荧光pcr检测原理课件.ppt

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1、关于荧光PCR检测原理第1页，此课件共17页哦一、荧光信号的检测一、荧光信号的检测一、荧光信号的检测一、荧光信号的检测第2页，此课件共17页哦 荧光标记信号的产生荧光标记信号的产生荧光标记信号的产生荧光标记信号的产生 荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，荧光标记基团在某波长的激发光刺激下，产生一个更长波长的发射光产生一个更长波长的发射光产生一个更长波长的发射光产生一个更长波长的发射光第3页，此课件共17页哦 FRET FRET？某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射

2、光，当另某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光，当另一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，一屏蔽基团与其距离合适时，原发射光将会被屏蔽基团所吸收，并转化为其他波长的发射光或热能，称之为并转化为其

3、他波长的发射光或热能，称之为并转化为其他波长的发射光或热能，称之为并转化为其他波长的发射光或热能，称之为并转化为其他波长的发射光或热能，称之为并转化为其他波长的发射光或热能，称之为FRETFRETFRET。第4页，此课件共17页哦荧光荧光荧光荧光信号信号信号信号荧光染料荧光染料荧光染料荧光染料SYBR greenSYBR greenSYBR greenSYBR green特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号特异性结合双链，释放荧光信号特异性荧光探针特异性荧光探针特异性荧光探针特异性荧光探针TaqmanTaqmanTaqmanTaqman双荧光标记

4、探针双荧光标记探针双荧光标记探针双荧光标记探针molecular Beaconmolecular Beaconmolecular Beaconmolecular Beacon荧光标记探针荧光标记探针荧光标记探针荧光标记探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针第5页，此课件共17页哦TaqmanTaqman特异性荧光特异性荧光双标记探针双标记探针Taqman 5353外外切酶活性切酶活性第6页，此课件共17页哦MolecularMolecular beaconbeacon第7页，此课件共17页哦荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交双探针荧光标记杂交

5、双探针第8页，此课件共17页哦二、典型的荧光二、典型的荧光二、典型的荧光二、典型的荧光PCRPCRPCRPCR扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线阳性标本扩增曲线 阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线阴性标本扩增曲线第9页，此课件共17页哦Bio-rad iCyclerBio-rad iCyclerBio-rad iCyclerBio-rad iCycler扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第10页，此课件共17页哦PE-5700PE-5700PE-5700PE-5700扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第11页，此课件共17页哦PE-770

6、0PE-7700PE-7700PE-7700扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第12页，此课件共17页哦Roche LightCyclerRoche LightCyclerRoche LightCyclerRoche LightCycler扩增曲线扩增曲线扩增曲线扩增曲线第13页，此课件共17页哦三、三、三、三、CtCtCtCt值值值值样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数Ct值值第14页，此课件共17页哦四、荧光四、荧光四、荧光四、荧光PCRPCR定量的原理定量的原理定量的原理定量的原理 第15页，此课件共17页哦Unknown未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定未知样本拷贝数的确定 第16页，此课件共17页哦感感谢谢大大家家观观看看第17页，此课件共17页哦