医院环境微生物 (2)讲稿.ppt

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1、关于医院关于医院环境微生物境微生物(2)第一页，讲稿共七十六页哦Page 2主要内容主要内容第一节第一节 医院环境生境特征医院环境生境特征（掌握）（掌握）第二节第二节 医院环境微生物的特点、来源、种类、分布及卫生意义医院环境微生物的特点、来源、种类、分布及卫生意义（熟悉熟悉）第三节第三节 医院环境微生物的检验及卫生标准医院环境微生物的检验及卫生标准（熟悉）（熟悉）第四节第四节 医院环境微生物污染的预防与控制技术医院环境微生物污染的预防与控制技术（了解）（了解）第五节第五节 医院环境微生物的研究前景医院环境微生物的研究前景（了解）（了解）第二页，讲稿共七十六页哦Page 3医院感染事件回顾医院感

2、染事件回顾1919世纪，世纪，产褥热产褥热塞麦尔维斯塞麦尔维斯母亲救星母亲救星19911991年年1111月，某医院发生新生儿鼠伤寒沙门氏月，某医院发生新生儿鼠伤寒沙门氏 菌暴发流行，菌暴发流行，5555人发病，人发病，2323名死亡；名死亡；19921992年年9 9月，某医院发生志贺氏痢疾杆菌暴发，月，某医院发生志贺氏痢疾杆菌暴发，2626人感染，人感染，1010名死亡；名死亡；19931993年年3 3月，某市医院月，某市医院1414名新生儿柯萨奇名新生儿柯萨奇B B型病型病 毒感染，毒感染，1010名死亡名死亡 Semmelweis第三页，讲稿共七十六页哦Page 4医院感染事件回顾医

3、院感染事件回顾19931993年，某市妇儿医院年，某市妇儿医院4444名新生儿柯萨奇名新生儿柯萨奇B B 型病毒感染，型病毒感染，1515名死亡；名死亡；19981998年，某市妇儿医院发生年，某市妇儿医院发生166166名产妇手术名产妇手术 切口的结核分支杆菌感染。切口的结核分支杆菌感染。20012001年，某医院儿科心脏手术后年，某医院儿科心脏手术后1818例肺炎例肺炎 克雷伯氏杆菌血液感染。克雷伯氏杆菌血液感染。第四页，讲稿共七十六页哦Page 5医院感染事件回顾医院感染事件回顾20052005年，某妇幼保健院发生年，某妇幼保健院发生2020多名新生儿多名新生儿 沙门氏菌感染沙门氏菌感染

4、20052005年，某医院年，某医院1010例接受白内障手术治疗例接受白内障手术治疗 的病人发生绿脓杆菌感染，其中的病人发生绿脓杆菌感染，其中9 9名患者的名患者的 单眼眼球被摘除。单眼眼球被摘除。20082008年，西安某医院严重医院感染事件，年，西安某医院严重医院感染事件，9 9名新生儿感染，名新生儿感染，8 8名死亡。名死亡。第五页，讲稿共七十六页哦Page 6医院感染事件回顾医院感染事件回顾20092009年，天津某妇幼保健院，发生年，天津某妇幼保健院，发生6 6名新生儿名新生儿 院内感染，其中造成院内感染，其中造成5 5例死亡例死亡20092009年，山西省两家职工医院发生患者因血年

5、，山西省两家职工医院发生患者因血 液透析感染丙肝事件，液透析感染丙肝事件，4747名患者在这两家医名患者在这两家医 院透析过程中，有院透析过程中，有2020名患者丙肝抗体阳性名患者丙肝抗体阳性 第六页，讲稿共七十六页哦Page 7医院感染：医院感染：医院感染医院感染P268（hospital infection/hospital acquired infection/nosocomial infection）：）：又称院内感染又称院内感染/医院医院获得性感染，指（住院）患者以及医院工作人员在医院在医获得性感染，指（住院）患者以及医院工作人员在医院在医院内获得的感染，包括住院期间发生的感染和在医

6、院内获得，院内获得的感染，包括住院期间发生的感染和在医院内获得，出院后发生的感染。出院后发生的感染。医院感染是难免的，关键是：医院感染是难免的，关键是：早防范；早防范；早发现；早发现；早控制早控制医院感染流行医院感染暴发疑似医院感染暴发产褥热第七页，讲稿共七十六页哦Page 8一、医院环境的生境特征 第八页，讲稿共七十六页哦Page 9一、医院环境的生境特征 医院感染1.医院是病人高度聚集的场所2.医院病人对病原微生物的抵抗力普遍降低3.侵入性诊疗手段在医院中应用普遍4.抗菌药物和消毒灭菌措施应用普遍5.医院内病原种类多、密度大、构成复杂 第九页，讲稿共七十六页哦Page 10第二节第二节 医

7、院环境微生物的特点、来源、医院环境微生物的特点、来源、种类、分布及卫生意义种类、分布及卫生意义第十页，讲稿共七十六页哦Page 111.1.多数为正常菌群或条件致病菌多数为正常菌群或条件致病菌（抗菌药物滥用（抗菌药物滥用、侵袭、侵袭性诊疗）性诊疗）2.2.多数病原菌呈多数病原菌呈交叉耐药交叉耐药或或多重耐药多重耐药（耐药基因突变、（耐药基因突变、质粒转移）质粒转移）3.3.病原体对外界抵抗力强病原体对外界抵抗力强（对消毒剂的选择压力）（对消毒剂的选择压力）4.4.非发酵革兰阴性杆菌和真菌感染上升非发酵革兰阴性杆菌和真菌感染上升（非发酵菌革（非发酵菌革兰阴性菌分离率、真菌感染危险因素）兰阴性菌分

8、离率、真菌感染危险因素）也是医院感染微生物的特点。2.1 医院环境微生物的特点第十一页，讲稿共七十六页哦Page 12名词解释名词解释&英翻中：英翻中：交叉耐药P270多重耐药P270天然耐药性P270获得耐药性P271非发酵革兰阴性菌 P271MRSA P271VRE P271ESBLs P271PDR P271XDR P271CNS P273第十二页，讲稿共七十六页哦Page 13交叉耐药交叉耐药P270（cross resistance）：对统一作用机制药物的不同种类耐药，如对）：对统一作用机制药物的不同种类耐药，如对环丙沙星、氧氟沙星等同时耐药。环丙沙星、氧氟沙星等同时耐药。多重耐药多

9、重耐药P270（multi-drug resistance，MDR）：对不同作用机制药物同时耐药，如）：对不同作用机制药物同时耐药，如对青霉素、氧氟沙星、红霉素等同时耐药。对青霉素、氧氟沙星、红霉素等同时耐药。天然耐药性天然耐药性P270：抗生素绝大多数是由微生物合成，抗生素绝大多数是由微生物合成，生产用生产用微生物菌种具有抵抗自身微生物菌种具有抵抗自身合成这种化合物抑制和杀灭作用的天然耐药性。合成这种化合物抑制和杀灭作用的天然耐药性。获得耐药性获得耐药性P271：正常敏感菌株染色体变异或通过基因（如质粒、转座子）转移而获正常敏感菌株染色体变异或通过基因（如质粒、转座子）转移而获得的耐药得的耐

10、药非发酵革兰阴性菌：非发酵革兰阴性菌：在厌氧条件下不能利用糖的革兰阴性无芽孢杆菌，需氧或兼性在厌氧条件下不能利用糖的革兰阴性无芽孢杆菌，需氧或兼性厌氧，生化特征相似，在分类学上分别属于不同种属的细菌，多为条件致病菌，主要厌氧，生化特征相似，在分类学上分别属于不同种属的细菌，多为条件致病菌，主要包括：假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属等。包括：假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、黄杆菌属、莫拉菌属等。生物被膜：生物被膜：物体表面聚集生长的细菌群落和细胞外基质，常见于植入性医疗器械表面。生物体表面聚集生长的细菌群落和细胞外基质，常见于植入性医疗器械表面。生物被膜相关感染治疗困难

11、，易慢性化和反复发作。物被膜相关感染治疗困难，易慢性化和反复发作。名词解释2第十三页，讲稿共七十六页哦Page 14MRSA P271：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin resistance Staphylococcus aureus）_Mec A：PBSsPBS2aVRE：耐万古霉素肠球菌（：耐万古霉素肠球菌（Vancomycin resistant Enterococcus）ESBLs：超广谱：超广谱-内酰胺酶（内酰胺酶（extended spectrum beta-Lactamases）CNS：凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌Coagula

12、se-negative staphylococci/China National Standards/central nervous system/Cell Nature Science英翻中第十四页，讲稿共七十六页哦Page 15 获得性感染获得性感染 外环境感染外环境感染内源性感染内源性感染 外源性感染外源性感染（交叉感染）（交叉感染）2.2 医院感染的来源 医院病人医院病人 医护人员医护人员 医院环境医院环境 医院诊疗用品医院诊疗用品危险因素？危险因素？第十五页，讲稿共七十六页哦Page 16医院环境微生物传播途径医院环境微生物传播途径呼吸道、消化道、血液、体液等途径传播；呼吸道、消化道

13、、血液、体液等途径传播；经胎盘、产道、哺乳等途径传播。经胎盘、产道、哺乳等途径传播。第十六页，讲稿共七十六页哦Page 17 病毒病毒医院环境微生物的种类 立克次体立克次体 真菌真菌 细菌细菌 寄生虫寄生虫包括所有类型的微包括所有类型的微生物，以细菌为主。生物，以细菌为主。第十七页，讲稿共七十六页哦Page 18医院环境微生物的种类（变迁）医院环境微生物的种类（变迁）第十八页，讲稿共七十六页哦Page 19空气空气医院环境微生物的分布病人及医护人员病人及医护人员手手医疗用品医疗用品周围环境周围环境 水和食品水和食品 第十九页，讲稿共七十六页哦Page 20医院环境微生物的卫生意义控制和消灭医院

14、环境中的病原微生物，做好对控制和消灭医院环境中的病原微生物，做好对微生物的检测工作，对于预防和控制院内感染，微生物的检测工作，对于预防和控制院内感染，保障人类健康有重要意义。保障人类健康有重要意义。医院感染医院感染 环境污染环境污染第二十页，讲稿共七十六页哦Page 21思考：如何预防医院环境微生物引起的医思考：如何预防医院环境微生物引起的医院感染？院感染？P280第二十一页，讲稿共七十六页哦Page 22医院环境微生物的控制 消毒措施 环境及物品的消毒处理 预防医院感染 医院污水消毒处理 预防环境污染第二十二页，讲稿共七十六页哦Page 23医院感染案例医院感染案例-1第二十三页，讲稿共七十

15、六页哦Page 24西安交大医院西安交大医院-医院感染调查结果医院感染调查结果医务人员没有规范地进行手卫生；据对部分医务人员的手、病房物体表面、新生儿使用的奶瓶和奶嘴、新生儿暖箱注水口等进行检测1.发现细菌超标严重2.有金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌的明显污染第二十四页，讲稿共七十六页哦Page 25西安交大医院西安交大医院-医院感染处理医院感染处理事后，西安交通大学对医院有关责任人作出处理：事后，西安交通大学对医院有关责任人作出处理：1.撤销西安交大医学院第一附属医院院长和主管副院长的职务；2.免去医院新生儿科主任、护士长的职务；3.免去医院医务部、护理部等有关职能部门负责人的职务；4.陕西

16、省卫生厅已将该事件通报全省；5.新生婴儿家长得到18万元赔偿金并退还治疗费用你觉得新生儿科医生（医院）在发现院感流行趋势时，该怎么处你觉得新生儿科医生（医院）在发现院感流行趋势时，该怎么处理？理？第二十五页，讲稿共七十六页哦Page 26流行病学调查步骤流行病学调查步骤成立调查小组：成立调查小组：调查小组由分管院长、感染控制人员、医院流行病学专家、感染发生部门科主任及护士长、微生物学专业人员、药物学专业人员、后勤保障部主管等。分析调查资料：分析调查资料：对医院感染暴发病例进行查看，了解病史、核查实验室检查结果，开展相应的流行病学调查。进行核实会诊，确认是否为真正的医院感染暴发或流行的存在。调查

17、感染暴发流行的起始时间及医院感染传播方式，列出潜在的危险因素。制定防控措施：制定防控措施：根据调查情况，制定临时控制措施。如隔离感染源或可疑感染源或保护性隔离其他患者等。必要时可采用停止手术或关闭病房等措施。调查报告：调查报告：根据感染暴发或流行的调查和控制情况，实时调整相应控制措施并及时完成调查报告。调查小组向医院感染管理委员会递交书面报告。第二十六页，讲稿共七十六页哦Page 27通过现场抽样调查和检测方法，对西安市21所医院新生儿室和新生儿用品进行了调查和监测：依据：2002年版消毒技术规西安市医疗机构新生儿诊疗环境卫生消毒质量调查西安市医疗机构新生儿诊疗环境卫生消毒质量调查（2008-

18、2009）西安市疾控，李骏等西安市疾控，李骏等第二十七页，讲稿共七十六页哦Page 28病房采样点：病房采样点：第二十八页，讲稿共七十六页哦Page 29结果判定结果判定新生儿室环境物品和医务人员手卫生标准按照GB15982医院消毒卫生标准规定的标准，细菌总数5cfu/cm2，不得检出致病菌，判定合格；母婴同室、婴儿洗澡间等环境细菌总数10cfu/cm2，不得检出致病菌，判定合格；新生儿暖箱湿化水、游泳水参照国家公共场所管理条例要求洗浴水必需符合生活饮用水卫生标准规定的标准，细菌总数100cfu/ml，不得检出致病菌，判定合格。第二十九页，讲稿共七十六页哦Page 30西安市医疗机构新生儿室卫

19、生消毒质量调查结果西安市医疗机构新生儿室卫生消毒质量调查结果医护人员手上检出致病菌 暖箱湿化水和游泳池水 检出金黄色葡萄球菌第三十页，讲稿共七十六页哦Page 31手易被细菌污染手易被细菌污染如：在新生儿护理工作中，很多类型的接触方式与医护人员手部高水平的细菌污染相关，如吸痰、换尿布和直接皮肤接触。培养皿显示：培养皿显示：医务人员的手很容易受到暂居菌的污染。医务人员的手很容易受到暂居菌的污染。第三十一页，讲稿共七十六页哦Page 32肥皂含菌浓度：肥皂含菌浓度：3103103-43-4个个/g/g肥皂含菌浓度：肥皂含菌浓度：1104-5个个/g肥皂含菌浓度：肥皂含菌浓度：1106-7个个/g在

20、病区和诊室，在病区和诊室，请立即停用固体肥皂！请立即停用固体肥皂！第三十二页，讲稿共七十六页哦Page 33这些实例你会觉得很熟悉实例1 急诊科的某医生一边看病人，一边看病人，一边接电话一边接电话第三十三页，讲稿共七十六页哦Page 34 大部分确实是用白大褂的背部擦干的！白大褂是首选白大褂是首选甩手运动第二甩手运动第二重复毛巾是摆样子重复毛巾是摆样子 实例2 干手的方式第三十四页，讲稿共七十六页哦Page 35其中一个原因就是其中一个原因就是“忙！忙！”其实，洗手的依从性护士比医生要好得多。其实，洗手的依从性护士比医生要好得多。实例3 不能做到接诊一位患者一洗手的原因第三十五页，讲稿共七十六

21、页哦Page 36一感染办工作人员到手术室做现况调查，亲眼目睹了一感染办工作人员到手术室做现况调查，亲眼目睹了个别外科医生洗手的全过程，用一个字形容就是个别外科医生洗手的全过程，用一个字形容就是“快快”。实例4 个别外科医生洗手速度第三十六页，讲稿共七十六页哦Page 37手套是无菌的，所以摘除手套后不用洗手！手套是无菌的，所以摘除手套后不用洗手！事实上，如果医护人员能仔细清洗双手，理论上没有绝对必要用手套因大部分的医护人员洗手都不是执行得很彻底，为预防手部的致因大部分的医护人员洗手都不是执行得很彻底，为预防手部的致病菌散播而带手套。病菌散播而带手套。虽然手套有提供屏障之效，但并不能保证绝对没

22、有穿透性。手套在隔绝细菌与病毒上的功能有限手套带给护理人员一种安全感的假象：手套带给护理人员一种安全感的假象：戴手套时间过长，手套内的双手温湿，更有利于细菌的滋长，且致病菌可能会经由手套缝隙或在脱手套时污染双手实例实例5 用带手套来取代洗手用带手套来取代洗手第三十七页，讲稿共七十六页哦Page 38一个真实的故事：一位医生的手连续三次微生物检测一个真实的故事：一位医生的手连续三次微生物检测均为均为“细菌无法计数细菌无法计数”。究其原因，他自己说：我每天只洗两次手，中午吃饭究其原因，他自己说：我每天只洗两次手，中午吃饭前一次，下午下班前一次。前一次，下午下班前一次。实例6 看看这位医生第三十八页

23、，讲稿共七十六页哦Page 39有些事实我们不得不承认有些事实我们不得不承认:1.下班后都会洗手.2.采血时都会戴手套,但不会换3.打电话时,都会戴手套或用手套套住手机4.喝水、上卫生间前都会洗手5.脱手套后基本不洗手6.总是叫自己的孩子在医院别到处乱摸,却从不在乎自己的在医院到处乱摸保护病人保护病人,保护自己保护自己,保护亲人保护亲人你做到了吗？你做到了吗？第三十九页，讲稿共七十六页哦40 控制医院感染控制医院感染最简单、最有效、最方便、最经济方法最简单、最有效、最方便、最经济方法 洗洗 手手第四十页，讲稿共七十六页哦Page 41医务人员手卫生规范医务人员手卫生规范 2009年年3月底正式

24、颁布月底正式颁布手卫生手卫生(hand hygiene):hand hygiene):是医务人员是医务人员洗手洗手、卫生卫生手消毒手消毒、外科手消毒外科手消毒的总称。的总称。第四十一页，讲稿共七十六页哦Page 421 1 洗手洗手(hand washinghand washing)：医务人员用肥皂(皂液)和流动水洗手，去除手部皮肤污垢、碎屑和部分致病菌的过程。0 用水打湿双手 1 取适量产品涂抹双手所有皮肤 2 掌心对掌心揉搓3手指交叉，掌心对手背揉搓 4 手指交叉，掌心对掌心揉搓 5 手指互握，一手手指 背部放于另一只手手掌中，揉搓手指使使用用肥肥皂皂和和水水洗洗手手方方法法第四十二页，讲

25、稿共七十六页哦Page 43使使用用肥肥皂皂和和水水洗洗手手方方法法6 拇指在掌中揉搓拇指在掌中揉搓 7指尖在掌心中揉搓指尖在掌心中揉搓 8 用水冲洗用水冲洗9用一次性毛巾用一次性毛巾/纸巾彻底擦干纸巾彻底擦干 10 用毛巾关水龙头用毛巾关水龙头 你的手是安全的你的手是安全的第四十三页，讲稿共七十六页哦Page 442 2卫生手消毒卫生手消毒(antiseptic handrubbing)antiseptic handrubbing)：医务人员用速干：医务人员用速干手消毒剂揉搓双手，以减少手部暂居菌的过程。手消毒剂揉搓双手，以减少手部暂居菌的过程。1取适量产品于于掌心中，并涂抹双手至所有皮肤取

26、适量产品于于掌心中，并涂抹双手至所有皮肤 2 掌心对掌心揉搓掌心对掌心揉搓使用快速手消毒剂的手卫生方法使用快速手消毒剂的手卫生方法3手指交叉，掌心对手背揉搓手指交叉，掌心对手背揉搓 4手指交叉，掌心对掌心揉搓手指交叉，掌心对掌心揉搓 5 手指互握，一手手指手指互握，一手手指 背部放于另一只手手掌中，揉搓手指背部放于另一只手手掌中，揉搓手指 6拇指在掌中揉搓拇指在掌中揉搓 7 指尖在掌心中揉搓指尖在掌心中揉搓 一旦干燥，你的手是安全的一旦干燥，你的手是安全的第四十四页，讲稿共七十六页哦Page 453 外科手消外科手消毒毒(surgical hand(surgical hand antiseps

27、is)antisepsis)：外科手术前医务人员用肥皂(皂液)和流动水洗手，再用手消毒剂清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程。使用的手消毒剂可具有持续抗菌活性。第四十五页，讲稿共七十六页哦Page 46（二）手卫生的管理与基本要求（二）手卫生的管理与基本要求手消毒效果应达到如下相应要求：卫生手消毒，监测的细菌数应卫生手消毒，监测的细菌数应10cfu/cm2外科手消毒，监测的细菌数应外科手消毒，监测的细菌数应5cfu/cm2监测方法：按照GB15982的要求进行第四十六页，讲稿共七十六页哦Page 47第四十七页，讲稿共七十六页哦Page 48医院感染案例医院感染案例-2案案例例 2 200

28、8年12月2009年1月间，在山西两医院进行血液透析的47名患者中有 20名患者丙肝抗体阳性透析常见感染部位：呼吸道导管泌尿道胃肠道其他常见病原菌：G-（奈瑟）G+（链球）真菌（白念）病毒（CMV）第四十八页，讲稿共七十六页哦Page 491.缺失有关规章制度。两所医院违反了医院感染管理办法的规定，没有针对血液透析感染管理制定并落实相应的规章制度、工作规范和技术规程，血液透析室的管理十分混乱。2.重复使用一次性血液透析器。两所医院均存在重复使用一次性血液透析器的问题。太原公交公司职工医院不仅重复使用一次性血液透析器，而且重复使用一次性血液透析管路。3.存在诸多交叉感染的隐患。两所医院违反了血液

29、透析器复用操作规范，对血液透析器的处理过程不规范，不进行测漏试验和质量监测，消毒方法不正确消毒方法不正确。特别是太原公交公司职工医院4.对丙肝抗体阳性患者不能实施专机血液透析和专区处理血液透析器，并使用工业用过氧乙酸对血液透析器进行消毒，存在交叉感染和安全隐患。医院感染案例医院感染案例-2第四十九页，讲稿共七十六页哦Page 50第三节第三节 医院环境微生物检验及卫生标医院环境微生物检验及卫生标准准第五十页，讲稿共七十六页哦Page 51根据根据物品性质物品性质 污染后的危害程度污染后的危害程度 污染微生物的种类和数量污染微生物的种类和数量选择消毒方法和消毒剂量。选择消毒方法和消毒剂量。消毒方

30、法的选择原则 消毒效果的评价及监测 环境及物品的消毒处理第五十一页，讲稿共七十六页哦Page 52医院环境微生物的检测空气空气物体表面物体表面医护人员手医护人员手医疗用品（包括消毒剂等）医疗用品（包括消毒剂等）细菌学检查细菌学检查对象：对象：内容：内容：细菌数量细菌数量细菌鉴定细菌鉴定 方法：方法：按照按照医院消毒技术规范医院消毒技术规范进行进行第五十二页，讲稿共七十六页哦Page 53医院环境微生物检验是医院感染监测重要内容，包括医院环境微生物检验是医院感染监测重要内容，包括对重点科室对重点科室常规监测常规监测及发生医院感染时的及发生医院感染时的特殊监测特殊监测。了解适用于医院感染微生物监测

31、的法律法规、检测标了解适用于医院感染微生物监测的法律法规、检测标准、检测方法，熟悉各类准、检测方法，熟悉各类样本采集方法样本采集方法，正确判断，正确判断病原体分离鉴定结果，并对病原体进行病原体分离鉴定结果，并对病原体进行药敏试验和分药敏试验和分型型检测，为预防和控制医院感染提供病原学诊断依据。检测，为预防和控制医院感染提供病原学诊断依据。第五十三页，讲稿共七十六页哦Page 54医院环境微生物检验医院环境微生物检验p医院环境微生物医院环境微生物常规监测常规监测1.1.医院环境消毒灭菌效果评价医院环境消毒灭菌效果评价压力蒸汽灭菌效果的监测压力蒸汽灭菌效果的监测紫外线消毒效果紫外线消毒效果医疗器械

32、灭菌效果监测医疗器械灭菌效果监测2.2.医院环境卫生学监测（空气、物体表面、手）医院环境卫生学监测（空气、物体表面、手）3.3.各类医疗用品消毒、灭菌后监测各类医疗用品消毒、灭菌后监测4.4.使用中消毒剂和无菌器械保存液检测使用中消毒剂和无菌器械保存液检测第五十四页，讲稿共七十六页哦Page 551.1 1.1 压力蒸汽灭菌效果监测流程压力蒸汽灭菌效果监测流程生物学监测方法（参照生物学监测方法（参照20092009医院消毒技术规范）医院消毒技术规范）将两片嗜热脂肪杆菌芽胞（含菌量为将两片嗜热脂肪杆菌芽胞（含菌量为5.0105.0105 55.0105.0106 6cfu/cfu/片）放入片）放

33、入3 3个小纸袋内。个小纸袋内。放置在压力蒸汽灭菌器上、中层的中央、下层（下排气口），放置在压力蒸汽灭菌器上、中层的中央、下层（下排气口），各各1 1个装有芽胞菌片的纸袋。个装有芽胞菌片的纸袋。将压力测试后的菌片置溴甲酚紫胨水培养基中，将压力测试后的菌片置溴甲酚紫胨水培养基中，（561561），培养，培养48h48h后观察颜色，直到后观察颜色，直到7d7d，若不变色，若不变色为合格，变黄不合格。为合格，变黄不合格。第五十五页，讲稿共七十六页哦Page 561.2 紫外线辐照强度监测流程紫外线辐照强度监测流程打开紫外线灯，稳定打开紫外线灯，稳定5min;5min;打开紫外线辐照强度监测仪，调至打

34、开紫外线辐照强度监测仪，调至220v220v，253.7nm253.7nm；距离灯管距离灯管1m1m处测定处测定辐照强度标准：辐照强度标准：30W30W的新灯管的新灯管90W/cm90W/cm2 2 使用中的灯管使用中的灯管 70W/cm70W/cm2 2第五十六页，讲稿共七十六页哦Page 572.1 ICU或手术室空气污染监测流程或手术室空气污染监测流程房间面积房间面积 30m2取取5 个点（东西南北中，各端距墙个点（东西南北中，各端距墙1m，距地面，距地面80150cm）房间面积房间面积 30m2取取3点（一条对角线，两端距墙点（一条对角线，两端距墙1m，距地面距地面80150cm）平皿

35、直径平皿直径9cm，暴露，暴露5min，37 培养培养2448h。菌落计数并换算成：菌落计数并换算成：cfu/m3（公式公式5000N/AT）A平皿面积，平皿面积，T暴露时间，暴露时间，N平均菌落数平均菌落数第五十七页，讲稿共七十六页哦Page 582.2 物体表面污染消毒后监测流程物体表面污染消毒后监测流程采样时间：消毒处理后采样时间：消毒处理后4h采样面积采样面积 100cm2，取，取100cm2；100cm2取全部。取全部。摆放规格板并涂抹采样：无菌棉拭子往复摆放规格板并涂抹采样：无菌棉拭子往复5次，剪入次，剪入10ml相应中和剂的相应中和剂的采样液。采样液。送检并培养：平板倾注法，样液

36、震洗送检并培养：平板倾注法，样液震洗80次或涡旋，取次或涡旋，取1ml样液，样液，37 培养培养48h。菌落计数并换算成：菌落计数并换算成：cfu/cm2（平板上平均菌落数（平板上平均菌落数 稀释倍数稀释倍数/采样采样面积）面积）标准：标准：、类环境类环境 5cfu/cm2；类环境类环境 10cfu/cm2；类环境类环境 15cfu/cm2 第五十八页，讲稿共七十六页哦Page 592.3 医护人员手污染监测流程医护人员手污染监测流程采样：用稀释液沾湿拭子，双手手指并拢，屈面从指根到采样：用稀释液沾湿拭子，双手手指并拢，屈面从指根到指端往复涂抹两次，并转动拭子。指端往复涂抹两次，并转动拭子。将

37、未接触拭子部分剪入装有将未接触拭子部分剪入装有10ml10ml稀释液的试管中，震稀释液的试管中，震洗、接种、培养，并计数。洗、接种、培养，并计数。不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他；可不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他；可疑污染的情况下进行相应微生物指标检测。母婴同室、早疑污染的情况下进行相应微生物指标检测。母婴同室、早产儿、新生儿等不得检出产儿、新生儿等不得检出沙门菌沙门菌。第五十九页，讲稿共七十六页哦Page 603.血液透析水和透析液染菌量监测流程血液透析水和透析液染菌量监测流程样本采集：透析用水在进入透析机位置收集；透析液在进入样本采集：透析用水在进入透析机位置

38、收集；透析液在进入透析器位置收集。透析器位置收集。样本接种、培养、菌落计数方法同上。样本接种、培养、菌落计数方法同上。标准：菌落总数标准：菌落总数200cfu/ml，并不得检出致病微生物。，并不得检出致病微生物。第六十页，讲稿共七十六页哦Page 614.使用中消毒剂污染监测流程使用中消毒剂污染监测流程采样时间：每个季度采样时间：每个季度采样方法：无菌吸取采样方法：无菌吸取1ml消毒剂，加入消毒剂，加入9ml相应中和剂，相应中和剂，混匀，立即送检。混匀，立即送检。接种：倾注法，普通营养琼脂接种：倾注法，普通营养琼脂培养并计数：培养并计数：20 培养培养7d观察并计数霉菌菌落数；观察并计数霉菌菌

39、落数；37 培养培养3d，计数细菌数并检测致病菌。，计数细菌数并检测致病菌。结果计算分析：标准结果计算分析：标准 100cfu/ml，不得检出致病性微，不得检出致病性微生物。生物。第六十一页，讲稿共七十六页哦Page 62医院感染微生物检测医院感染微生物检测p常见医院感染部位的微生物学检验常见医院感染部位的微生物学检验l临床微生物样本采集临床微生物样本采集采集方法采集方法送检原则送检原则判定不符合要求的标本判定不符合要求的标本l病原体分离培养鉴定病原体分离培养鉴定l病原体药物敏感性试验病原体药物敏感性试验第六十二页，讲稿共七十六页哦Page 63抗菌药物敏感性试验抗菌药物敏感性试验定性（纸片琼

40、脂扩散法定性（纸片琼脂扩散法,即即Kirby-BauerKirby-Bauer法）法）纯化菌落：在血平板、麦康凯等分离纯化出单个菌落纯化菌落：在血平板、麦康凯等分离纯化出单个菌落菌液制备：挑取数个菌落，用生理盐水将菌液浓度调整至菌液制备：挑取数个菌落，用生理盐水将菌液浓度调整至0.50.5麦氏单位麦氏单位（5.0105.0107 75.0105.0108 8cfu/mlcfu/ml）；）；涂布涂布MHMH平板：用棉签沾取稀释好的菌液均匀涂布平板：用棉签沾取稀释好的菌液均匀涂布3 3次，平板內缘再涂次，平板內缘再涂抹一次，即涂满平板；抹一次，即涂满平板；贴含药纸片：用无镊子将药片紧贴于琼脂表面，

41、纸片中心间贴含药纸片：用无镊子将药片紧贴于琼脂表面，纸片中心间 24mm24mm，距内缘，距内缘 15mm15mm；培养培养181824h24h，根据抑菌圈直径作出敏感、耐药、中介。，根据抑菌圈直径作出敏感、耐药、中介。定量（定量（MICMIC、MBCMBC）手工或仪器分析手工或仪器分析第六十三页，讲稿共七十六页哦Page 64以肺炎链球菌药敏试验结果判断标准为例以肺炎链球菌药敏试验结果判断标准为例肺炎链球菌药敏试验结果判断标准肺炎链球菌药敏试验结果判断标准第六十四页，讲稿共七十六页哦Page 65医院感染微生物检测医院感染微生物检测医院感染暴发时的微生物学检验医院感染暴发时的微生物学检验样本

42、采集种类样本采集种类临床样本临床样本环境样本环境样本病原体分离鉴定病原体分离鉴定病原体同源性检测病原体同源性检测第六十五页，讲稿共七十六页哦Page 66病原体分型方法病原体分型方法表型分型法（血清学、噬菌体等分型）表型分型法（血清学、噬菌体等分型）分子分型法（质粒图谱分析方法）分子分型法（质粒图谱分析方法）临床分离株及质控株临床分离株及质控株质粒提取过程（具体见实验六部分）质粒提取过程（具体见实验六部分）质粒提取物电泳质粒提取物电泳质粒酶切电泳图谱分析质粒酶切电泳图谱分析第六十六页，讲稿共七十六页哦Page 67同源性分析例同源性分析例例例1 对对MARS流行病学分型方法，主要有表型分型方法

43、，如噬菌体流行病学分型方法，主要有表型分型方法，如噬菌体（4组组23种噬菌体）分型，耐药谱分型等；分子分型方法，如脉种噬菌体）分型，耐药谱分型等；分子分型方法，如脉冲场凝胶电泳、随机引物扩增多态性冲场凝胶电泳、随机引物扩增多态性DNA及及DNA指纹图谱分型指纹图谱分型等。等。例例2 1996年在解放军某医院外科病区，从年在解放军某医院外科病区，从6名患者的血液、大名患者的血液、大静脉插管、腹腔引流液中分离出静脉插管、腹腔引流液中分离出14株绿脓假单胞菌，血清型株绿脓假单胞菌，血清型分型皆属同型。用单引物分型皆属同型。用单引物PCR指纹图谱分型方法，指纹图谱指纹图谱分型方法，指纹图谱完全相同，判

44、定此次医院感染由绿脓假单胞菌引起。完全相同，判定此次医院感染由绿脓假单胞菌引起。第六十七页，讲稿共七十六页哦Page 68医院环境微生物卫生标准医院环境微生物卫生标准空气空气物体表面物体表面医护人员的手医护人员的手 GB15982-1995GB15982-1995医院消毒卫生标准（因不同科室细医院消毒卫生标准（因不同科室细菌标准不同）菌标准不同）第六十八页，讲稿共七十六页哦Page 69医院各类科室或区域空气、物体表面、医护人员手菌落总数限值标准医院各类科室或区域空气、物体表面、医护人员手菌落总数限值标准*空气采样为自然沉降法空气采样为自然沉降法第六十九页，讲稿共七十六页哦Page 70医院污

45、水消毒处理后排放医院污水消毒处理后排放医院污水（消毒后）的排放标准医院污水（消毒后）的排放标准 参照参照GB18466-2005GB18466-2005医疗机构水污染物排放标准医疗机构水污染物排放标准 指标包括：粪大肠菌群数、肠道致病菌、肠道病毒、结指标包括：粪大肠菌群数、肠道致病菌、肠道病毒、结核杆菌，总余氯等（传染病院、结核病院排放的污水和污核杆菌，总余氯等（传染病院、结核病院排放的污水和污泥微生物指标要求不同）泥微生物指标要求不同）第七十页，讲稿共七十六页哦Page 71第四节第四节 医院环境微生物污染的预医院环境微生物污染的预防与控制技术防与控制技术第七十一页，讲稿共七十六页哦Page

46、 72要采取综合性措施预防与控制医院环境微生物污染，包括医要采取综合性措施预防与控制医院环境微生物污染，包括医院建筑设计，房屋布局、通道、通风等，有效的消毒隔离，院建筑设计，房屋布局、通道、通风等，有效的消毒隔离，对医护人员进行医院感染、用药、临床微生物知识相关培对医护人员进行医院感染、用药、临床微生物知识相关培训，加强职业防护。采取的主要措施包括：训，加强职业防护。采取的主要措施包括：第七十二页，讲稿共七十六页哦Page 731.1.隔离防护措施隔离防护措施 2.2.加强医院环境卫生学消毒及消毒灭菌效果监测加强医院环境卫生学消毒及消毒灭菌效果监测3.3.提高医务人员的职业防护水平提高医务人员

47、的职业防护水平4.4.对医院感染开展目标性监测对医院感染开展目标性监测 5.5.合理使用侵入性诊疗手段合理使用侵入性诊疗手段 6.6.合理使用抗菌药物和其他药物合理使用抗菌药物和其他药物7.7.对医疗废弃物处理要得当对医疗废弃物处理要得当8.8.医院污水消毒处理排放要符合国家卫生标准医院污水消毒处理排放要符合国家卫生标准第七十三页，讲稿共七十六页哦Page 74第五节第五节 医院环境微生物研究前景医院环境微生物研究前景第七十四页，讲稿共七十六页哦Page 75医院环境微生物的研究发展前景问题医院环境微生物的研究发展前景问题医院感染微生物快速检测及分型研究医院感染微生物快速检测及分型研究侵入诊疗器械消毒灭菌技术研究侵入诊疗器械消毒灭菌技术研究临床分离菌株对抗生素和消毒剂的耐药机制研究临床分离菌株对抗生素和消毒剂的耐药机制研究第七十五页，讲稿共七十六页哦2022/9/26感感谢谢大大家家观观看看第七十六页，讲稿共七十六页哦