色谱分析法基础课件.ppt

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1、色谱分析法基础第1页，此课件共36页哦2.1 概述概述o一一 色谱法简介色谱法简介o二二 色谱发展历史色谱发展历史o三三 色谱的分类色谱的分类o四四 色谱法的特点色谱法的特点第2页，此课件共36页哦 经典的分离方法经典的分离方法：沉淀、蒸馏和萃取；沉淀、蒸馏和萃取；现现代代分分析析中中，大大量量采采用用色色谱谱和和电电泳泳分分离离方方法法。迄迄今今为止，为止，色谱方法是最为有效的现代分离分析手段色谱方法是最为有效的现代分离分析手段！2.1概概 述述 色谱法是一种色谱法是一种物理化学物理化学分离方法。将这种分离方法与适分离方法。将这种分离方法与适当的当的检测手段检测手段相结合，应用于分析化学领域

2、，就是色谱相结合，应用于分析化学领域，就是色谱分析法。分析法。第3页，此课件共36页哦一、色谱法简介一、色谱法简介色谱法早在色谱法早在1906年由俄国植年由俄国植物学家物学家MRswett(茨维特茨维特)使使用用CaCO3粉末作为粉末作为 ，石油醚作为，石油醚作为 ,玻玻璃管作为璃管作为 ，分离植，分离植物中色素时发现并命名的物中色素时发现并命名的“色谱法色谱法”(chromatography)色谱法是一种分离技术，其研究对象是复杂的混合物质。色谱法是一种分离技术，其研究对象是复杂的混合物质。固定相固定相流动相流动相色谱柱色谱柱第4页，此课件共36页哦二、色谱法的历史二、色谱法的历史俄国植物学

3、家茨维特俄国植物学家茨维特Tsweet 首先将这种层析现象用于分离植物首先将这种层析现象用于分离植物色素红萝卜素、叶黄素和叶绿素色素红萝卜素、叶黄素和叶绿素A、B，并将这种方法命名为色，并将这种方法命名为色谱法谱法 液液-固色谱（是最先创立的色谱方法）固色谱（是最先创立的色谱方法）20年后（年后（1931）Kuhn（库恩（库恩）为了证实蛋黄中的叶黄素是植物）为了证实蛋黄中的叶黄素是植物叶黄素与玉米黄质的混合物，参考了叶黄素与玉米黄质的混合物，参考了Tsweet 的论文并采用的色的论文并采用的色谱法进行其研究工作（谱法进行其研究工作（吸附色谱）吸附色谱）1938年，年，Martin（马丁（马丁）

4、和）和Synge（辛格（辛格）采用水分饱和的）采用水分饱和的硅胶为固定相，以含有乙醇的氯仿为流动相分离乙酰基氨基硅胶为固定相，以含有乙醇的氯仿为流动相分离乙酰基氨基酸并且提出了色谱塔板理论酸并且提出了色谱塔板理论 分配色谱分配色谱 第5页，此课件共36页哦1951年，年，Martin 和和James采用气体作为流动相，以自动滴定仪采用气体作为流动相，以自动滴定仪作为检测器分析脂肪酸作为检测器分析脂肪酸 气相色谱法气相色谱法。建立形成色谱学理论中。建立形成色谱学理论中有着重要地位的塔板理论和有着重要地位的塔板理论和Van Deemter方程，以及保留时间、方程，以及保留时间、保留指数、峰宽等概念

5、。保留指数、峰宽等概念。1952年，年，A.J.P.Martin和和 R.L.M.Synge获得了诺贝尔化学奖。在他获得了诺贝尔化学奖。在他们获得诺贝尔奖的论文中还指出们获得诺贝尔奖的论文中还指出“采用气体代替液体作为流动相分采用气体代替液体作为流动相分离各类化合物的可能性是存在的。离各类化合物的可能性是存在的。”“如果流动相用气体来代替，如果流动相用气体来代替，对分离更有好处对分离更有好处”，“使用非常细的颗粒填料和柱的两端施加较大使用非常细的颗粒填料和柱的两端施加较大的压差，应能得到较小的理论塔板商的压差，应能得到较小的理论塔板商”第6页，此课件共36页哦1957年，年，Golay又提出了

6、使用毛细管柱代替填充柱可获得极高的又提出了使用毛细管柱代替填充柱可获得极高的分离效率分离效率毛细管气相色谱法毛细管气相色谱法 从此，气相色谱法得以蓬勃发展。气相色谱学的诞生及其从此，气相色谱法得以蓬勃发展。气相色谱学的诞生及其获得广泛的应用使色谱学逐渐成为分析化学的一个重要分支学获得广泛的应用使色谱学逐渐成为分析化学的一个重要分支学科科1960年代，为了分离蛋白质、核酸等不易汽化的大分子物质，气相年代，为了分离蛋白质、核酸等不易汽化的大分子物质，气相色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。色谱的理论和方法被重新引入经典液相色谱。1960年代末年代末科克兰科克兰等等人开发了世界上第一台高效液相色

7、谱仪，开启了人开发了世界上第一台高效液相色谱仪，开启了高效液相色谱高效液相色谱的时代。的时代。1971年科克兰等人出版了年科克兰等人出版了液相色谱的现代实践液相色谱的现代实践一书，标志着一书，标志着高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)正式建立。正式建立。1937-1972年，年，15年中有年中有12个个Nobel奖是有关色谱研究的！奖是有关色谱研究的！第7页，此课件共36页哦三、色谱的分类三、色谱的分类1.1.色谱过程中两相的物理状态分类色谱过程中两相的物理状态分类 2.2.色谱分离过程的作用原理分类色谱分离过程的作用原理分类 3.3.固定相的使用分类固定相的使用分类第8页，此课件共36页

8、哦1.1.色谱过程中两相的物理状态分类色谱过程中两相的物理状态分类3）超临界流体色谱超临界流体色谱(SFC)1）气相色谱气相色谱(GC)：气气固色谱固色谱（GSC）、气、气液色谱液色谱（GLC）2）液相色谱液相色谱(LC)：液液固色谱固色谱（LSC）、液、液液色谱液色谱（LLC）第9页，此课件共36页哦2.2.色谱分离过程的作用原理分类色谱分离过程的作用原理分类吸附色谱法吸附色谱法 adsorption chromatography分配色谱法分配色谱法 partition chromatography离子交换色谱法离子交换色谱法 ion exchange chromatography空间排阻色

9、谱法空间排阻色谱法 steric exclusion chromatography不同组份在固定相的吸附作用不同不同组份在固定相的吸附作用不同不同组份在固定相上的溶解能力不同不同组份在固定相上的溶解能力不同不同组份在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同不同组份在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同不同尺寸分子在固定相上的渗透作用不同尺寸分子在固定相上的渗透作用第10页，此课件共36页哦3.3.固定相的使用的形式分类固定相的使用的形式分类柱色谱柱色谱 column chromatography平面色谱平面色谱 plane chromatography纸色谱法纸色谱法 paper chromatogr

10、aphy薄层色谱法薄层色谱法 thin layer chromatography第11页，此课件共36页哦四、色谱法的特点四、色谱法的特点（1）分离效率高）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体，手性异构体。复杂混合物，有机同系物、异构体，手性异构体。（2）灵敏度高灵敏度高 可以检测出可以检测出g/g(10-6)级甚至级甚至ng/g(10-9)级的物质量。级的物质量。（3）分析速度快分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。（4）应用范围广应用范围广 气相色谱：沸点低于气相色谱：沸点低于350的各种有机或无机试样的分析。的各

11、种有机或无机试样的分析。液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析和制备。液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析和制备。第12页，此课件共36页哦2.2 色谱流出曲线及有关术语色谱流出曲线及有关术语o一、色谱分离过程及流出曲线一、色谱分离过程及流出曲线o二、色谱相关术语二、色谱相关术语o三、色谱流出曲线的意义三、色谱流出曲线的意义第13页，此课件共36页哦一、色谱分离过程及流出曲线一、色谱分离过程及流出曲线1 1、色谱分离过程、色谱分离过程混合组分的分离过程及检测器对混合组分的分离过程及检测器对各组份在不同阶段的响应各组份在不同阶段的响应第14页，此课件共36页哦色谱分离基本原理：

12、色谱分离基本原理：使用外力使含有样品的使用外力使含有样品的流动相流动相（气体、液体或超临界流体）（气体、液体或超临界流体）通过一固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的通过一固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相固定相表面。表面。样品中各组份在两相中进行不同程度的样品中各组份在两相中进行不同程度的作用作用。与固定相作用。与固定相作用强的组份随流动相流出的速度慢，反之，与固定相作用弱的强的组份随流动相流出的速度慢，反之，与固定相作用弱的组份随流动相流出的速度快。由于流出的速度的差异，使得组份随流动相流出的速度快。由于流出的速度的差异，使得混合组份最终形成各个单组份的混合组份最终形成各个单组份的“

13、带带(band)”或或“区区(zone)”，对依次流出的各个单组份物质可分别进行定性、定量分析。对依次流出的各个单组份物质可分别进行定性、定量分析。第15页，此课件共36页哦 由由检检测测器器输输出出的的信信号号强强度度对对时时间间作作图图，所所得得曲曲线线即即色色谱谱流流出出曲曲线线，也称色谱图也称色谱图。2 2、色谱流出曲线、色谱流出曲线第16页，此课件共36页哦1、色谱峰（、色谱峰（peak）：当某组分从色谱柱中流出时，检测器对该组分的：当某组分从色谱柱中流出时，检测器对该组分的响应信号随时间变化所形成的峰形曲线。响应信号随时间变化所形成的峰形曲线。2、基线（、基线（baseline）：

14、在正常操作条件下（操作条件稳定后），仅有：在正常操作条件下（操作条件稳定后），仅有流动相通过检测器时，仪器记录到的一条平行于横轴的直线。图中流动相通过检测器时，仪器记录到的一条平行于横轴的直线。图中CD所示。所示。2)基线漂移基线漂移（baseline drift）：）：基线基线随时间定向的缓慢变化。随时间定向的缓慢变化。1)基线噪声基线噪声（baseline noise）：）：由各由各种因素引起的基线起伏。种因素引起的基线起伏。3、峰高（、峰高（peak height）：）：色谱峰顶点与基线的色谱峰顶点与基线的距离。以距离。以h表示，图中表示，图中AB。二、色谱相关术语二、色谱相关术语第17

15、页，此课件共36页哦1)标准偏差（标准偏差（standard deviation）：0.607倍峰高处色倍峰高处色谱峰宽度的一半谱峰宽度的一半，图中，图中EF的一半的一半。2)半峰宽（半峰宽（peak width at half-height）Y1/2：峰高一半峰高一半处的峰宽，图中处的峰宽，图中GH。Y1/2=2.35 3)峰底宽峰底宽(peak width at peak base)Y：色谱峰两侧拐点上：色谱峰两侧拐点上切线在基线上的截距，图中切线在基线上的截距，图中IJ。Y=4 4、区域宽度、区域宽度（peak width）：）：用于衡量柱效及反映色谱操作条用于衡量柱效及反映色谱操作条件

16、下的动力学因素。通常有三种表示方法：件下的动力学因素。通常有三种表示方法：通常表示区域宽通常表示区域宽度度第18页，此课件共36页哦1）死时间死时间(dead time)tM：不被固定相吸附或溶解的组分（如空气、：不被固定相吸附或溶解的组分（如空气、甲烷）从进样到出现其色谱蜂最大值所需的时间，图中甲烷）从进样到出现其色谱蜂最大值所需的时间，图中OA所示。所示。tM也是也是流动相流经色谱柱所需的时间流动相流经色谱柱所需的时间。据。据 tM 可求出流动相平均流速可求出流动相平均流速5、保保留留值值R（retention value）：是是试试样样各各组组分分在在色色谱谱柱柱中中滞滞留留时时间间的的

17、数数值值，它它反反映映组组分分与与固固定定相相间间作作用用力力大大小小，通通常常用用保保留留时时间间和和保留体积保留体积表示。表示。它是色谱定性分析和色谱过程热力学特性的重要参数。它是色谱定性分析和色谱过程热力学特性的重要参数。第19页，此课件共36页哦3）调整保留时间调整保留时间(adjusted retention time)t R：扣除死时间后的保留：扣除死时间后的保留时间，它是组分在固定相中的滞留时间。图中时间，它是组分在固定相中的滞留时间。图中AB所示，即所示，即t R=tR tM t R 反映了组分在色谱过程中，与固定相相互作用所消耗的时间，反映了组分在色谱过程中，与固定相相互作用

18、所消耗的时间，是各组分产生是各组分产生差速迁移差速迁移的物理化学基础。的物理化学基础。2)保保留留时时间间(retention time)tR：指指某某组组分分通通过过色色谱谱柱柱所所需需时时间间，即试样从进样到出现峰极大值时的时间，图中即试样从进样到出现峰极大值时的时间，图中所示。所示。在在一一定定色色谱谱体体系系和和操操作作条条件件下下，任任何何一一种种化化合合物物都都有有一一个个确确定定的的保保留时间，这是色谱留时间，这是色谱定性定性的依据。的依据。第20页，此课件共36页哦4）死体积死体积(dead volume)VM：色谱柱内载气所占的体积。色谱柱内载气所占的体积。6）调整保留体积调

19、整保留体积（adjusted retention volume)V R：扣除死体积：扣除死体积后的保留体积。后的保留体积。5）保留体积保留体积(retention volume)VR：指从进样到待测物在柱后：指从进样到待测物在柱后出现浓度极大点时所通过的流动相的体积。出现浓度极大点时所通过的流动相的体积。其中，其中，qv,o为柱出口的载气流速为柱出口的载气流速（mLmin-1)第21页，此课件共36页哦7）相对保留值相对保留值（relative retention time）r21：组份：组份2的调的调整保留值与组份整保留值与组份1的调整保留值之比。的调整保留值之比。注意：注意：1、r21只与

20、只与柱温柱温和和固定相固定相性质有关，而与柱内径、柱长性质有关，而与柱内径、柱长L、填充情况及流动相流速无关，因此，在色谱分析中，尤其填充情况及流动相流速无关，因此，在色谱分析中，尤其是是GC中广中广泛用于定性的依据泛用于定性的依据！2、r21亦可用来表示固定相（色谱柱）的选择性亦可用来表示固定相（色谱柱）的选择性。r21值越大，值越大，相邻两组分的相邻两组分的tR相差越大，分离得越好。相差越大，分离得越好。r211，两组分不能，两组分不能被分离。被分离。选择性因子选择性因子第22页，此课件共36页哦三、色谱流出曲线的意义（三、色谱流出曲线的意义（重要信息重要信息）：）：色谱峰数样品中单组份的

21、最少个数；色谱峰数样品中单组份的最少个数；色谱保留值色谱保留值定性依据；定性依据；色谱峰高或面积色谱峰高或面积定量依据；定量依据；色色谱谱保保留留值值或或区区域域宽宽度度色色谱谱柱柱分分离离效效能能评评价价指指标；标；色色谱谱峰峰间间距距固固定定相相或或流流动动相相选选择择是是否否合合适适的的依依据。据。第23页，此课件共36页哦2.3 色谱基本理论色谱基本理论一、描述分配过程的参数描述分配过程的参数描述分配过程的参数描述分配过程的参数二、色谱分离的基本理论二、色谱分离的基本理论o塔板理论塔板理论o速率理论速率理论第24页，此课件共36页哦一一 描述分配过程的参数描述分配过程的参数1.分配系数

22、分配系数(Distribution constant,K)分配系数是由分配系数是由组分组分和和固定相的热力学性质固定相的热力学性质决定的，它是决定的，它是每一个溶质的特征值，每一个溶质的特征值，与两相体积、柱管特性和所用仪器无与两相体积、柱管特性和所用仪器无关。关。在气相色谱中与两个变量有关：固定相和温度在气相色谱中与两个变量有关：固定相和温度在液相色谱中与三个变量有关：固定相、流动相和温度在液相色谱中与三个变量有关：固定相、流动相和温度。描描述述组组分分在在固固定定相相和和流流动动相相间间的的吸吸附附-脱脱附附过过程程或或溶溶解解-挥发过程挥发过程（分配）（分配）的参数，称为分配系数。的参数

23、，称为分配系数。第25页，此课件共36页哦2.分分配配比比(Retention factor or capacity factor,容容量量因因子子，容容量量比比，k)在在一一定定温温度度和和压压力力下下，组组分分在在两两相相间间的的分分配配达达平平衡衡时时，分配在固定相和流动相中的质量比。分配在固定相和流动相中的质量比。它不仅随柱温、柱压变化而变化，而且还与流动相及固它不仅随柱温、柱压变化而变化，而且还与流动相及固定相的体积有关。定相的体积有关。某某组组分分的的k值值可可由由实实验验测测得得，它它等等于于该该组组分分的的调调整整保保留留时时间间与与死时间的比值死时间的比值，即，即第26页，此

24、课件共36页哦3.K、k与选择因子与选择因子的关系：的关系：u两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。u 称为相比称为相比，它也是，它也是反映色谱柱柱型及其结构的重要特性反映色谱柱柱型及其结构的重要特性。对填。对填充柱，充柱，=635；对毛细管柱，；对毛细管柱，=501500。第27页，此课件共36页哦结论：结论：K 或或 k 反反映映的的是是某某一一组组分分在在两两相相间间的的分分配配，它它们们都都与与组组分分及及两两相相的性质的性质有关，并随柱温、柱压的变化而变化。有关，并随柱温、柱压的变化而变化。K与两相体积无关与两相体积无关，而，而k

25、则随固定相的量而改变则随固定相的量而改变。如果两组分的如果两组分的K或或k值相等，则值相等，则=1，两个组分的色谱峰必将重合，两个组分的色谱峰必将重合，说明无法实现分离。说明无法实现分离。两组分的两组分的K或或k值相差越大，则分离得越好值相差越大，则分离得越好。因。因此两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。此两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。第28页，此课件共36页哦塔板理论塔板理论（Plate theory)1.塔板理论的假设塔板理论的假设2.理论塔板高度和理论塔板数理论塔板高度和理论塔板数3.有效塔板高度和有效塔板数有效塔板高度和有效塔板数4.塔板理论的不足塔板理论的不

26、足第29页，此课件共36页哦1952年，年，Martin 和和Synge提出。提出。用用塔塔板板概概念念来来描描述述组组分分在在柱柱中中的的分分配配行为。行为。分馏塔：在塔板上多次气液平衡，按沸点不同分馏塔：在塔板上多次气液平衡，按沸点不同而分离。而分离。塔板是从精馏塔中借用的，是一种半经验理论，塔板是从精馏塔中借用的，是一种半经验理论，但它成功地解释了色谱流出曲线呈正态分布。但它成功地解释了色谱流出曲线呈正态分布。色谱柱：组分在两相间的多次分配平衡，按色谱柱：组分在两相间的多次分配平衡，按分配系数不同而分离。分配系数不同而分离。第30页，此课件共36页哦1.塔板理论的假设（3）试样开始时都在

27、第）试样开始时都在第0号塔板上，且试样沿色谱柱方向号塔板上，且试样沿色谱柱方向的纵向扩散可略而不计。的纵向扩散可略而不计。（4）分配系数在各塔板上是常数。）分配系数在各塔板上是常数。（1）在柱内一小段）在柱内一小段 长度长度H内，组分可以在两相间迅速达内，组分可以在两相间迅速达到平衡。这一小段长称为理论塔板高度到平衡。这一小段长称为理论塔板高度H。（2）载气进入色谱柱，不是连续的而是脉动式的，每次进气）载气进入色谱柱，不是连续的而是脉动式的，每次进气为一个板体积。为一个板体积。第31页，此课件共36页哦塔板号塔板号 0 1 2 3 4 5 6 7 8 91mg进样(平衡前)0.5mg(平衡后)

28、0.5mg(平衡前)1V0.5mg0.5mg0.25mg(平衡后)1V0.25mg 0.25mg0.25mg(平衡前)2V0.25mg0.25mg0.25mg0.25mg0.125mg(平衡后)2V0.25mg0.25mg0.125mg0.125mg0.125mg0.125 0.25 0.125 (平衡前)3V0.125 0.25 0.125 (平衡后)3V 0.063 0.187 0.187 0.063 0.063 0.187 0.187 0.063(平衡前)4V 0.063 0.187 0.187 0.063 0.063 0.187 0.187 0.063(平衡后)4V 0.032 0.1

29、20 0.187 0.12 0.032 0.032 0.120 0.187 0.12 0.032(平衡前)5V 0.032 0.120 0.187 0.12 0.032 0.032 0.120 0.187 0.12 0.032(平衡后)5V 0.016 0.076 0.143 0.143 0.076 0.016 0.016 0.076 0.143 0.143 0.076 0.016(平衡前)6V 0.016 0.076 0.143 0.143 0.076 0.016 0.016 0.076 0.143 0.143 0.076 0.016(平衡后)6V 0.008 0.046 0.110 0.1

30、43 0.110 0.046 0.008 0.008 0.046 0.110 0.143 0.110 0.046 0.008(平衡前)7V 0.008 0.046 0.110 0.143 0.110 0.046 0.008 0.008 0.046 0.110 0.143 0.110 0.046 0.008(平衡后)7V0.004 0.027 0.0.078 0.126 0.126 0.078 0.027 0.0040.004 0.027 0.0.078 0.126 0.126 0.078 0.027 0.004色谱流出曲线方程式：色谱流出曲线方程式：为讨论方便，假设：为讨论方便，假设：塔板数为

31、塔板数为5,进样量：进样量：1mg,k=1.第32页，此课件共36页哦由由上上述述两两式式知知道道，理理论论塔塔板板数数n 越越多多、理理论论塔塔板板高高度度H 越小越小、色谱峰越窄色谱峰越窄，则，则柱效越高柱效越高。2.理论塔板高度和理论塔板数理论塔板高度和理论塔板数理论塔板数理论塔板数：可见理论塔板数由组分可见理论塔板数由组分保留值保留值和和峰宽峰宽决定。决定。若柱长为若柱长为L，则每块理论塔板高度，则每块理论塔板高度H为为柱效方程柱效方程第33页，此课件共36页哦通常以通常以有效塔板数有效塔板数neff 和有效塔板高度和有效塔板高度Heff 表示表示：3.有效塔板高度和有效塔板数有效塔板

32、高度和有效塔板数第34页，此课件共36页哦塔板高度塔板高度H与塔片数与塔片数n在实际工作中的意义在实际工作中的意义H表示在色谱柱中溶质在流动相和固定相之间达到一次平衡时所对应的表示在色谱柱中溶质在流动相和固定相之间达到一次平衡时所对应的柱长柱长，H越小，色谱柱的柱效越高越小，色谱柱的柱效越高H表示柱效的优点是可以表示柱效的优点是可以直接比较不同柱长的柱效直接比较不同柱长的柱效，因为它是，因为它是表示在色谱柱中溶质在流动相和固定相之间达到一次平衡时所表示在色谱柱中溶质在流动相和固定相之间达到一次平衡时所对应的柱长对应的柱长n则表示在一定长度的色谱柱上，溶质流过时在两相进行平衡则表示在一定长度的色

33、谱柱上，溶质流过时在两相进行平衡分配的总次数。分配的总次数。n越大，色谱柱的柱效越高越大，色谱柱的柱效越高 n大大或或H小小，只只表表示示固固定定相相的的分分离离潜潜力力大大，要要把把这这种种潜潜力力变变为为现现实实还还取取决决于于其其它它的的分分离离条条件件，在在一一定定的的操操作作条条件件下下，混混合合物物中中各各个个组组分分的的分分配系数有差异，分离才能实现，此时，配系数有差异，分离才能实现，此时，n越大或越大或H越小，分离越好。越小，分离越好。第35页，此课件共36页哦4.塔板理论的不足塔板理论的不足色谱过程也不是分馏过程，所以塔片理论只是一个半经色谱过程也不是分馏过程，所以塔片理论只是一个半经验的理论，其并没有阐述色谱过程中验的理论，其并没有阐述色谱过程中谱带扩展谱带扩展的实质。的实质。塔片理论塔片理论没有考虑各种动力学因素对色谱柱内传质没有考虑各种动力学因素对色谱柱内传质过程的影响过程的影响，因此不能解释造成谱带扩张的原因和影，因此不能解释造成谱带扩张的原因和影响板高的各种因素。响板高的各种因素。塔板理论塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果柱效不同的实验结果。第36页，此课件共36页哦