动物实验基本操作技术课件.ppt

《动物实验基本操作技术课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《动物实验基本操作技术课件.ppt（85页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、关于动物实验基本操作技术关于动物实验基本操作技术26.09.20221现在学习的是第1页，共85页一、大、小鼠的抓取固定第一节 实验动物的抓取与固定26.09.20222现在学习的是第2页，共85页小鼠固定盒固定26.09.20223现在学习的是第3页，共85页大鼠固定盒固定26.09.20224现在学习的是第4页，共85页二、豚鼠的抓取固定法26.09.20225现在学习的是第5页，共85页三、家兔的抓取固定法26.09.20226现在学习的是第6页，共85页26.09.20227现在学习的是第7页，共85页一、大、小鼠的性别鉴定第二节 性别鉴定26.09.20228现在学习的是第8页，共8

2、5页Female Male 二、兔的性别鉴定26.09.20229现在学习的是第9页，共85页一、大、小鼠 1.根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）第三节 年龄的大致判断日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1 1仔鼠裸体仔鼠裸体鲜红鲜红3 3耳壳露出表皮耳壳露出表皮4 4脐带脐带瘢痕脱落瘢痕脱落5 5能翻身能翻身8 8能爬行能爬行26.09.202210现在学习的是第10页，共85页日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1010能听到声音能听到声音9 91111全身被白毛，全身被白毛，门齿长门齿长出出13131515眼皮眼皮张张开，能跳开，能跳跃跃，能抓取，能抓取东东西西1818以后以

3、后能自行采食，独立生活能自行采食，独立生活26.09.202211现在学习的是第11页，共85页26.09.202212现在学习的是第12页，共85页26.09.202213现在学习的是第13页，共85页26.09.202214现在学习的是第14页，共85页26.09.202215现在学习的是第15页，共85页26.09.202216现在学习的是第16页，共85页26.09.202217现在学习的是第17页，共85页 2.根据体重鉴定日龄 小鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 5 10 15 20 25 30体重/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 21.026.09.202

4、218现在学习的是第18页，共85页 大鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 10 20 30 40 体重/g67 1725 3550 5590 100150日龄/d 50 60 70 80体重/g150210 170240 210270 24032026.09.202219现在学习的是第19页，共85页二、豚鼠一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。日

5、日龄龄/d/d 初生初生 7 20 30 60 7 20 30 60 体重体重/g/g606080 10080 100120 150120 150200 170200 170220 240220 240300300日日龄龄/d/d 90 120 180 90 120 180体重体重/g/g330330400 400400 400470 520470 52060026.09.202220现在学习的是第20页，共85页三、家兔家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家

6、兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。26.09.202221现在学习的是第21页，共85页五、犬犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿犬齿臼齿顺序逐渐更换为恒齿，8l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切

7、年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。26.09.202222现在学习的是第22页，共85页年龄年龄 犬齿更换和磨损情况犬齿更换和磨损情况2 2个月以下个月以下仅有乳齿仅有乳齿(白、细、尖白、细、尖)2 24 4个月个月更换门齿更换门齿4 46 6个月个月更换犬齿更换犬齿(白，牙尖圆钝白，牙尖圆钝)6 61010个月个月更换臼齿更换臼齿1 1岁岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突2 2岁岁下门齿尖突部分磨乎下门齿尖突部分磨乎3 3岁岁上、下门齿尖突大部分磨平上、下门齿尖突大部分磨平4 45 5岁岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄上、下门齿开始磨损呈微斜面

8、，并发黄6 68 8岁岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损9 91010岁岁唇部、胡须发白唇部、胡须发白1010岁以上岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白26.09.202223现在学习的是第23页，共85页第四节 妊娠检查雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查，又称妊娠诊断(pregnancydiagnosis)。通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿的正常发育，

9、避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要求准确，且及早确诊更为重要。26.09.202224现在学习的是第24页，共85页外部检查法摸胎法阴道检查法直肠检查法超声波检查法孕酮含量测定法妊娠检查方法有26.09.202225现在学习的是第25页，共85页第五节 分组与编号动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。一、随机分组（一）当分为二组时例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为甲、乙两组。分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12

10、个随机数字，如下：26.09.202226现在学习的是第26页，共85页动物编号：123456789101112随机数字：78386957910374566826541组别：乙乙甲甲甲乙甲甲乙乙甲甲现在以随机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组，则编号为3、4、5、7、8、11、12号分入甲组，而1、2、6、9、10号分人乙组。因两组数字不等，继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组，从上面最后一随机数字41，接下去抄一个数为62，以7除之(因甲组原分配7只)得6，即把原分配在甲组的第6个甲(即11号大鼠)调入乙组。26.09.202227现在学习的是第27页，共85页如果甲组多两个，则接下去抄两

11、个数。分别以8，7除之，余数即指要调入乙组的第几个甲，余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后各组鼠的编号为：组别鼠的编号甲组3457812乙组1269101126.09.202228现在学习的是第28页，共85页(二)当分为三组时例：设有雄性的SD大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为A、B、C三组。分组方法：假设所定的点是随机数字表第40行17列的08，则从08开始，自左到右抄12个随机数字：动物编号：123456789101112随机数字：082701501529393943796910除3余数：201202001101组别：BCABCBCCAACA调

12、整组别：B26.09.202229现在学习的是第29页，共85页 以以3 3除除各各随随机机数数字字，若若余余数数为为l l，即即该该鼠鼠归归A A组组；余余数数为为2 2，归归人人B B组组；余余数数为为3 3，归归入入C C组组。结结果果A A组组为为4 4只只，B B组组为为3 3只只，C C组组为为5 5只只。C C组组多多一一只只应应调调入入B B组组。方方法法同同上上。仍仍采采用用随随机机方方法法；从从1010后后面面接接着着抄抄，为为6161。除除以以5 5，余余数数为为1 1，则则将将第第一一个个C C，即第，即第2 2号鼠调入号鼠调入B B组。调整后各组鼠的编号如下：组。调整

13、后各组鼠的编号如下：组别鼠的编号A组391012B组l246CC组组5781157811对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致26.09.202230现在学习的是第30页，共85页（三）当每个动物一组时：例：设有A，B，C，D，E，F代表的6只家兔，试用完全随机法将其每只分为一组。分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若为第21行第17列的33，则从33向左抄用6个数字，然后分别以6，5，4，3，2，l除之。凡除不尽的，即将余数写下。除尽的，写余数时即将其除数写下。如下：26.09.202231现在学习的是第31页，共85页随机数字3346952

14、687除数654321余数311121随机排列CABDFE上列第一个随机数字余数为3，意即将6个字母中列在第三位的字母C写在该数下，第二个数宇的余数为1，即在剩下的5个字母列在第一位的A写在该数字下面，余此类推。26.09.202232现在学习的是第32页，共85页二、编号标记方法实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个体的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。1 1体体表表颜颜料料着着色色法法 一一般般对对短短期期试试验验的的白白色色动动物物可可用用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：红色：红色：0.50.5中性红或品红溶液；中性红或

15、品红溶液；黄色：35 5苦苦味味酸酸溶溶液液或或808090苦味酸酒精饱和液；咖啡色：2硝酸银溶液；黑色：煤焦油酒精溶液。26.09.202233现在学习的是第33页，共85页 左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、9。用黄色表示个位数，红色表示十位数。26.09.202234现在学习的是第34页，共85页 2个体耳号标记法 3.个体断趾标记法 4.耳号钳标记法 5.挂牌法26.09.202235现在学习的是第35页，共85页第六节 常规采血方法一、大、小鼠的采血方法1颈静脉或颈动脉采血2股静脉或股动脉采血3心脏采血4尾部采血5眼眶采

16、血6断头取血26.09.202236现在学习的是第36页，共85页颈静脉或颈动脉采血尾部采血26.09.202237现在学习的是第37页，共85页心脏采血26.09.202238现在学习的是第38页，共85页二、豚鼠的采血方法1耳缘剪口采血2心脏采血方法同大、小鼠。3股动脉采血方法同大、小鼠。4后肢背中足静脉采血26.09.202239现在学习的是第39页，共85页三、家兔的采血方法1心脏采血2耳中央动脉采血3耳静脉采血26.09.202240现在学习的是第40页，共85页四、狗、猫的采血方法1后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血2股动脉采血3.心脏采血同大、小鼠心脏采血4耳缘

17、静脉采血同兔耳缘静脉采血26.09.202241现在学习的是第41页，共85页采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、NaNa+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。离子浓度，必须采取动脉血液。26.09.202242现在学习的是第42页，共85页采血场所有充足的

18、光线；室温夏季最好保持在2528，冬季，1520为宜；采血用具有采用部位一般需要进行消毒；采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。采血时要注意26.09.202243现在学习的是第43页，共85页部位 动物种类尾静脉大鼠、小鼠耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠d舌下静脉兔e腹壁静脉青蛙、蟾蜍f冠、脚蹼皮下静脉 鸡、鸭、鹅取少量血26.09.202244现在学习的是第44页，共85页部位 动物种类后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫耳中央动脉兔颈静脉狗、猫、兔

19、心脏豚鼠、大鼠、小鼠断头大鼠、小鼠翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅取中量血26.09.202245现在学习的是第45页，共85页部位 动物种类股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔心脏狗、猴、猫、兔颈静脉马、牛、山羊、绵羊摘眼球大鼠、小鼠取大量血26.09.202246现在学习的是第46页，共85页动物种类最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500猎狗50200猴15604.最大安全采血量与最小致死采血量26.09.202247现在学习的是第47页，共85页第七节 给药途径与方法在动物实验过程中，应根据不同的实验目的、动物种类、药物

20、类型来决定动物的给药途径与方法。动物的给药方法主要分为注射法和投入法两种，不同方法按给药途径又分为很多具体类型。注射法分为：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射。投入法可分为：鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入、气管内投入和经口腔投入。以下将各种动物的主要给药途径和方法做一介绍。26.09.202248现在学习的是第48页，共85页（一）皮下注射（一）皮下注射注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或

21、耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。（二）皮内注射（二）皮内注射 皮皮内内注注射射时时需需将将注注射射的的局局部部脱脱去去被被毛毛，消消毒毒后后，用用左左手手拇拇指指和和食食指指按按住住皮皮肤肤并并使使之之绷绷紧紧，在在两两指指之之间间，用用结结核核菌菌素素注注射射器器连连4(1/2)4(1/2)细细针针头头，紧紧贴贴皮皮肤肤表表层层刺刺入入皮皮内内，然然后后再再向向上上挑挑起起并并再再稍稍刺刺入入，即即可可注注射射药药液液，此此时时可可见见皮皮肤肤表表面鼓起一白色小皮丘。面鼓起一白色小皮丘。26.09.202249现在学习的是第49页，共85页（四）腹腔注射（四）腹腔注射 用用大大、小小白白

22、鼠鼠做做实实验验时时，以以左左手手抓抓住住动动物物，使使腹腹部部向向上上，右右手手将将注注射射针针头头于于左左（或或右右）下下腹腹部部刺刺入入皮皮下下，使使针针头头向向前前推推0.50.51.0cm1.0cm，再再以以4545度度角角穿穿过过腹腹肌肌，固固定定针针头头，缓缓缓缓注注入入药液，药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。26.09.202250现在学习的是第50页，共85页（五）静脉注射 1 1兔兔：兔兔耳耳部部血血管管分分布布清清晰晰。兔兔耳耳中中央央为为动动脉脉，耳耳外外缘缘为为静静脉脉。内内缘缘静静脉脉深

23、深不不易易固固定定，故故不不用用。外外缘缘静静脉脉表表浅浅易易固固定定，常常用用。先先拔拔去去注注射射部部位位的的被被毛毛，用用手手指指弹弹动动或或轻轻揉揉兔兔耳耳，使使静静脉脉充充盈盈，左左手手食食指指和和中中指指夹夹住住静静脉脉的的近近端端，拇拇指指绷绷紧紧静静脉脉的的远远端端，无无名名指指及及小小指指垫垫在在下下面面，右右手手持持注注射射器器连连6 6号号针针头头尽尽量量从从静静脉脉的的远远端端刺刺入入，移移动动拇拇指指于于针针头头上上以以固固定定针针头头，放放开开食食指指和和中中指指，将将药药液液注注入入，然然后后拔拔出出针头，用手压迫针眼片刻。针头，用手压迫针眼片刻。26.09.20

24、2251现在学习的是第51页，共85页2小白鼠和大白鼠一般采用尾静脉注射，操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中，使尾巴露出，尾部用4550的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射器连4(1/2)号细针头，使针头与静脉平行（小于30），从尾下四分之一处（约距尾尖23厘米）处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复注射，应尽可能从末端开始，以后向尾根部方向移动注射。26.09.202252

25、现在学习的是第52页，共85页3狗狗静脉注射多选前肢内侧皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。注射前由助手将动物侧卧，剪去注射部位的被毛，用胶皮带扎紧（或用手抓紧）静脉近端，使血管充盈，从静脉的远端将注射针头平行刺入血管，待有回血后，松开绑带（或两手），缓缓注入药液。26.09.202253现在学习的是第53页，共85页注射途径小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.21.0 1325510515肌肉0.10.2 0.20.5 0.20.5 0.5125静脉0.20.5 1215310515皮下0.10.5 0.510.5213310几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）26.09.202254现在学习的是第54页

26、，共85页（六）经口给药（六）经口给药多用灌胃法，此法剂量准确，适用于小白鼠、大白鼠、家兔等动物。1小鼠、大鼠（或豚鼠）灌胃时将灌胃针按在注射器上，吸入药液。左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定，右手持注射器，将灌胃针插入动物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。动物应固定成垂直体位，针插入时应无阻力。若感到阻力或动物挣扎时，应立即停止进针或将针拔出，以兔损伤或穿破食道以及误入气管。一一般般当当灌灌胃胃针针插插入入小小鼠鼠3 34cm，大鼠或豚鼠46cm后可将药物注入。常用的灌胃量小鼠为0.2 1ml1ml，大大鼠鼠1 14ml，豚鼠为15ml。26.09.202255现在学习的是第55页，共85页22狗

27、、兔、猫、猴狗、兔、猫、猴 灌灌胃胃时时，先先将将动动物物固固定定，再再将将特特制制的的扩扩口口器器放放入入动动物物口口中中，扩扩口口器器之之宽宽度度可可视视动动物物口口腔腔大大小小而而定定，如如狗狗的的扩扩口口器器可可用用木木料料制制成成长长方方形形，长长约约101015cm，粗细应适合狗嘴，约23cm3cm，中中间间粘粘一一小小孔孔，孔孔的的直直途途为为5 510cm10cm。灌灌胃胃时时将将扩扩口口器器放放于于上上述述动动物物上上下下门门牙牙之之后后，并并用用绳绳将将它它固固定定于于嘴嘴部部，将将带带有有弹弹性性的的橡橡皮皮导导管管（如如导导尿尿管管），经经扩扩口口器器上上的的小小圆圆孔

28、孔插插入入，沿沿咽咽后后壁壁而而进进入入食食道道，此此时时应应检检查查导导管管是是否否正正确确插插入入食食道道，可可将将导导管管外外口口置置于于一一盛盛水水的的烧烧杯杯中中，如如不不发发生生气气泡泡，即即认认为为此此导导管管是是在在食食道道中中，未未误误入入气气管，即可将药液灌入。管，即可将药液灌入。26.09.202256现在学习的是第56页，共85页 给给狗狗、兔兔灌灌胃胃时时，可可不不用用扩扩口口器器：狗狗灌灌胃胃时时，用用1212号号灌灌胃胃管管，左左手手抓抓住住狗狗嘴嘴，右右手手中中指指由由右右嘴嘴角角插插入入，摸摸到到最最后后一一对对臼臼齿齿后后的的天天然然空空隙隙，胃胃管管由由此

29、此空空隙隙顺顺食食管管方方向向不不断断插插入入约约20cm20cm，可可达达胃胃内内，将将胃胃管管另另一一端端插插入入水水中中，如如不不出出气气泡泡，表表示示确确已已进进入入胃胃，而而没没误误入入气气管管内内，即即可可灌灌入入。兔兔灌灌胃胃时时，将将兔兔固固定定在在木木制制固固定定盒盒内内左左手手虎虎口口卡卡住住并并固固定定好好兔兔嘴嘴，右右手手取取1414号号细细导导管管，由由右右侧侧唇唇裂裂避避开开门门齿齿，将将导导管管慢慢慢慢插插入入，如如插插管管顺顺利利，动动物物不不挣挣扎扎，插插入入约约15cm15cm时时，即表示插入胃内，将药液注入。即表示插入胃内，将药液注入。各种动物一次灌胃能耐

30、受的最大容积小鼠为0.51.0ml1.0ml，大大鼠鼠4 47ml，豚鼠为47ml，家兔为80150ml，狗为200500ml500ml。26.09.202257现在学习的是第57页，共85页（七）其它途径给药 1 1呼呼吸吸道道给给药药呈呈粉粉尘尘、气气体体及及蒸蒸气气或或雾雾等等症症状状存存在在药药物物或或毒毒气气，均均需需要要通通过过动动物物呼呼吸吸道道给给药药。如如一一般般实实验验时时给给动动物物乙乙醚醚作作吸吸入入麻麻醉醉，给给动动物物吸吸一一定定量量的的氨氨气气、二二氧氧化化碳碳等等观观察察呼呼吸吸、循循环环等等变变化化；给给动动物物定定期期吸吸入入一一定定量量的的SOSO2 2。

31、锯末烟雾等可造成慢性气管炎动物模型等；特别在毒物学实验中应用更为广泛。2 2皮皮肤肤给给药药为为了了鉴鉴定定药药物物或或毒毒物物经经皮皮肤肤的的吸吸收收作作用用、局局部部作作用用、致致敏敏作作用用和和光光感感作作用用等等，均均需需采采用用经经皮皮肤肤给给药药方方法法。如如家家兔兔和和豚豚鼠鼠常常采采用用背背部部一一定定面面积积的的皮皮肤肤脱脱毛毛后后，将一定药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。将一定药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。26.09.202258现在学习的是第58页，共85页3脊髓腔内给药此法主要用于椎管麻醉或抽取脑脊液。家家兔兔椎椎管管内内注注射射方方法法：将将家家兔兔作作自自然然俯俯卧

32、卧式式，尽尽量量使使其其尾尾向向腹腹侧侧屈屈曲曲，用用粗粗剪剪将将第第七七腰腰椎椎周周围围背背毛毛剪剪去去，用用3%3%碘碘酊酊消消毒毒，干干后后再再用用79%79%酒酒精精将将碘碘酒酒擦擦去去。在在兔兔背背部部髌髌骨骨脊脊连连线线之之中中点点稍稍下下方方摸摸动动第第七七腰腰椎椎间间隙隙（第第七七腰腰椎椎与与第第一一骶骶骨骨椎椎之之间间），插插入入腰腰椎椎穿穿刺刺针针头头。当当针针到到达达椎椎管管内内时时（珠珠网网膜膜下下腔腔），可可见见到到兔兔的的后后肢肢跳跳动动，即即证证明明穿穿刺刺针针头头已已进进入入椎椎管管。这这时时不不要要再再向向下下刺刺，以以兔兔损损伤伤脊脊髓髓。固固定定好好针针头

33、头，即即可可将将药药物物注注入。入。26.09.202259现在学习的是第59页，共85页4小脑延髓池给药此种给药都是在动物麻醉情况下进行的。而且常采用大动物如狗等，小动物很少采用。将狗麻醉后，使狗头尽量向胸部屈曲，用左手摸到其第一颈椎上方的凹陷（枕骨大孔），固定位置，右手取7号钝针头（将针头尖端麻钝），由此凹陷的正中线上，顺平行狗的方向，小心地刺入小脑延髓池。当针头正确刺入小脑延髓池时，注射者会感到针头再向前穿时无阻力，同时可以听到很轻的“咔嚓”一声，即表示针头已穿过硬脑膜进入小脑延髓池，而且可抽出清亮的脑脊液，注射药物前，先抽出一些脑脊液，抽取量根据实验需要注入多少药液决定，即注入多少抽取

34、多少，以保持原来脑脊髓腔里的压力。26.09.202260现在学习的是第60页，共85页 5 5脑脑内内给给药药此此法法常常用用于于微微生生物物学学动动物物实实验验，将将病病原原体体等等接接种种于于被被检检动动物物脑脑内内，然然后后观观察察接接种种后后的的各各种种变变化化。小小鼠鼠脑脑内内给给药药时时，选选套套有有塑塑料料管管、针针尖尖露露出出2mm2mm深深的的5(1/2)5(1/2)针针头头，由由鼠鼠正正中中额额部部刺刺入入脑脑内内，注注入入药药物物或或接接种种物物。给给豚豚鼠鼠、兔兔、狗狗等等进进行行脑脑内内注注射射时时，须须先先用用穿穿颅颅钢钢针针穿穿透透颅颅骨骨，再再用用注注射射器器

35、针针头头刺刺入入脑脑部部，再再徐徐徐徐注注入入被被检检物物。注注射射速速度度一一定定要要慢慢，避免引起颅内压急骤升高。避免引起颅内压急骤升高。26.09.202261现在学习的是第61页，共85页 6 6直直肠肠内内给给药药此此种种给给药药方方法法常常用用于于动动物物麻麻醉醉。家家兔兔直直肠肠内内给给药药时时，取取灌灌肠肠用用的的胶胶皮皮管管或或用用1414号号导导尿尿管管代代替替。在在胶胶皮皮管管或或导导尿尿管管头头上上涂涂上上凡凡士士林林，由由助助手手使使兔兔蹲蹲卧卧于于桌桌上上，以以左左臂臂及及左左腋腋轻轻轻轻按按住住兔兔头头及及前前肢肢，以以左左手手拉拉住住兔兔尾尾，露露出出肛肛门门，

36、并并用用右右手手轻轻握握后后肢肢，实实验验者者将将橡橡皮皮管管插插入入家家兔兔肛肛门门内内，浓浓度度约约7 79cm9cm，如如为为雌雌性性动动物物，注注意意勿勿误误插插入入阴阴道道（肛肛门门紧紧接接尾尾根根）。橡橡皮皮管管插插好好后后，将将注注射射器器与与橡橡皮皮管套紧，即可灌注药液。管套紧，即可灌注药液。26.09.202262现在学习的是第62页，共85页 7 7关关节节腔腔内内给给药药此此种种方方法法常常用用于于关关节节炎炎的的动动物物模模型型复复制制。兔兔给给药药时时，将将兔兔仰仰卧卧固固定定于于兔兔固固定定台台上上，剪剪去去关关节节部部被被毛毛，用用碘碘酒酒或或酒酒精精消消毒毒，然

37、然后后用用手手从从下下方方和和两两旁旁将将关关节节固固定定，把把皮皮肤肤稍稍移移向向一一侧侧，在在膑膑韧韧带带附附着着点点处处上上方方约约0.50.5厘厘米米处处进进针针。针针头头从从上上前前方方向向下下后后方方倾倾斜斜刺刺进进，直直至至针针头头遇遇阻阻力力变变小小，然然后后针针头头稍稍后后退退，以以垂垂直直方方向向推推到到关关节节腔腔中中。针针头头进进入入关关节节腔腔时时，通通常常可可有有好好象象刺刺破破薄薄膜膜的的感感觉觉，表表示示针针头头已已进进入入膝膝关关节腔内，即可注入药液。节腔内，即可注入药液。26.09.202263现在学习的是第63页，共85页第八节 麻醉方法麻醉(anesth

38、esia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。一、常用的麻醉剂动物实验中常用的麻醉剂分为三类，即挥发性麻醉剂、非挥发性麻醉剂和中药麻醉剂。26.09.202264现在学习的是第64页，共85页11挥发性麻醉剂挥发性麻醉剂包括乙醚、氯仿等，乙醚吸入麻醉适用于各种动物，其麻醉量和致死量差距大，所以安全度亦大，动物麻醉深度容易掌握，而且麻后苏醒较快。其缺点是对局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液体分泌增多，再通过神经反射可影响呼吸、血压和心跳活动，并且容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醉时必需有人照看，以 防 麻 醉 过 深 而 出

39、 现 以 上 情 况。26.09.202265现在学习的是第65页，共85页22非挥发性麻醉剂非挥发性麻醉剂 这这类类麻麻醉醉剂剂种种类类较较多多，包包括括苯苯巴巴比比妥妥钠钠、戊戊巴巴比比妥妥钠钠、硫硫喷喷妥妥钠钠等等巴巴比比妥妥类类的的衍衍生生物物，氨氨基基甲甲酸酸乙乙脂脂和和水水合合氯氯醛醛。这这些些麻麻醉醉剂剂使使用用方方便便，一一次次给给药药可可维维持持较较长长的的麻麻醉醉时时间间，麻麻醉醉过过程程较较平平衡衡，动动物物无无明明显显挣挣扎扎现现象象。但但缺缺点点是是苏苏醒醒较较慢。慢。33中药麻醉剂中药麻醉剂 动动物物实实验验时时有有时时也也用用到到象象洋洋金金花花和和氢氢溴溴酸酸东

40、东莨莨菪菪碱碱等等中中药药麻麻醉醉剂剂，但但由由于于其其作作用用不不够够稳稳定定，而而且且常常需需加加佐佐剂剂麻麻醉醉效效果果才才能能理理想想，故故在在使使用用过过程程中中不不能能得得到到普普及及，因因而而，多多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。26.09.202266现在学习的是第66页，共85页二、动物的麻醉方法二、动物的麻醉方法1全身麻醉（1 1）吸入法）吸入法用一块圆玻璃板和一个钟罩或一个密闭的玻璃箱作为挥发性麻醉剂的容器，多选用乙醚作麻药。麻醉时用几个棉球，将乙醚倒入其中，迅速转入钟罩或箱内，让其挥发，然后把待麻醉动物投入，约隔46分钟即可麻醉，麻醉

41、后应立即取出，并准备一个蘸有乙醚的棉球小烧杯，在动物麻醚变浅时给套在鼻上使其补吸麻药。本法最适于大、小鼠的短期操作性实验的麻醉，也可用于较大的动物。由于乙醚燃点很低，遇火极易燃烧，所以在使用时，一定要远离火源。26.09.202267现在学习的是第67页，共85页（2）腹腔和静脉给药麻醉法 非非挥挥发发性性和和中中药药麻麻醉醉剂剂均均可可用用作作腹腹腔腔和和静静脉脉注注射射麻麻醉醉，操操作作简简便便，是是实实验验室室最最常常采采用用的的方方法法之之一一。腹腹腔腔给给药药麻麻醉醉多多用用于于大大小小鼠鼠和和豚豚鼠鼠，较较大大的的动动物物如如兔兔、狗狗等等则则多多用用静静脉脉给给药药进进行行麻麻醉

42、醉。由由于于各各麻麻醉醉剂剂的的作作用用长长短短以以及及毒毒性性的的差差别别。所所以以在在腹腹腔腔和和静静脉脉麻麻醉醉时时，一一定定要要控控制制药药物物的的浓浓度度和和注注射射量量。26.09.202268现在学习的是第68页，共85页2局部麻醉 猫猫的的局局部部麻麻醉醉一一般般应应用用0.50.51.0%1.0%盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因注注射射。粘粘膜膜表表面面麻麻醉醉宜宜用用2%2%盐盐酸酸可可卡卡因因。兔兔在在眼眼球球手手术术时时，可可于于结结膜膜囊囊滴滴入入0.02%0.02%盐盐酸酸可可卡卡因因溶溶液，数秒钟即可出现麻醉。液，数秒钟即可出现麻醉。狗的局部麻醉用0.51%盐酸普鲁卡因注

43、射。眼鼻、咽喉表面麻醉可用2%盐酸可卡因。26.09.202269现在学习的是第69页，共85页3.3.麻醉效果的观察麻醉效果的观察动物的麻醉效果直接影响实验的进行和实验结果。如果麻醉过浅，动物会因疼痛而挣扎，甚至出现兴奋状态，呼吸心跳不规则，影响观察。麻醉过深，可使机体的反应性降低，甚至消失，更为严重的是抑制延髓的心血管活动中枢和呼吸中枢，使呼吸、心跳停止，导致动物死亡。因此，在麻醉过程中必须善于判断麻醉程度，观察麻醉效果。判断麻醉程度的指标有：26.09.202270现在学习的是第70页，共85页 呼呼吸吸：加加快快或或不不规规则则，则则麻麻醉醉过过浅浅，可可再再追追加加麻麻醉醉，若若呼呼

44、吸吸由由不不规规则则转转变变为为规规则则且且平平稳稳，说说明明已已达达到到麻麻醉醉深深度度。若若动动物物呼呼吸吸变变慢慢，且且以以腹腹式式呼呼吸吸为为主主，说说明明麻麻醉醉过过深深，动动物物有生命危险。有生命危险。反射活动：角膜反射灵敏，则麻醉过浅；反射迟钝，麻醉程度适宜；反射消失，伴瞳孔散大，则麻醉过深。肌张力：亢进，麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适。肌张力：亢进，麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适。皮皮肤肤夹夹捏捏反反应应：麻麻醉醉过过程程中中可可随随时时用用止止血血钳钳或或有有齿齿镊镊夹夹捏捏动动物物皮皮肤肤，若若反反应应灵灵敏敏，则则麻麻醉醉过过浅浅；若若反反应应消消失失，则麻醉程度合适

45、。则麻醉程度合适。26.09.202271现在学习的是第71页，共85页44麻醉注意事项麻醉注意事项 静静脉脉注注射射必必须须缓缓慢慢，同同时时观观察察肌肌肉肉紧紧张张性性、角角膜膜反反射射和和对对皮皮肤肤夹夹捏捏的的反反应应，当当这这些些活活动动明明显显减减弱弱或或消消失失时时，立立即即停停止止注注射射。配配制制的的药药液液浓浓度度要要适适中中，不不可可过过高高，以以兔兔麻麻醉醉过过急；但也不能过低，以减少注入溶液的体积。急；但也不能过低，以减少注入溶液的体积。26.09.202272现在学习的是第72页，共85页麻醉时需注意保温。麻醉期间，动物的体温调节机能往往受到抑制，出现体温下降，可影

46、响实验的准确性。此时常需采取保温措施。保温的方法有，实验桌内装灯，电褥，台灯照射等。无论用哪种方法加温都应根据动物的肛门体温而定。常用实验动物正常体温：猫为38.61.0，兔为38.41.0，大鼠为39.30.5。作作慢慢性性实实验验时时，在在寒寒冷冷冬冬季季，麻麻醉醉剂剂在在注注射射前前应应加加热热至动物体温水平。至动物体温水平。26.09.202273现在学习的是第73页，共85页第九节 处死方法当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的

47、选择取决于动物的种类与研究的课题。26.09.202274现在学习的是第74页，共85页一、蛙类 常常用用金金属属探探针针插插入入枕枕骨骨大大孔孔，破破坏坏脑脑脊脊髓髓的的方方法法处处死死。将将蛙蛙用用湿湿布布包包住住，露露出出头头部部，左左手手执执蛙蛙，并并用用食食指指按按压压其其头头部部前前端端，拇拇指指按按压压背背部部，使使头头前前俯俯；右右手手持持探探针针由由凹凹陷陷处处垂垂直直刺刺入入，刺刺破破皮皮肤肤即即入入枕枕骨骨大大孔孔。这这时时将将探探针针尖尖端端转转向向头头方方，向向前前深深入入颅颅腔腔，然然后后向向各各方方搅搅动动，以以捣捣毁毁脑脑组组织织。再再把把探探针针由由枕枕骨骨大

48、大孔孔刺刺入入并并转转向向尾尾方方，刺刺入入椎椎管管，以以破破坏坏脊脊髓髓。脑脑和和脊脊髓髓是是否否完完全全破破坏坏，可可检检查查动动物物四四肢肢肌肌肉肉的的紧紧张张性性是是否否完完全全消消失失。拔拔出出探探针针后后，用用一一小小干干棉棉球球将将针针孔孔堵堵住住，以以防防止止出出血血。操操作作过过程程中中要要防防止止毒毒腺腺分分泌泌物物射射入入实实验验者者眼眼内内。如如被被射射入入时时，则需立即用生理盐水冲洗眼睛。则需立即用生理盐水冲洗眼睛。26.09.202275现在学习的是第75页，共85页二、大鼠和小鼠二、大鼠和小鼠1.颈椎脱臼法：右手抓住鼠尾用力向后拉，同时左手拇指与食指用力向下按住鼠

49、头。将脊髓与脑髓拉断，鼠便立即死亡。2.断头法：用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉，鼠立即死亡。3.击打法：右手抓住鼠尾提起，用力摔击其头部，鼠痉挛后立即死去。或用木锤用力击打鼠头部也可致死。4.4.急急性性大大出出血血法法：可可采采用用鼠鼠眼眼眶眶动动脉脉和和静静脉脉急急性性大大量量失失血方法使鼠立即死亡。血方法使鼠立即死亡。5.药物致死法：吸入一定量的一氧化碳、乙醚、氯仿等均可使动物致死。26.09.202276现在学习的是第76页，共85页三、狗、兔、豚鼠三、狗、兔、豚鼠1.空气栓塞法：向动物静脉内注入一定量的空气，使之发生栓塞而死。当空气注入静脉后，可在右心随着心脏的跳动使空气与血液成泡沫状，随

50、血液循环到全身。如进到肺动脉，可阻塞其分支，进入心脏冠状动脉，造成冠状动脉阻塞，发生严重的血液循环障碍，动物很快致死。一般兔、猫等静脉内注入2040ml空气即可致死。每条狗由前肢或后肢皮下静脉注入80150ml空气，可很快致死。26.09.202277现在学习的是第77页，共85页2.2.急性失血法急性失血法 先使动物轻度麻醉，如狗可按每公斤体重静脉注射硫喷妥纳2030mg30mg，动动物物即即很很快快入入睡睡。暴暴露露股股三三角角区区，用用锋锋利利的的杀杀狗狗刀刀在在股股三三角角区区作作一一个个约约10cm10cm的的横横切切口口，把把股股动动、静静脉脉全全切切断断，立立即即喷喷出出血血液液