药物杂质检查课件.ppt

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1、药物物杂质检查第1页，此课件共95页哦第一节第一节 纯度与杂质纯度与杂质第2页，此课件共95页哦 药物的纯度药物的纯度指药物纯净程度，反映药物质量的优劣影响药物纯度的主要因素 杂质控制药物纯度的主要方法 杂质检查药物纯度的综合评价：药物性状、理化常数 杂质检查、含量测定第3页，此课件共95页哦 杂杂质质1.Impurities1.Impurities，这样一类物质：，这样一类物质：有毒副作用 无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效 无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但无治疗作用第4页，此课件共95页哦 生产过程中引入：生产过程中引入：合成药的生产过程中合成药的生产过程中 未反应完全的原料、

2、反应中间体、副产物药物制剂的生产过程中药物制剂的生产过程中 水解、氧化等引入杂质引入溶剂、酸碱性试剂、催化剂等引入溶剂、酸碱性试剂、催化剂等从使用的金属工具中引入金属杂质从使用的金属工具中引入金属杂质生产条件不当，引入低效、无效的药物异构体生产条件不当，引入低效、无效的药物异构体或晶型或晶型2.2.杂质的来源杂质的来源第5页，此课件共95页哦 贮藏过程中引入：贮藏过程中引入：水解、氧化水解、氧化、霉变、异构化、晶型改变药品保管不善或贮藏时间过长，会受外界条件的影响或微生物的作用杂质第6页，此课件共95页哦 易发生水解反应的结构：易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等易发生氧化反应

3、的结构：易发生氧化反应的结构：醛、酚羟基、醚、巯基、亚硝基、双键等第7页，此课件共95页哦 3.3.杂质的种类杂质的种类按杂质存在的广泛度分按杂质存在的广泛度分:一般杂质、特殊杂质按杂质的结构分按杂质的结构分:无机杂质、有机杂质按性质分按性质分:信号杂质、有害杂质第8页，此课件共95页哦 4.4.杂质的限量杂质的限量 含义：含义：在不影响药物的疗效和不产生毒性的情况下，药物中可允许的杂质量。即药物中允许杂质存在的最大量，常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。杂质限量的确定：杂质限量的确定：综合考虑杂质的性质、生产所能达到的实际水平和各国药典的标准。第9页，此课件共95页哦 杂质的限量检查：

4、杂质的限量检查：不要求测定杂质的含量，只需检查杂质是否超过限量。杂质限量检查方法：杂质限量检查方法：比较法比较法 取一定量被检杂质的标准溶液与一定量供试品在相同条件下处理后，比较反应结果。特点：注意“平行操作”，不需知道杂质的准确含量第10页，此课件共95页哦 灵敏度控制法灵敏度控制法 在供试品溶液中加入试剂，一定条件下反应后，观察有无正反应出现。以不出现正反应为合格。特点：不需对照品（标准溶液）第11页，此课件共95页哦 限量计算限量计算 杂质限量=(杂质最大允许量/供试品量)100%比较法:杂质限量=(标准溶液的浓度标准溶液的体积)/供试品量100%第12页，此课件共95页哦 杂质量杂质量

5、 杂质限量杂质限量 杂质量杂质量药品合格药品合格药品不合格药品不合格第13页，此课件共95页哦 药用规格药用规格 符合纯度要求的药品 只有两个等级：合格、不合格 严格控制对生物体产生毒副作用或 生理作用的杂质第14页，此课件共95页哦 试剂规格试剂规格符合纯度要求的化学试剂多等级控制对试剂的使用目的有影响的杂质未考虑那些可能对生物体产生毒副作用或生理作用的杂质试剂规格的化学试剂不允许代替药用规格的药品使用第15页，此课件共95页哦第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法第16页，此课件共95页哦（一）原理（一）原理 药物：对照：（二）方法（二）方法 一.氯化物检查法第17页，此课件共

6、95页哦1.1.反应试剂反应试剂：2.2.标准溶液标准溶液：每1ml相当于10g的Cl-适宜比浊浓度：50-80g Cl-/50ml3.3.反应介质反应介质：硝酸可溶解Ag2CO3、Ag3PO4和Ag2O沉淀，消除其干扰；加速AgCl沉淀的生成（三）方法讨论（三）方法讨论AgNO3试液标准NaCl溶液硝酸酸性溶液第18页，此课件共95页哦4.4.观察背景及方法观察背景及方法 黑色，从比色管上方向下观察。5.5.其他其他 避光操作：避光操作：观察前，于暗处放置5min 避免Ag+析出单质Ag （氯化银见光易分解）第19页，此课件共95页哦（四）供试品的特殊处理（四）供试品的特殊处理1 1供试液混

7、浊供试液混浊 用滤纸滤过；滤纸中的氯化物先用含硝酸的水洗净第20页，此课件共95页哦2 2供试液有颜色供试液有颜色改变对照溶液的制法：供试液1份，加入AgNO3 试液，摇匀，放置，反复过滤至滤液澄清；再加入规定量标准NaCl液与水适量。排除颜色干扰：如高锰酸钾中的氯化物检查：先加乙醇适量，使高锰酸钾还原褪色后，再检查。第21页，此课件共95页哦3 3供试液含碘化物或本身为碘化物供试液含碘化物或本身为碘化物氧化还原反应排除法（H2O2/H+)沉淀滤过法：AgI不溶于氨水，AgCl和AgBr溶于氨水4 4不溶于水的有机药物不溶于水的有机药物加水振摇，使氯化物溶解，滤出药物等 不溶物后检查。加热溶解

8、供试品，放冷，析出沉淀，滤过后检查。第22页，此课件共95页哦5 5供试品含有机氯杂质供试品含有机氯杂质氯代脂烃或氯在环的侧链上：碱性溶液中加热水解成Cl-，再检查。氯连接于苯环上：经有机破环，变成无机氯化物，再检查。第23页，此课件共95页哦（一）原理（一）原理 药物：对照：（二）方法（二）方法 二.硫酸盐检查法第24页，此课件共95页哦1.1.反应试剂：反应试剂：2.2.标准溶液：标准溶液：每1ml相当于100g的SO42-适宜比浊浓度：100-500g SO42-/50ml 3.3.反应介质：反应介质：盐酸溶解BaCO3,Ba3(PO4)2沉淀，消除干扰。4.4.观察背景及方法：观察背景

9、及方法：同氯化物（三）方法讨论（三）方法讨论BaCl2试液标准K2SO4溶液盐酸酸性溶液第25页，此课件共95页哦l供试液混浊供试液混浊过滤 滤纸需用含盐酸的水洗净滤纸中的硫酸盐l供试液有颜色等供试液有颜色等:处理方法同氯化物（四）供试品的特殊处理（四）供试品的特殊处理第26页，此课件共95页哦 1.1.原理原理 药物：对照：2.2.方法方法 三.铁盐检查法（一）硫氰酸盐法（一）硫氰酸盐法（Chp、USP）第27页，此课件共95页哦 1)1)反应试剂：反应试剂：硫氰酸铵 NH4(SCN）2)2)标准溶液：标准溶液：硫酸铁铵硫酸铁铵 FeNH4(SO4)212H2O配制，同时加入硫酸硫酸防止铁盐

10、水解。每ml标准铁溶液相当于10g Fe3+适宜目视比色浓度：10-50g Fe3+/50ml3)3)反应介质：反应介质：盐酸酸性溶液，可防止Fe3+水解3.方法讨论方法讨论第28页，此课件共95页哦 4)4)观察方法观察方法5)5)其他其他加入氧化剂加入氧化剂过硫酸铵过硫酸铵的作用：的作用：将Fe2+氧化成Fe3+防止光线将硫氰酸铁离子还原或分解褪色加硝酸也可氧化Fe2+为Fe3+，但须加热除去HNO2 Because:HNO2+SCN-+H+NO.SCN+H2O红色第29页，此课件共95页哦l硫氰酸铵应过量硫氰酸铵应过量使可逆反应向右进行，增加配位离子的稳定性，提高反应的灵敏度。消除其它阴

11、离子与铁盐形成配位化合物而引起的干扰。第30页，此课件共95页哦 l供试品溶液与对照溶液色调不一致，或硫氰酸铁配供试品溶液与对照溶液色调不一致，或硫氰酸铁配位离子呈色较浅：位离子呈色较浅：可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分取醇层比色。l具环状结构的有机药物：具环状结构的有机药物：需经炽灼破坏处理后，再依法检查。l干扰离子的影响干扰离子的影响4供试品的特殊处理供试品的特殊处理第31页，此课件共95页哦 l原理：原理：（二）巯基醋酸法（二）巯基醋酸法（Bp）第32页，此课件共95页哦 l讨论讨论 枸橼酸溶液的作用：与铁离子形成配位离子，防止在氨碱性溶液中产生Fe(OH)2和Fe(OH)

12、3沉淀。第33页，此课件共95页哦 1.适用对象适用对象四.重金属检查法（一）硫代乙酰胺法（一）硫代乙酰胺法 弱酸性水溶液中，供试液澄清、无色、对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。药物：药物：对照：对照：2.原理原理黄色-棕黑色第34页，此课件共95页哦 1 1）反应试剂：反应试剂：2 2）标准溶液：标准溶液：配成贮备液，临用前稀释成10g Pb2+/ml的溶液适宜目视比色浓度：10-20 g Pb2+/27ml3.方法方法4.方法讨论方法讨论3 3）反应介质：反应介质：弱酸性溶液，即 pH 3.5醋酸盐溶液pH 3.0-3.5时，PbS较完全酸度增加，呈色变浅甚至不显色4 4）观察背景

13、及方法观察背景及方法硫代乙酰胺的弱酸性溶液Pb(NO3)2溶液溶液第35页，此课件共95页哦 1 1）供试品有色）供试品有色对照溶液管用稀焦糖溶液调色，使之与供试品溶液颜色一致。改变对照溶液的制法 加硫代乙酰胺试液，除去生成的PbS沉淀，再加标准Pb(NO3)2。改用第四法：微孔滤膜过滤法5供试品的供试品的特殊特殊处理处理第36页，此课件共95页哦 有微量Fe3+存在氧化H2S,析出S,产生混浊，影响比色。除去方法：加还原剂，Fe3+Fe+供试品为铁盐：Fe3+在盐酸中生成HFeCl62-，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法检查。2 2）供试品中有干扰物存在）

14、供试品中有干扰物存在供试品本身能生成不溶性硫化物 如葡萄糖酸锑钠中铅盐的检查，先加10%氢氧化钠试液和氰化钾试液，再用第三法检查。Sb3+Sb(CN)63-第37页，此课件共95页哦 1适用对象适用对象难溶于水、乙醇、稀酸及碱性水溶液的药物（药物沉淀，干扰）能与重金属离子形成配位化合物的有机药物（重金属离子不能游离）含芳环、杂环的有机药物(二二)炽灼破坏法炽灼破坏法第38页，此课件共95页哦2原理原理 将供试品炽灼破坏后，加硝酸加热处理，使有机药物分解，重金属与盐酸形成氯化物，再按第一法检查。第39页，此课件共95页哦 3方法方法第40页，此课件共95页哦 u炽灼温度应控制在500-600；u

15、炽灼残渣加硝酸处理后，必须蒸干，除尽NO，否则HNO2氧化H2S析出硫，影响比色。u含钠及氟的有机药物用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（可腐蚀瓷坩埚，带入大量重金属）4.方法讨论方法讨论第41页，此课件共95页哦 1.适用对象适用对象（三）硫化钠法（三）硫化钠法 适用于溶于碱性水溶液而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。药物：药物：对照：对照：2.原理原理3.方法方法4.方法讨论方法讨论反应试剂：硫化钠反应介质：NaOH碱性溶液第42页，此课件共95页哦 1.适用对象适用对象（四）微孔滤膜法（四）微孔滤膜法 重金属限量很低的药物。依一法检查，重金属生成的硫化物富集于微孔滤

16、膜上比较供试品和一定量标准铅溶液同法处理后产生的色斑深浅。2.原理原理第43页，此课件共95页哦 五砷盐检查法1.适用对象适用对象（一）古蔡氏法（一）古蔡氏法适用于不含Sb或含Sb量小于100g的供试品。遇溴化汞试纸产生黄色-棕色砷斑，与一定量标准砷溶液生成的砷斑比较，不得更深。2.原理原理第44页，此课件共95页哦 1）反应试剂）反应试剂2）标准溶液）标准溶液As2O3溶液,临用前稀释成1g As/ml 的标准砷溶液。ChP 规定：标准砷斑采用2ml标准砷溶液制备。3）反应介质）反应介质盐酸酸性溶液3.方法方法4.方法讨论方法讨论第45页，此课件共95页哦 4）其他）其他控制氢气发生的速度：

17、控制氢气发生的速度：过快，过快，AsHAsH3 3逸出快逸出快 过慢，过慢，AsHAsH3 3逸出慢逸出慢溶液的酸度 锌粒的粒度和用量 反应温度影响砷斑的色泽和清晰度可控制氢气发生的速度第46页，此课件共95页哦 l碘化钾与酸性氯化亚锡的作用碘化钾与酸性氯化亚锡的作用将5价砷还原为3价砷增加AsH3的生成速度抑制SbH3的生成，防止形成锑斑,干扰测定使氢气均匀而连续地发生 醋酸铅棉花的作用醋酸铅棉花的作用吸收硫化氢（锌粒和供试品含少量硫化物）棉花填充的松紧度：60-80mg 填充60-80mm 导气管和溴化汞试纸应保持干燥，砷斑应避光，导气管和溴化汞试纸应保持干燥，砷斑应避光，并立即与标准砷斑

18、比较。并立即与标准砷斑比较。（砷斑不稳定）砷斑不稳定）第47页，此课件共95页哦 第48页，此课件共95页哦 lFe3+氧化AsH3及KI和SnCl2，干扰测定。l先加酸性氯化亚锡试液，将Fe3+Fe2+5供试品的特殊处理供试品的特殊处理1）含硫药物）含硫药物 药物药物:硫化物，亚硫酸盐，硫代硫酸盐等用HNO3处理，将药物氧化成硫酸盐，去除干扰。2）含）含Fe3+药物药物第49页，此课件共95页哦 锑盐被还原为锑化氢，与溴化汞试纸作用，产生灰色锑斑，干扰砷斑。改用白田道夫白田道夫法检查：2As2As3+3+3SnCl+3SnCl2 2+6HCl +6HCl 2As(2As(棕褐色棕褐色,胶态胶

19、态)+3SnCl)+3SnCl4 4+6H+6H+与一定量标准砷溶液经同法处理后的颜色进行比较，不得更深。3）含锑药物）含锑药物第50页，此课件共95页哦 红色，胶态红色，胶态三乙胺三乙胺1.原理原理（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法silverdiethyldithiocarbamate,Ag(DDC)AsH3的产生同古蔡法 AsH3+6Ag(DDC)As(DDC)3+6Ag+3HDDC第51页，此课件共95页哦 2方法方法用目视法或在510nm波长处测定吸收度，与一定量标准砷溶液经同法处理后得到的有色溶液进行比较。第52页，此课件共95页哦检查药物中的检查药物中的

20、有色杂质有色杂质检查药物中遇检查药物中遇硫酸易碳化硫酸易碳化或或易氧化呈色易氧化呈色的有机杂质的有机杂质检查药物中的检查药物中的不溶性杂质不溶性杂质用作用作注射剂注射剂的原料药一般应作此项检查的原料药一般应作此项检查七易碳化物检查法七易碳化物检查法八澄清度检查法八澄清度检查法六六.溶液颜色检查法溶液颜色检查法第53页，此课件共95页哦检查有机药物或挥发性无机药物中的非挥发性无机杂质（金属氧化物或盐类）炽灼残渣炽灼残渣：非挥发性无机杂质的硫酸盐。又称硫酸灰分硫酸灰分炽灼温度：炽灼温度：700-800oC 炽灼残渣若留作重金属检查时，必须 控制在500-600oC九炽灼残渣检查法第54页，此课件共

21、95页哦常见残留有机溶剂：常见残留有机溶剂：苯、四氯化碳、二氯乙烷、二氯乙烯、三氯乙烷GCGC法测定法测定 顶空进样顶空进样：适用于挥发性大的组分分析；样品不需萃取、浓集等步骤，且可避免非挥发性组分对色谱柱的污染。十.残留溶剂测定第55页，此课件共95页哦 十一十一.干燥失重测定法干燥失重测定法 常压恒温干燥法 干燥剂干燥法 减压干燥法 热分析法-水分，其它挥发性物质第56页，此课件共95页哦 u 适用对象适用对象 受热较稳定的药物u 干燥温度干燥温度一般105 oC含较多结晶水的药物:提高温度含水较多且熔点较低的药物：先低温下加热，再逐渐升温至105oCu 干燥时间干燥时间 干燥至恒重为止（

22、一）常压恒温干燥法（一）常压恒温干燥法第57页，此课件共95页哦 适用对象适用对象 受热分解或易于挥发的药物 干燥剂干燥剂变色硅胶:含氯化钴 五氧化二磷：贵，不能反复使用浓硫酸（二）干燥剂干燥法（二）干燥剂干燥法第58页，此课件共95页哦 适用对象适用对象 熔点低、受热不稳定或难驱除水分的药物 优点优点 可降低干燥温度，缩短干燥时间（三）减压干燥法（三）减压干燥法第59页，此课件共95页哦 什么是热分析？什么是热分析？在程序控温下，测定物质的物理或化学变化与温度关系的一类仪器分析方法。（四）热分析法（四）热分析法常用方法：常用方法：热重分析法 thermogravimetric analysi

23、s,TGA差示热分析法 differential thermal analysis,DTA差示扫描量热法 differential scanning calorimetry,DSC第60页，此课件共95页哦 u在药物分析中的作用：测定药物的干燥失重测定药物的干燥失重（TGA)TGA)测定药物的物理常数（如熔点）测定药物的物理常数（如熔点）对药物进行对药物进行晶型鉴别晶型鉴别和和纯度检查纯度检查用于药物的稳定性研究及制剂辅料的优选第61页，此课件共95页哦 热重分析法热重分析法u含义：在程序控温下，测量物质的质量质量与温温度度关系的热分析法。u仪器：热重分析仪 主要部件：程序升温炉中的微量分析天

24、平。其稳定性不受温度影响。天平在惰性气流惰性气流下使用。第62页，此课件共95页哦 u特点样品用量少，速度快。适用于贵重药物或在空气中易被氧化药物的干燥失重测定。u热重曲线 纵坐标:样品的质量 横坐标:温度或加热时间微商热重曲线：dm/dtT第63页，此课件共95页哦 m第64页，此课件共95页哦 差示热分析法差示热分析法u含义：在程序控温下，测量供试品与参比物间的温度差温度差与温度温度（或加热时间）关系的热分析法。参比物：惰性,加热时不发生相变和化学变化 与被测物质有相似的热容热容 煅烧过的AI2O3、MgO、石英砂 热容Q：物体温度升高1需吸收的热量 Q=比热物质量第65页，此课件共95页

25、哦 uDTA曲线吸热峰吸热峰：倒峰放热峰：正峰发生物理变化，常得到尖峰；发生化学变化，常得到较宽的峰。第66页，此课件共95页哦 差示扫描量热法差示扫描量热法u 程序控温下，测量维持供试品与参比物的温度相同，系统所需输给样品和参比物的能量差随温度（或加热时间）变化的热分析法。能量差能量差:相当于供试品发生物理或化学变化时所吸收或释放的能量，即焓变。DSC曲线纵坐标：热流率mJ/s，热量/加热时间，dH/dt横坐标：温度或加热时间放热峰：倒峰 吸热峰：正峰含义：第67页，此课件共95页哦 u DSC和和DTA的作用的作用1.药物晶型的鉴别药物晶型的鉴别依据：峰的位置、数目、形状 例 图3-6a、

26、b2.药物的纯度检查药物的纯度检查l依据：依据：药品的纯度降低 熔点，熔距 第68页，此课件共95页哦 第69页，此课件共95页哦 l 杂质限量检查：杂质限量检查：将样品的将样品的DSC(DTA)曲线与标准样品（含限量杂曲线与标准样品（含限量杂质的样品）的曲线进行比较。质的样品）的曲线进行比较。l 测定药物中存在的杂质含量：测定药物中存在的杂质含量：X2:杂质的摩尔分数杂质的摩尔分数 T0:纯药物的熔点纯药物的熔点 Tm:供试品的熔点供试品的熔点 :药物的摩尔熔化热药物的摩尔熔化热第70页，此课件共95页哦 l什么情况下，什么情况下，DSC、DTA可用于检查药物的纯可用于检查药物的纯度呢？度呢

27、？前提：前提：杂质的量小；杂质与药物形成低共熔混合物低共熔混合物，不形成固态溶液固态溶液。第71页，此课件共95页哦 热重分析仪热重分析仪第72页，此课件共95页哦 热重分析仪热重分析仪第73页，此课件共95页哦 综合热分析系统综合热分析系统第74页，此课件共95页哦第三节第三节 特殊杂质检查方法特殊杂质检查方法第75页，此课件共95页哦 利用药物和杂质在利用药物和杂质在物理物理性质上的性质上的差异差异 利用药物和杂质在利用药物和杂质在化学化学性质上性质上的差异的差异（自学）第76页，此课件共95页哦 u旋光性：旋光性：u旋光度、比旋度：旋光度、比旋度：受温度温度及光源波长波长的影响u杂质限度

28、检查杂质限度检查药物有旋光性：规定比旋度范围药物没有旋光性：规定比旋度一定值物理性质差异（一）旋光性质的差异（一）旋光性质的差异第77页，此课件共95页哦 固体样品（配成溶液）：C：g/100ml(按干燥品或无水物计算)液体样品：d:液体的相对密度u 旋光法定量依据旋光法定量依据第78页，此课件共95页哦 某波长处，杂质有最大吸收，而药物无吸收 控制供试品溶液在此波长处的吸收度一定值某波长处，药物有最大吸收，而杂质无吸收 控制供试品溶液在此波长处的吸收度大小杂质与药物的UV重叠 控制供试品溶液在两波长处的吸收度比值（二）对光吸收性质的差异（二）对光吸收性质的差异1 1UVUV法法第79页，此课

29、件共95页哦 主要用于药物中无效或低效晶型的检查晶型不同，IR会有区别 2 2红外分光光度法红外分光光度法3 3荧光分析法荧光分析法4 4原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法第80页，此课件共95页哦 u 杂质对照品法u 供试品自身对照法u 杂质对照品法与供试品自身对照法并用u 对照药物法（三）吸附或分配性质的差异（三）吸附或分配性质的差异1 1TLCTLC法法第81页，此课件共95页哦杂质对照品法适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况方法：供试品溶液 杂质对照品溶液 供试品中所含杂质的斑点颜色，不得深于相应杂质的对照斑点（主斑点）颜色点于同一薄层板同一薄层板上分析第82页，此课件共95页哦n

30、适于杂质结构不确定或无杂质对照品的情况n要求：药物和杂质对显色剂显相同的颜色，且显色灵敏度相同或相近.n方法：对照溶液：供试品溶液的稀溶液供试品溶液所显杂质斑点不得深于 对照溶液的主斑点颜色。当供试品中有多个杂质存在时，可配制几种限量的对照品溶液，进行比较（p55）。供试品自身对照法第83页，此课件共95页哦适用于无杂质对照品，且杂质斑点颜色与药物斑点颜色不相同的情况用与供试品相同的药物作对照品，此对照药物中的待检杂质符合限量要求，且稳定。判断方法：供试品溶液如显杂质斑点，不得多于对照药物中杂质斑点数，颜色也不得更深。对照药物法第84页，此课件共95页哦 适用于极性较大药物的分离分析2 2纸色

31、谱法纸色谱法第85页，此课件共95页哦 峰面积归一化法峰面积归一化法不加校正因子的主成分自身对照法不加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法内标校正因子法内标校正因子法外标法外标法 3 3HPLCHPLC法法第86页，此课件共95页哦用于粗略考察供试品中的杂质（限量检查）方法：供试品溶液进样分析，计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率，不得超过限量缺点：杂质的吸收程度与药物不一致时，误差较大;一般不宜用于微量杂质的检查 峰面积归一化法第87页，此课件共95页哦u 用于无杂质对照品的情况（限量检查）u 要求：杂质结构与主成分结构相似 此时杂质与主成

32、分的响应因子基本相同。不加校正因子的主成分自身对照法方法：对照溶液：供试品溶液的稀释液供试品溶液各杂质峰面积及其总和,与对照溶液主成分的峰面积比较常以不超过主成分峰面积的x%控制杂质限量第88页，此课件共95页哦用于有杂质对照品的情况（限量检查和含量测定）杂质对照品：用于测定校正因子类似于“内标校正因子法”，药物对照品相当于内标。对照溶液：供试品溶液的稀释液加校正因子的主成分自身对照法第89页，此课件共95页哦 S 代表药物对照品 R 代表杂质对照品l按内标法求出杂质相对于主成分的校正因子按内标法求出杂质相对于主成分的校正因子：l 限量检查限量检查：将供试品溶液的各杂质峰面积，分别乘以 相应的

33、校正因子后，与对照溶液主成分的 峰面积进行比较。第90页，此课件共95页哦 ：药物对照品的峰面积 ：药物对照品的浓度l 计算各杂质含量计算各杂质含量:l 考虑到：考虑到：杂质与主成分的结构差异较大杂质与主成分的结构差异较大 ,响应因子可能不同所引起的测定误差响应因子可能不同所引起的测定误差 第91页，此课件共95页哦 实例红霉素A是红霉素的主要活性物质，红霉素B和C是红霉素的杂质，其中红霉素C是主要杂质，毒性比红霉素A大2倍，活性仅为红霉素A的20。中国药典（2005年版）采用此法检查红霉素B、C组分及有关物质。供试品溶液的浓度为4mg/ml，将供试品溶液稀释成浓度为0.2mg/ml的溶液为对

34、照溶液,用对照溶液调节检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20，分别进样供试品溶液和对照溶液，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍。第92页，此课件共95页哦红霉素B峰和红霉素C峰校正后的峰面积（红霉素A、红霉素B、红霉素C的校正因子分别为1.0、0.7、1.0）均不得大于对照溶液主峰面积（5.0）红霉素烯醇醚校正后的峰面积（红霉素烯醇醚的校正因子为0.09）不得大于对照溶液主峰面积的3/5（3.0）其他单个杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积（5.0）第93页，此课件共95页哦用于有杂质对照品的情况（用于有杂质对照品的情况（含量测定含量测定）杂质对照品：用于测定校正因子杂质对照品：用于测定校正因子内标：药物和杂质以外的化合物内标：药物和杂质以外的化合物杂质含量：杂质含量：S 代表内标 R 代表杂质对照品内标校正因子法第94页，此课件共95页哦用于有杂质对照品的情况（含量测定）外标法中的外标一点法。p58 for example p58 for example外标法第95页，此课件共95页哦