高三一轮复习生物_选修三知识点复习课件.pptx
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1、选修三知识点复习,一、基因工程、安全性及伦理问题1、基因工程的工具,3,类型,来源,功能,相同点,差别,EcoliDNA连接酶,T4DNA连接酶,大肠杆菌,T4噬菌体,恢复磷酸二酯键,只能连接黏性末端,能连接黏性末端和平末端(效率较低),载体的作用,载体的必要条件,载体的种类,1)必需有一个或多个限制酶的切割位点2)必须具备自我复制能力3)必须有标记基因,以便重组后进行筛选4)对受体细胞无害5)大小应适合,以便提取和体外操作。,1)作为运载工具,将目的基因导入受体细胞中2)在受体细胞内对目的基因进行大量复制,细菌的质粒病毒:噬菌体衍生物、动植物病毒等。,有标记基因的存在,可用含青霉素的培养基鉴
2、别。,有切割位点,能复制并带着插入的目的基因一起复制,质粒裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。,最常用运载体质粒,实际上在基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。,一、基因工程、安全性及伦理问题2、基因工程的基本操作程序,基因工程基本操作的四个步骤,1、目的基因的获取,2、基因表达载体的构建,3、目的基因导入受体细胞,4、目的基因的检测与鉴定,获取目的基因的常用方法:(1)从基因文库中获取(2)利用PCR技术扩增(3)人工合成,对比基因组文库与cDNA文库,转化细菌,cDNA文库,国家图书馆,某市或某单位图
3、书馆,基因的结构(补充知识),与RNA聚合酶结合位点,终止子,1、编码区:能转录相应的信使RNA,能编码蛋白质的序列。,2、非编码区 :调控遗传信息表达的核苷酸序列(启动子、终止子),不编码蛋白质。,一、原核细胞的基因结构,启动子是在非编码区内,基因的首端,它是RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动基因转录出mRNA。 终止子是在非编码区内,基因的尾端,它能阻碍RNA聚合酶的移动,并使其从DNA模板链上脱离下来,使转录终止。,二、真核细胞的基因结构,编码区,内含子,外显子,启动子,终止子,基因的结构(补充知识),与RNA聚合酶结合位点,1、编码区,2、非编码区 :调控遗传信息表达的核苷酸序列(启动
4、子、终止子),不编码蛋白质。,基因的结构,非编码区,非编码区,编码区,RNA聚合酶结合位点,外显子,内含子,终止子,启动子,原核,真核,部分基因可以,可以,物种之间的基因交流,某种生物的全部基因,某种生物的部分基因,基因多少,有,无,基因中内含子,有,无,基因中启动子,大,小,文库大小,基因组文库,cDNA文库,文库类型, 概念:PCR全称为_,是一项 在生物_复制_的核酸合成技术,条件:_、_、_、 _.,原理:_,特点:以_方式扩增,即_(n为扩增循环的次数),结果:,多聚酶链式反应,体外,特定DNA片段,DNA复制,四种脱氧核苷酸(原料),2种引物,热稳定DNA聚合酶(Taq酶),指数,
5、2n,在短时间内大量扩增目的基因,2.利用PCR技术扩增目的基因,已知目的基因的核苷酸序列(DNA模板),高温(90-95)变性 DNA解链低温(55-60)复性 引物结合中温(70-75)延伸 互补链的合成,PCR基本操作过程:,注意:双链DNA是在高温条件下解链为单链DNA的,因此整个过程不需要解旋酶。,3. 人工合成法,在基因较小,核苷酸序列已知的情况下,可以利用DNA合成仪人工合成。,蛋白质的氨基酸序列,mRNA的核苷酸序列,基因的核苷酸序列,目的基因,化学合成,推测,推测,思考:化学法合成的目的基因含内含子、启动子和终止子吗?,合成的目的基因不含内含子、启动子、终止子,人工合成法,反
6、转录法,目的基因的信使RNA,目的基因,单链DNA,合成,化学合成法,肽链氨基酸序列,信使RNA序列,基因的核苷酸序列,目的基因,合成,推测,推测,基因表达载体的构建 基因工程的核心,1、目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。,2、基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点,2、将目的基因直接导入受体细胞不是更简便吗?如果这么做,结果会怎样?(P11寻根问底),如果将一个生物中的总DNA导入受体细胞,没有进行表达载体的构建,这种方法针对性差,完全靠运气,也无法确定什么基因导入了受体植物。此法目前争议颇多,严格来讲不算
7、基因工程。,1、目的基因与载体两种DNA片段连接形成的的产物有几种?载体就是表达载体吗?,思考与讨论,目的基因-目的基因、目的基因-载体、载体-载体。含有目的基因的载体才是表达载体。,转化:,方法,将目的基因导入植物细胞,将目的基因导入动物细胞(受精卵),将目的基因导入微生物细胞,农杆菌转化法,基因枪法,花粉管通道法,显微注射法,Ca2+ 处理法,目的基因进入_内,并且在 受体细胞内维持_和_的过程,受体细胞,稳定,表达,三、将目的基因导入受体细胞,1、鉴定分子水平的鉴定,转基因生物的DNA,探针,15N,15N,(1)检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因,基因探针:,放射性同位素
8、等标记的含有目的基因的DNA分子,方法:,DNA分子杂交技术,变性,变性,出现杂交带(碱基互补配对原则),表明目的基因已插入染色体DNA中,15N,15N,四、目的基因的检测与鉴定,1、鉴定分子水平的鉴定,变性,方法:,分子杂交技术,(2)检测目的基因是否转录出了mRNA,探针,15N,15N,转基因生物的mRNA,出现杂交带,表明目的基因转录出了mRNA,15N,15N,方法:,抗原抗体杂交,相应的抗体,转基因生物中提取蛋白质,(3)检测目的基因是否翻译成蛋白质,出现杂交带,(表明目的基因已形成蛋白质产品),2、鉴定个体水平的鉴定,抗虫或抗病接种实验活性比较实验(基因工程产品与天然产品功能进
9、行活性比较,以确定转基因产品的功能活性是否与天然产品相同。),一、基因工程、安全性及伦理问题3、基因工程的应用,植物基因工程技术主要应用:,1.提高农作物的抗逆能力(如抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等)2.改良农作物的品质3.利用植物生产药物等方面,蛋白质三维结构,氨基酸序列多肽链,基因DNA,预期功能,分子设计,mRNA,生物功能,转录,翻译,折叠,图1-29蛋白质工程流程图,一、基因工程、安全性及伦理问题4、蛋白质工程,二、细胞工程(一)植物细胞工程1、植物组织培养:原理、流程2、植物体细胞杂交技术,植物组织培养技术的流程简图。,外植体(消毒),愈伤组织,再分化,诱导,试管苗(胚状体
10、或丛芽,进而发育成小植株),移栽到大田,培养成正常植株,杂种植株,融合的原生质体AB,再生出细胞壁,脱分化,愈伤组织,再分化,1、过程,植物细胞的融合,植物组织培养,植物细胞A,原生质体B,原生质体A,杂种细胞AB,去 壁,去 壁,人工诱导,方法?,促进融合的方法?,融合完成的标志,植物细胞B,二、植物体细胞杂交技术,思考:体细胞融合成功后,培养基中有几种类型的细胞?全部类型的细胞都符合要求吗?,比较,细胞全能性,脱分化再分化,保持优良性状繁殖速度快、大规模生产提高经济效益,杂交技术应用了组织培养,克服不同种生物远缘杂交不亲和障碍,去除细胞壁融合形成杂种细胞组织培养,细胞膜流动性细胞全能性,二
11、、细胞工程(二)动物细胞工程1、动物细胞培养(基础)2、动物细胞核移植3、动物细胞融合4、单克隆抗体,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,细胞悬液,10代细胞,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,过程:,(三)动物细胞培养条件,能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶?,1、无菌、无毒的环境,对培养液和培养用具进行无菌处理;在培养液中添加一定量的抗生素;定期更换培养液。,2、营养,葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。,动物血清、血浆。,3、温度和pH,温度36.50.5度,pH7.27.4。,4、气体环境,O2和CO2(95%空气和5% CO2 )。,O2是细胞代谢所必需的。,CO2维持培养液的
12、pH。,供体细胞(供核),细胞培养,体细胞,卵巢卵母细胞(M中期:供质),去核,无核卵母细胞,注入,细胞融合,重组细胞,构建重组胚胎,胚胎移植,代孕母体,生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛,归纳:1.共分成两大阶段:核移植和胚胎移植2.取卵母细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状。,核移植过程,激活受体细胞,二、细胞工程(二)动物细胞工程3、动物细胞融合4、单克隆抗体,细胞膜的流动性,灭活的病毒、PEG、电激等,诱导的手段?,融合后细胞的类型?,AB杂交细胞遗传物质有什么特点?,三种AA、AB、BB(A、B),含两种生物的遗传物质,过程,原理?,BB 、B瘤 、
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