定时间,然后镜液里处理一定时间,然后镜检发生质壁分离的情况,细检发生质壁分离的情况,细胞的等渗浓度将界于刚刚引胞的等渗浓度将界于刚刚引起初始质壁分离的浓度和不起初始质壁分离的浓度和不能引起质壁分离的浓度之间。能引起质壁分离的浓度之间。代
11、入公式即可计算渗透势。代入公式即可计算渗透势。生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第9页,共58页,编辑于2022年,星期六二、二、材料、器材与试剂材料、器材与试剂n n1 1 实验材料实验材料 洋葱表皮洋葱表皮n n2 2 实验仪器实验仪器 显微镜,载玻片,盖玻片,镊子,刀片,培养皿,记号显微镜,载玻片,盖玻片,镊子,刀片,培养皿,记号笔,滴管。笔,滴管。n n3 3 实验试剂实验试剂 分别配制分别配制0.500.50、0.450.45、0.40.4、0.350.35、0.300.30、0.250.25、0.200.20、0.150.
12、15、0.10mol/L0.10mol/L的蔗糖溶液,贮的蔗糖溶液,贮9 9个试剂瓶中。称个试剂瓶中。称34.23g34.23g蔗糖用蒸馏水配成蔗糖用蒸馏水配成100ml100ml,其浓度为,其浓度为1mol/L(1mol/L(母液母液)。再配制成下列各种浓度:。再配制成下列各种浓度:n n 0.50mol/L0.50mol/L:吸母液:吸母液25ml+25ml+水水25ml 25ml n n 0.45mol/L 0.45mol/L:吸母液:吸母液22.5ml+22.5ml+水水27.5ml 27.5ml n n 0.40mol/L 0.40mol/L:吸母液:吸母液20.0ml+20.0ml
13、+水水30.0ml 30.0ml n n 0.35mol/L 0.35mol/L:吸母液:吸母液17.5ml+17.5ml+水水32.5ml 32.5ml n n 0.30mol/L 0.30mol/L:吸母液:吸母液15.0ml+15.0ml+水水35.0ml 35.0ml n n 0.25mol/L 0.25mol/L:吸母液:吸母液12.5ml+12.5ml+水水37.5ml37.5mln n0.20mol/L0.20mol/L:吸母液:吸母液10.0ml+10.0ml+水水40.0ml40.0mln n0.15mol/L0.15mol/L:吸母液:吸母液7.5ml+7.5ml+水水42
14、.5ml42.5mln n0.10mol/L0.10mol/L:吸母液:吸母液5.0ml+5.0ml+水水45.0ml45.0ml生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第10页,共58页,编辑于2022年,星期六三、实三、实 验验 步步 骤骤n n1.1.取取6 6套干净清洁的小培养皿,用记号笔编号,将配制套干净清洁的小培养皿,用记号笔编号,将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序倒入各个培养皿中使成一薄层,盖好皿盖。成一薄层,盖好皿盖。n n2.2.选用有色素的洋葱鳞片的外表皮迅速分别投入各种浓度
15、的选用有色素的洋葱鳞片的外表皮迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,每个培养皿中放材料蔗糖溶液中,每个培养皿中放材料3 3个左右,使其完全浸个左右,使其完全浸没,浸泡没,浸泡2020分钟左右。分钟左右。n n3.3.到时后,取出表皮,放在载玻片上,滴一滴相同浓度到时后,取出表皮,放在载玻片上,滴一滴相同浓度的蔗糖,盖上盖玻片,在显微镜下观察质壁分离的细胞的蔗糖,盖上盖玻片,在显微镜下观察质壁分离的细胞数如果所有的细胞都产生质壁分离现象,则取低浓度溶数如果所有的细胞都产生质壁分离现象,则取低浓度溶液中的制片做同样的观察,并记录质壁分离的相对程度。液中的制片做同样的观察,并记录质壁分离的相对程度。上上
16、 饶饶 师师 范范 学学 院院生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心第11页,共58页,编辑于2022年,星期六n n4.在实验中确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁角隅上分离的最低浓度,和不引起质壁分离的最高浓度。n n5.在找到上述浓度极限时,用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次,直到有把握为止。在此条件下,细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第12页,共58页,编辑于2022年,星期六6计算求得C1按下式计算渗透势按=-iRTC1计算水势值。C等渗溶液的
17、质量摩尔浓度,单位是mol/kg;R气体常数(0.008314MPa/L/mol/K)T绝对温度i解离系数(蔗糖1,CaCl22.60)生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第13页,共58页,编辑于2022年,星期六【思考题思考题】用质壁分离法测定植物细胞渗透势与用小液流法测定植物组织水势都是以外液的浓度算出的溶质势为根据,他们之间的区别何在。生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第14页,共58页,编辑于2022年,星期六实验二实验二 植物体内硝态氮含量的测定植物体内硝态氮含量的
18、测定生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第15页,共58页,编辑于2022年,星期六一、实验目的、原理一、实验目的、原理 实验目的实验目的实验目的实验目的 硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况,因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定映土壤中硝态氮供应情况,因此可作为土壤肥氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。
19、而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。实验原理实验原理实验原理实验原理 在浓酸条件下,在浓酸条件下,NONO3 3-与水杨酸反应,生成硝基水杨与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(酸,硝基水杨酸在碱性条件下(PH12PH12)呈黄色,在一定范围内,)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可直接比色测定。其颜色深浅与含量成正比,可直接比色测定。上上 饶饶 师师 范范 学学 院院生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心第16页,共58页,编辑于2022年,星期六二、材料、设备仪器及试剂二、材料、设备仪器及试剂(一)材料(一)材料(一)
20、材料(一)材料 白菜叶片白菜叶片(二)仪器设备及试剂(二)仪器设备及试剂(二)仪器设备及试剂(二)仪器设备及试剂n n1 1 实验仪器实验仪器 722722型分光光度计、电子天平。型分光光度计、电子天平。n n2 2 实验试剂实验试剂 (1 1)500ppmNO500ppmNO3 3-标准溶液精确称取烘标准溶液精确称取烘至恒重的至恒重的KNO3 0.7221KNO3 0.7221克溶于无离水中,定容至克溶于无离水中,定容至200ml200ml。(2 2)5%5%水杨酸一硫酸溶液水杨酸一硫酸溶液 称取称取5 5克水杨酸溶于克水杨酸溶于100ml100ml,浓硫酸中(密度为,浓硫酸中(密度为1.8
21、41.84),搅拌溶解后,贮于棕色瓶中。),搅拌溶解后,贮于棕色瓶中。置冰箱保存一周有效。置冰箱保存一周有效。(3 3)8%8%氢氧化纳溶液氢氧化纳溶液 称取称取1010克克氢氧化纳溶于氢氧化纳溶于1 1升无离子水中即可。升无离子水中即可。n n生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第17页,共58页,编辑于2022年,星期六三、实验步骤三、实验步骤1.1.标准曲线的制作标准曲线的制作(1 1)吸取)吸取500ppmNO3-500ppmNO3-标准溶液标准溶液1ml.2ml.3ml.1ml.2ml.3ml.4ml.6ml.8ml.10ml
22、.12ml4ml.6ml.8ml.10ml.12ml分别放入分别放入501ml501ml容量瓶中,用容量瓶中,用无离子定至刻度,使之成无离子定至刻度,使之成1010、2020、3030、4040、6060、8080、100100、120ppm120ppm的系列标准溶液。的系列标准溶液。(2 2)吸收上述系列标准溶液)吸收上述系列标准溶液0.11ml0.11ml,分别放入,分别放入刻度试管中,以刻度试管中,以0.11ml0.11ml无离子水代替标准溶液作空白,再无离子水代替标准溶液作空白,再分别加入分别加入0.4ml0.4ml水杨酸一硫酸溶液,摇匀,在室温下放置水杨酸一硫酸溶液,摇匀,在室温下放
23、置2020分钟后再加入分钟后再加入8%NaOH8%NaOH溶液溶液9.51ml9.51ml摇匀冷却至室温,显摇匀冷却至室温,显色液总体积为色液总体积为101ml101ml。(3 3)以空白作参比,在)以空白作参比,在410nm410nm波长下测定吸光度。波长下测定吸光度。以以NO3-NNO3-N浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。上上 饶饶 师师 范范 学学 院院生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心第18页,共58页,编辑于2022年,星期六三、实验步骤三、实验步骤 2.2.样品中硝酸盐的测定样品中硝酸盐的测定(1 1
24、)样品液的制备,取一定量的植物材料剪碎混匀后,)样品液的制备,取一定量的植物材料剪碎混匀后,精确称取精确称取2-32-3克分别放入三支刻度试管中,加入克分别放入三支刻度试管中,加入10ml10ml无离子水,用无离子水,用玻璃塞封口,置入沸水浴中提取玻璃塞封口,置入沸水浴中提取3030分钟,到时间后取出,用自来分钟,到时间后取出,用自来水冷却,将是取液过滤到水冷却,将是取液过滤到25ml25ml容量瓶中,并反复冲洗残渣,最容量瓶中,并反复冲洗残渣,最的定容至刻度。的定容至刻度。(2 2)样口液的测定)样口液的测定 吸取样品吸取样品0.1 ml0.1 ml分别于三支刻度试分别于三支刻度试管中,然后
25、加入管中,然后加入5%5%水杨酸一硫酸溶液水杨酸一硫酸溶液0.4 ml0.4 ml,混匀后置室温下,混匀后置室温下2020分分钟,再慢慢加入钟,再慢慢加入9.5 ml 8%NaOH9.5 ml 8%NaOH溶液,待冷却至室温后,以空溶液,待冷却至室温后,以空白作参比,在白作参比,在410nm410nm波长下测期吸光度。在标准曲线上查得或波长下测期吸光度。在标准曲线上查得或用回归方程计算出用回归方程计算出NONO3 3-N-N浓度,再用下公式计算其含量。浓度,再用下公式计算其含量。生命科学系生物科学实验教学中心生命科学系生物科学实验教学中心上上 饶饶 师师 范范 学学 院院第19页,共58页,编
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