食品安全检测技术精选PPT讲稿.ppt
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1、关于食品安全关于食品安全检测技技术第一页,讲稿共五十三页哦2022/9/262内容内容第一节第一节 酶联免疫吸附测定法酶联免疫吸附测定法第二节第二节 分光光度法分光光度法第三节第三节 现场快速检测法现场快速检测法思考题思考题(色谱法、生物芯片技术、生物传感器技术(色谱法、生物芯片技术、生物传感器技术等,见等,见p.142-153p.142-153)第二页,讲稿共五十三页哦2022/9/263第一第一节 酶联免疫吸附免疫吸附测定法定法酶联免疫吸附测定法(酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked Enzyme-linked immunosorbent assayimmunosorbent a
2、ssay,ELISAELISA)是一种采用抗原)是一种采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应的定量测定技术。与底物产生颜色反应的定量测定技术。颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。正比。ELISAELISA检测仪。检测仪。酶化学反应的敏感性和酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应抗原抗体反应的特异性结的特异性结合,使合,使ELISAELISA法既特异又敏感。法既特异又敏感。第三页,讲稿共五十三页哦2022/9/264第一第一节 酶联免疫吸附免疫吸附测定法定法第四页,讲稿共五
3、十三页哦2022/9/265第一第一节 酶联免疫吸附免疫吸附测定法定法第五页,讲稿共五十三页哦2022/9/266第二第二节 分光光度法分光光度法一、白酒中甲醇的测定(品红亚硫酸比色法)一、白酒中甲醇的测定(品红亚硫酸比色法)原理:原理:酒中甲醇在磷酸溶液中被高锰酸钾氧化成甲醛;过量酒中甲醇在磷酸溶液中被高锰酸钾氧化成甲醛;过量的高锰酸钾及在反应中产生的二氧化锰用硫酸草酸的高锰酸钾及在反应中产生的二氧化锰用硫酸草酸溶液除去;甲醛与品红亚硫酸作用生成蓝紫色醌型溶液除去;甲醛与品红亚硫酸作用生成蓝紫色醌型色素,于其最大吸收波长色素,于其最大吸收波长590nm590nm下测吸光度值下测吸光度值A,A
4、,与标与标准系列比较定量。准系列比较定量。第六页,讲稿共五十三页哦2022/9/267第二第二节 分光光度法分光光度法一、白酒中甲醇的测定(品红亚硫酸比色法)一、白酒中甲醇的测定(品红亚硫酸比色法)步骤:步骤:1 1、根据待测白酒中含乙醇多少适当取样(含乙、根据待测白酒中含乙醇多少适当取样(含乙醇醇3030取取1.0ml1.0ml;4040取取0.8ml0.8ml;5050取取0.6ml0.6ml;6060取取0.5ml0.5ml)于)于25ml25ml比色管中。比色管中。2 2、精确吸取、精确吸取0.00.0、0.200.20、0.400.40、0.600.60、0.800.80、1.00m
5、l1.00ml甲醇标准应用液(相当于甲醇标准应用液(相当于0 0、0.20.2、0.40.4、0.60.6、0.80.8、1.0mg1.0mg甲醇)分别置于甲醇)分别置于25ml25ml比色管中,各加入比色管中,各加入0.3ml0.3ml无甲醇无甲醛的乙醇。无甲醇无甲醛的乙醇。第七页,讲稿共五十三页哦2022/9/268第二第二节 分光光度法分光光度法一、白酒中甲醇的测定(品红亚硫酸比色法)一、白酒中甲醇的测定(品红亚硫酸比色法)步骤:步骤:3 3、于样品管及标准管中各加水至、于样品管及标准管中各加水至5ml5ml,混匀,各管,混匀,各管加入加入2ml2ml高锰酸钾磷酸溶液,混匀,放置高锰酸钾
6、磷酸溶液,混匀,放置10min10min。4 4、各管加、各管加2ml2ml草酸硫酸溶液,混匀后静置,草酸硫酸溶液,混匀后静置,使溶液褪色。使溶液褪色。5 5、各管再加入、各管再加入5ml5ml品红亚硫酸溶液,混匀,于品红亚硫酸溶液,混匀,于2020以上静置以上静置0.5h0.5h。6 6、以、以0 0管调零点,于管调零点,于590nm590nm波长处测吸光度,与标波长处测吸光度,与标准曲线比较定量。准曲线比较定量。第八页,讲稿共五十三页哦2022/9/269第二第二节 分光光度法分光光度法二、食品中亚硝酸盐的测定二、食品中亚硝酸盐的测定原理:原理:在弱酸条件下样品中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮
7、在弱酸条件下样品中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料,化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料,于其最大吸收波长于其最大吸收波长538nm538nm下测吸光度值下测吸光度值A,A,与标准与标准系列比较定量。系列比较定量。第九页,讲稿共五十三页哦2022/9/2610第二第二节 分光光度法分光光度法二、食品中亚硝酸盐的测定二、食品中亚硝酸盐的测定步骤:步骤:1 1、样品的处理:、样品的处理:(1 1)取样:准确称取)取样:准确称取5.0 g5.0 g经绞碎、混匀的样品,经绞碎、混匀的样品,置于置于50mL50mL烧杯中。烧杯中。(2 2)沉淀蛋白质:)沉淀蛋白
8、质:加加12.5mL12.5mL硼砂饱和溶液,搅硼砂饱和溶液,搅拌均匀,以拌均匀,以7070左右的水约左右的水约300mL300mL将样品洗入将样品洗入500mL500mL容量瓶中,置沸水浴中加热容量瓶中,置沸水浴中加热15min15min,取出后冷却至,取出后冷却至室温。室温。一面转动一面加入一面转动一面加入5mL5mL亚铁氰化钾溶液,亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入摇匀,再加入5mL5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。第十页,讲稿共五十三页哦2022/9/2611第二第二节 分光光度法分光光度法二、食品中亚硝酸盐的测定二、食品中亚硝酸盐的测定1 1、样品的处理:、样品的处
9、理:(3 3)过滤:加水定容,放置)过滤:加水定容,放置0.5h0.5h,除去上层脂肪,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤,弃去清液用滤纸过滤,弃去初滤液初滤液30mL30mL,滤液备用。,滤液备用。2 2、标准曲线的绘制和样品的测定、标准曲线的绘制和样品的测定取样品取样品20 ml20 ml于于25ml25ml比色管中;比色管中;精确移取精确移取0.00.0、0.100.10、0.300.30、0.500.50、0.750.75、1.25ml1.25ml亚硝酸钠标准溶液(亚硝酸钠标准溶液(0.20 g/ml0.20 g/ml)分别置于分别置于25ml25ml比色管中;比色管中;第十一页,讲稿共五十
10、三页哦2022/9/2612第二第二节 分光光度法分光光度法二、食品中亚硝酸盐的测定二、食品中亚硝酸盐的测定2 2、标准曲线的绘制和样品的测定、标准曲线的绘制和样品的测定各管加入各管加入1 ml1 ml对氨基苯磺酸溶液(对氨基苯磺酸溶液(4.0 g/ml4.0 g/ml),混),混匀,静置匀,静置3-5min3-5min;各管加入各管加入0.5 ml0.5 ml盐酸萘乙二胺溶液(盐酸萘乙二胺溶液(2.0 g/ml2.0 g/ml),),加水至刻度(加水至刻度(25 ml)25 ml),混匀,静置,混匀,静置15min15min,以,以0 0管管调节零点,于波长调节零点,于波长538nm538n
11、m处测吸光度处测吸光度A A,与标准曲线,与标准曲线比较定量。比较定量。第十二页,讲稿共五十三页哦2022/9/2613一、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快一、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测速检测原理:原理:胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程碱脂酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有发生改变,由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸脂类农药的存在
12、。机磷或氨基甲酸脂类农药的存在。第三第三节 现场快速快速检测法法第十三页,讲稿共五十三页哦2022/9/2614一、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的一、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测快速检测第三第三节 现场快速快速检测法法第十四页,讲稿共五十三页哦2022/9/2615第三第三节 现场快速快速检测法法使用方法使用方法:整体测定法整体测定法1、选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪、选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土,剪成成1cm左右见方碎片,取左右见方碎片,取5g放入带盖瓶中,加入放入带盖瓶中,加入10mL纯净水或缓冲溶液,震摇纯净水或缓冲溶液,震摇50次,静置次,静
13、置2min以以上。上。2、取一片速测卡,撕去上盖膜,用白色药片沾取提、取一片速测卡,撕去上盖膜,用白色药片沾取提取液,放置取液,放置10min以上进行预反应,有条件时,在以上进行预反应,有条件时,在37恒温装置中放置恒温装置中放置10min。预反应后的药片表面必。预反应后的药片表面必须保持湿润。须保持湿润。第十五页,讲稿共五十三页哦2022/9/2616第三第三节 现场快速快速检测法法使用方法使用方法:3、将速测卡对折,用手捏、将速测卡对折,用手捏3min或用恒温装置恒温或用恒温装置恒温3min,使红色药片与白色药片叠合发生反应。根,使红色药片与白色药片叠合发生反应。根据白色药品的颜色变化判读
14、结果。据白色药品的颜色变化判读结果。4、每批测定应设一个纯净水或缓冲液的空白对照卡。、每批测定应设一个纯净水或缓冲液的空白对照卡。第十六页,讲稿共五十三页哦2022/9/2617一、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快一、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测速检测表面测定法表面测定法(粗筛法)(粗筛法)1 1、擦去蔬菜表面泥土,滴、擦去蔬菜表面泥土,滴2-32-3滴洗脱液在蔬菜表面,滴洗脱液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。2 2、取一片速测卡,撕去上盖膜,将蔬菜上的液滴、取一片速测卡,撕去上盖膜,将蔬菜上的液滴滴在白色药片上。滴在白色药片上
15、。3 3、放置、放置10min10min以上进行预反应,有条件时,在以上进行预反应,有条件时,在3737恒温装置中放置恒温装置中放置10min10min。预反应后的药片表面必。预反应后的药片表面必须保持湿润。须保持湿润。第三第三节 现场快速快速检测法法第十七页,讲稿共五十三页哦2022/9/2618一、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速一、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测检测表面测定法表面测定法(粗筛法)(粗筛法)4 4、将速测卡对折,用手捏、将速测卡对折,用手捏3min3min或用恒温装置恒或用恒温装置恒温温3min3min,使红色药片,使红色药片与白色药片叠合发生反与
16、白色药片叠合发生反应。根据白色药品的颜应。根据白色药品的颜色变化判读结果。色变化判读结果。5 5、每批测定应设一个、每批测定应设一个洗脱液的空白对照卡。洗脱液的空白对照卡。第三第三节 现场快速快速检测法法第十八页,讲稿共五十三页哦2022/9/2619二、硝酸盐快速检测试纸二、硝酸盐快速检测试纸原理:原理:在弱酸条件下样品中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重在弱酸条件下样品中亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料。染料。第三第三节 现场快速快速检测法法第十九页,讲稿共五十三页哦2022/9/2620第三第三节 现场快速快速检测法法第二
17、十页,讲稿共五十三页哦2022/9/2621三、黄曲霉毒素三、黄曲霉毒素B1B1检测卡检测卡第三第三节 现场快速快速检测法法第二十一页,讲稿共五十三页哦2022/9/2622三、黄曲霉毒素三、黄曲霉毒素B1B1检测卡检测卡第三第三节 现场快速快速检测法法第二十二页,讲稿共五十三页哦2022/9/2623三、黄曲霉毒素三、黄曲霉毒素B1B1检测卡检测卡第三第三节 现场快速快速检测法法第二十三页,讲稿共五十三页哦第四第四节节 其他其他仪仪器器检测检测法法第二十四页,讲稿共五十三页哦仪仪器器检检测测技技术术痕量无机物定量痕量无机物定量电感耦合等离子体质谱电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)原子发射光
18、谱(原子发射光谱(AES)原子吸收光谱(原子吸收光谱(AAS)毛细管电泳毛细管电泳质谱(质谱(CE-MS)气相色谱气相色谱串联质谱串联质谱(GC-MS/MS)色色谱谱质质谱谱联联用用高效液相色谱高效液相色谱串联质谱(串联质谱(LC-MS/MS)高效液相色谱高效液相色谱质谱(质谱(LC-MS)气相色谱气相色谱质谱质谱(GC-MS)色谱色谱液相色谱液相色谱气相色谱气相色谱第四节第四节其他仪器检测法其他仪器检测法第四第四节 其他其他仪器器检测法法第二十五页,讲稿共五十三页哦高选择性高选择性分离单组份定性定量分离单组份定性定量高效能高效能高灵敏度高灵敏度检出限量低至检出限量低至10-1lg的物质,适于
19、微量和痕量分析。的物质,适于微量和痕量分析。色谱法的特点色谱法的特点色谱法的特点色谱法的特点第二十六页,讲稿共五十三页哦气相色谱分析气相色谱分析系统构成系统构成气路系统,进样系统,分离系统,检测系统气路系统,进样系统,分离系统,检测系统工作原理工作原理 样品高温瞬间汽化样品高温瞬间汽化-色谱柱分离色谱柱分离-检测检测适用适用 易挥发的小分子有机物易挥发的小分子有机物 难挥发性成分经衍生化检测难挥发性成分经衍生化检测第二十七页,讲稿共五十三页哦气相色谱气相色谱-分离系统分离系统色谱柱色谱柱填充柱,毛细管柱填充柱,毛细管柱色谱柱选择:色谱柱选择:按样品极性按样品极性 弱极性样品,可选弱极性样品,可
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