梅毒实验室诊断F.ppt

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1、梅毒实验室诊断,昆明市疾病预防控制中心 冯瑞琳,1995-2009年全国梅毒疫情趋势,2009年：梅毒327433例，报告发病率24.66/10万，较2008年增长17.09%，其中，一期梅毒和二期梅毒分别增长13.02%和11.57%。一期和二期梅毒真实反映梅毒疫情趋势,学习目的,掌握梅毒实验室诊断的方法了解如何诊断先天梅毒掌握如何正确地解释梅毒血清学试验的结果,梅毒螺旋体临床症状复杂,时隐时现传染途径:性传播,垂直传播,其它途径,梅毒,溃疡渗出物,血清或血浆,影响因素1）I期梅毒时敏感性为74%，所以阴性结果不能说明损害中无螺旋体，2）病人用过抗菌素或抗菌软膏、损害的自然愈合、组织碎片及红

2、细胞会影响DFE的检出率3）训练有素的技术人才。,暗视野阳性可以确诊梅毒,抗体出现的时间 感染梅毒螺旋体后14周后出现抗体抗体的分类 非特异性反应素抗体：抗类脂质抗体 特异性抗体：抗梅毒螺旋体抗体抗体的主要成分 IgM和IgG,梅毒血清学检查（抗体检测）,梅毒血清学试验的分类,血清试验是诊断各期梅毒的主要方法，分为两大类：非特异性梅毒螺旋体抗原血清试验用于初筛试验和疗效观察。 性病研究实验室试验（VDRL） 不加热血清反应素试验（USR） 血浆反应素环状卡片试验（RPR TRUST） 特异性梅毒螺旋体抗原血清试验用于确证试验，对疗效观察意义不大。 梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA TPPA）

3、荧光梅毒螺旋体吸收试验（FTAABS）局限性：非常早期的梅毒可能出现阴性，还需做病原体检查。,非特异性梅毒螺旋体血清试验,所有的非特异性梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都是一样的包括有VDRL试验 USR试验 RPR 试验TRUST(甲苯胺红)试验基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇抗原抗体结合形成复合物 凝集成网状沉淀颗粒 被肉眼所见上述方法的敏感性和特异性都基本相似,脂类抗原的试验 VDRL(1946年建立）必须每天配制新鲜抗原,用于神经梅毒的诊断（脑脊液检测）。 USR不加热血浆反应素试验血清标本不需加热灭活，抗原不必现配，但需借助显微镜观察结果。RPR/TRUST 在USR抗原中加入碳颗粒

4、或甲苯胺红作为指示物，用一小白纸卡片上进行，肉眼可直接观察结果。,非梅毒螺旋体抗原血清试验的优缺点：优点： *敏感性特异性好 *不需要昂贵设备，简单易行 *适用于大量人群的血清筛查 *有效治疗后血清滴度可下降并阴转，故可作疗效观察、判愈、复发。 *20分钟可获得实验结果。 *试剂与方法均已标化，各实验室间结果可比较。 *试验可被内部质控和外部质控监控进行。缺点： *敏感性和特异性低于螺旋体抗原试验，BFP反应和前带现象,非特异性血清试验的假阴性：,1）有25%40%的未治梅毒在晚期隐性期可自然逆转为阴性，约30%的心血管和神经梅毒呈阴性。2）前带现象（the prozonphenomenon）

5、,在二期梅毒中 临床症状很明显 但RPR试验为弱阳性或阴性 此时 应该将血清稀释后再作 会出现阳性结果 这种情况称为前带现象 发生率为12 发生的原因主要是血清中抗体量过多 与抗原量的比例不合适 抑制了阳性反应的发生。3）操作人员应注意实验的温度，试剂盒从冰箱取出后应恢复至室温，室温过低（10）可能出现假阴性或结果不准确。,非特异性血清试验生物学假阳性：,0.25%0.86%阳性标本为生物学假阳性（BFP），主要出现在自身免疫疾病（所有BFP反应的14%）的患者、其它病原体感染（病毒性肺炎、恶性肿瘤和麻风）、妊娠妇女。 应排除技术性、生理性和生物学假阳性，并用特异性试验来证实。,特异性梅毒螺旋

6、体血清试验,用梅毒螺旋体作抗原检测血清中特异的抗梅毒螺旋体抗体方法: 梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA或TPPA试验) 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS试验) 该两个试验有很好的特异性用于确诊试验,梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）：用整菌和其片断做抗原致敏的明胶颗粒，此致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的凝集反应。敏感性和特异性接近最佳，分别为95%和99.9%。容许做梅毒的精确诊断。,临床意义,TPPA试验敏感性高、特异性强，定性试验阳性，可作梅毒诊断依据，是目前使用较多的梅毒确证试验，一旦感染梅毒，TPPA试验往往终生阳性，因此不能作为治疗效果观察的指标

7、。极早期梅毒患者经治疗TPHA（TPPA）可转阴。必要时可做定量试验 。,先天梅毒（胎传梅毒）是胎儿在母体内通过血液途径感染所致，胎传梅毒不发生硬下疳，常有较严重的内脏损害，病死率高。 目前推荐使用19s-IgM-TPPA（TPHA）试验方法来诊断先天梅毒，有成品的分离系统出售，分离出来的19s-IgM即可进行TPPA（TPHA）试验或FTA-ABS等试验。,梅毒血清学试验的敏感性和特异性,梅毒血清学试验的比较,非梅毒螺旋体血清试验操作简单价格便宜有试剂盒 便于携带适宜于人群的筛查试验可以用作治疗后的疗效观测和判愈的指标,梅毒螺旋体血清试验敏感性和特异性均高FTA-ABS操作繁复 需熟练的技术人员和实验室的设备 TPHA有试剂盒用作确诊试验价格比较贵不能用于大量人群患梅毒后终身阳性 不能用作疗后随访,梅毒血清学试验的结果解释举例,血清学试验USR TPHA 意义RPR TPPA FTA-ABS VDRL _ _ _ 排除梅毒、 极早期梅毒（尚无任何抗梅毒抗体产生） + + + 现症梅毒(梅毒孕妇所生 的婴儿除外)、 治愈的晚期梅毒 + - - 生物学假阳性 - + + 极早期梅毒、治愈的早期梅毒,谢谢！,