检测生物组织中的糖类、脂肪、和蛋白质课件高一上学期生物人教版必修一.pptx
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1、,检测生物组织中糖类、脂肪、蛋白质,一、实验原理,还原糖 ,蛋白质 ,脂肪 ,砖红色沉淀,橘黄色,红色,紫色,淀粉 + 碘蓝色,水浴加热,50-65,二. 实验步骤,1。还原糖的检测选材:还原糖含量较高、颜色为 的植物组织或器官,如 、 。,白色或无色,苹果,梨,(2)还原糖:葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖 注:蔗糖、淀粉不是还原糖,注意:(1)材料不能用西瓜汁、西红柿等,虽然含糖高,但有颜色,会影响实验结果。,(3)斐林试剂:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液 配制方法:甲液与等量乙液等量混匀,且现配现用。(甲液和乙液不稳定,需分别配制、储存),可溶
2、性还原糖与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2 CH2OH(CHOH)4COOH+ Cu2O+ 2H2O(葡萄糖) (浅蓝色) (葡萄糖酸) (砖红色) 即:还原糖中的醛基(CHO)被Cu(OH)2氧化, Cu(OH)2被还原成砖红色的Cu2O沉淀,2. 实验步骤,结论:组织样液中含有,选材,砖红色沉淀,还原糖,浅蓝色,水浴加热前后的颜色变化:,棕色,砖红色,若不加热,试管A、B中的是颜色的?,若溶液中没有还原糖,试管A、B中的是颜色的?,2ml,(1ml),还原糖检测实验的实验结果,注意:加热时试管底部不要接触烧杯底部,同时试管口不要
3、朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。,2 脂肪的检测选材:最好选富含的生物组织,如花生。使用前可提前浸泡34 h,以便于。,脂肪,切片,取材和切片:花生种子(浸泡,去掉种皮),将子叶切成薄片制片,取最薄的切片,放在载玻片中央滴23滴 染液(染色3min)去浮色(12滴体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色。)制成临时装片(滴1滴蒸馏水,盖上盖玻片),苏丹,(原因:苏丹易溶于酒精中),观察:先低倍镜,再高倍显微镜观察,视野中被染成( ) 的脂肪颗粒清晰可见结论:说明花生种子中有存在,橘黄色,脂肪,蛋白质的检测,A液1mlB液4滴,(1)选材:鸡蛋清(必须稀释)、大豆。(2)试剂:双缩
4、脲试剂 A液:0.1g/mL的NaOH溶液, B液:0.01g/mL的CuSO4溶液 (3)步骤: 试管中加样液2mL加双缩脲试剂A液1mL(造成碱性环境),摇匀加双缩脲试剂B液4滴,摇匀观察颜色变化(紫色) 注:样液浓度不宜过高,以免与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不易洗刷干净。 B液不能过量,多余的B液会与A液反应成蓝色,而掩盖生成的紫色。,蛋白质的鉴定原理:,蛋白质分子中含有很多肽键(含二个肽键即可),在碱性溶液(即A液可造成碱性环境)中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色络合物。,注意:多肽也能与双缩脲试剂发生紫色反应,所以能与双缩脲试剂发生紫色反应的
5、不一定是蛋白质。,比较斐林试剂和双缩脲试剂,0.1g/mL的NaOH溶液,0.1g/mL的NaOH溶液,0.01g/mL的CuSO4溶液,0.05g/mL的CuSO4溶液,还原性糖,蛋白质,甲液和乙液等量混合均匀后再加入,先加双缩脲试剂A液1mL,摇匀,再加双缩脲试剂B液4滴,50-65水浴加热,砖红色沉淀,紫色络合物,不需加热,摇匀即可,还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化, Cu(OH)2被还原成Cu2O,具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物,实验室中没有双缩脲试剂,有斐林试剂,能做蛋白质的鉴定实验吗?,能,实际实验中可以用斐林试剂,通过蒸馏水稀释CuSO4配制双缩脲
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