原核基因表达调控模式课件.ppt
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1、关于原核基因表达调控模式现在学习的是第1页,共90页主要内容:主要内容:基因表达调控的基本概念基因表达调控的基本概念原核基因调控机制原核基因调控机制乳糖操纵子乳糖操纵子色氨酸操纵子色氨酸操纵子其他操纵子其他操纵子转录后水平上的调控转录后水平上的调控现在学习的是第2页,共90页一一 基因表达调控的基本概念基因表达调控的基本概念一)基因表达的概念gene expressiongene expression:从:从DNADNA到蛋白质的过程(到蛋白质的过程(基因转录及翻译的过程)。对这个过程的调节就称为基因表达调控(gene regulationgene regulation)。rRNArRNA、t
2、RNAtRNA编码基因转录合成编码基因转录合成RNARNA的过程也属于基因表达的过程也属于基因表达现在学习的是第3页,共90页二二 原核基因调控机制原核基因调控机制内容提要:原核基因表达调控环节原核基因表达调控环节操纵子学说操纵子学说原核基因调控机制的类型与特点原核基因调控机制的类型与特点转录水平上调控的其他形式转录水平上调控的其他形式 现在学习的是第4页,共90页一)原核基因表达调控环节一)原核基因表达调控环节1 1、转录水平上的调控、转录水平上的调控(transcriptionalregulation)2 2、转录后水平上的调控、转录后水平上的调控(post-transcriptional
3、regulation)mRNA加工成熟水平上的调控加工成熟水平上的调控翻译水平上的调控翻译水平上的调控现在学习的是第5页,共90页现在学习的是第6页,共90页1 1、根据操纵子对调节蛋白(阻遏蛋白或激活蛋白)、根据操纵子对调节蛋白(阻遏蛋白或激活蛋白)的的应答,可分为:应答,可分为:正转录调控正转录调控 负转录调控负转录调控二)原核基因调控机制的类型与特点二)原核基因调控机制的类型与特点现在学习的是第7页,共90页调节基因调节基因操纵基因操纵基因结构基因结构基因激活蛋白激活蛋白正转录调控正转录调控正转录调控正转录调控 如果在没有调节蛋白质存在时基因是关闭的,加入这如果在没有调节蛋白质存在时基因
4、是关闭的,加入这种调节蛋白质后基因活性就被开启,这样的调控正转录种调节蛋白质后基因活性就被开启,这样的调控正转录调控。调控。现在学习的是第8页,共90页调节基因调节基因操纵基因操纵基因结构基因结构基因阻遏蛋白阻遏蛋白负转录调控负转录调控负转录调控负转录调控 在没有调节蛋白质存在时基因是表达的,加入这种调节在没有调节蛋白质存在时基因是表达的,加入这种调节蛋白质后基因表达活性便被关闭,这样的调控负转录调控。蛋白质后基因表达活性便被关闭,这样的调控负转录调控。现在学习的是第9页,共90页w可诱导调节可诱导调节(P196):指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下,由原来关闭的状态转变为工作状态,即在
5、某些物质的诱导下使基因活化。例:大肠杆菌的乳糖操纵子大肠杆菌的乳糖操纵子 分解代谢蛋白的基因2、根据操纵子对某些能调节它们的小分子的应答,可分为可诱导调节可诱导调节和可阻遏调节可阻遏调节两大类:现在学习的是第10页,共90页调节基因调节基因操纵基因操纵基因结构基因结构基因阻遏蛋白阻遏蛋白调节基因调节基因操纵基因操纵基因结构基因结构基因阻遏蛋白阻遏蛋白诱导物诱导物mRNA酶蛋白酶蛋白酶合成的诱导操纵子模型酶合成的诱导操纵子模型诱导物如果某种物质能够促使细菌产生酶来分解它,这种物质就是诱导物。现在学习的是第11页,共90页w可阻遏调节可阻遏调节(P197):基因平时是开启的,处在产生蛋):基因平时
6、是开启的,处在产生蛋白质或酶的工作过程中,由于一些特殊代谢物或化合物白质或酶的工作过程中,由于一些特殊代谢物或化合物的积累而将其关闭,阻遏了基因的表达。的积累而将其关闭,阻遏了基因的表达。例:例:色氨酸操纵子色氨酸操纵子 合成代谢蛋白的基因现在学习的是第12页,共90页酶合成的阻遏操纵子模型酶合成的阻遏操纵子模型调节基因调节基因操纵基因操纵基因结构基因结构基因mRNAmRNA酶蛋白酶蛋白调节基因调节基因操纵基因操纵基因结构基因结构基因辅阻遏物辅阻遏物辅阻遏物如果某种物质能够阻止细菌产生合成这种物质的酶,这种物质就是辅阻遏物。现在学习的是第13页,共90页3、在在负负转转录录调调控控系系统统中中
7、,调调节节基基因因的的产产物物是是阻阻遏遏蛋蛋白白(repressor),起着阻止结构基因转录的作用。),起着阻止结构基因转录的作用。根据其作用特征又可分为根据其作用特征又可分为负控诱导负控诱导和和负控阻遏负控阻遏:w在在负负控控诱诱导导系系统统中中,阻阻遏遏蛋蛋白白与与效效应应物物(诱诱导导物物)结结合合时,结构基因转录;时,结构基因转录;w在在负负控控阻阻遏遏系系统统中中,阻阻遏遏蛋蛋白白与与效效应应物物(辅辅阻阻遏遏物物)结结合时,结构基因不转录。合时,结构基因不转录。现在学习的是第14页,共90页现在学习的是第15页,共90页4 4、在、在正转录调控正转录调控正转录调控正转录调控系统中
8、,调节基因的产物是系统中,调节基因的产物是激活蛋白激活蛋白(activator)。)。根据激活蛋白的作用性质分为根据激活蛋白的作用性质分为正控诱导正控诱导和和正控阻遏正控阻遏w在在正控诱导正控诱导系统中,效应物分子(诱导物)的存在使系统中,效应物分子(诱导物)的存在使激活蛋白处于活性状态;激活蛋白处于活性状态;w在在正控阻遏正控阻遏系统中,效应物分子系统中,效应物分子(辅阻遏物)辅阻遏物)的存在的存在使激活蛋白处于非活性状态使激活蛋白处于非活性状态。现在学习的是第16页,共90页现在学习的是第17页,共90页三)转录水平上调控的其他形式三)转录水平上调控的其他形式1、因子的更换 在E.coli
9、中,当细胞从基本的转录机制转入各种特定基因表达时,需要不同的因子指导RNA聚合酶与各种启动子结合。现在学习的是第18页,共90页大肠杆菌中的各种因子比较因子编码基因主要功能70rpoD参与对数生长期和大多数碳代谢过程基因的调控54rpoN参与多数氮源利用基因的调控38rpoH分裂间期特异基因的表达调控32rpoS热休克基因的表达调控28rpoF鞭毛趋化相关基因的表达调控24rpoE过度热休克基因的表达调控现在学习的是第19页,共90页w温度较高,诱导产生各种热休克蛋白 由32参与构成的RNA聚合酶与热休克应答基因启动子结合,诱导产生大量的热休克蛋白,适应环境需要w枯草芽孢杆菌芽孢形成 有序的因
10、子的替换,RNA聚合酶识别不同基因的启动子,使芽孢形成有关的基因有序地表达现在学习的是第20页,共90页2、降解物对基因活性的调节3、弱化子对基因活性的影响现在学习的是第21页,共90页三三 乳糖操纵子乳糖操纵子(lac operon)(lac operon)负控诱导系统负控诱导系统内容提要:内容提要:乳糖操纵子的结构乳糖操纵子的结构酶的诱导酶的诱导laclac体系受调控的证据体系受调控的证据乳糖操纵子调控模型乳糖操纵子调控模型影响因子影响因子LacLac操纵子中的其他问题操纵子中的其他问题现在学习的是第22页,共90页1 1 1 1、操纵子概念、操纵子概念操纵子:操纵子:操纵子:操纵子:是基
11、因表达的协调单位,由启动子、操纵基因及是基因表达的协调单位,由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。操纵基因其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。操纵基因受调节基因产物的控制。受调节基因产物的控制。1961年,年,Monod和和Jacob提出提出获获1965年诺贝尔生理学和医学年诺贝尔生理学和医学奖奖一)乳糖操纵子的结构一)乳糖操纵子的结构现在学习的是第23页,共90页Jacob and Monod现在学习的是第24页,共90页w wlacZlacZ:半半乳乳糖糖苷苷酶酶,将将乳乳糖糖分分解解成成半半乳乳糖糖和和葡葡萄糖萄糖w wlacYlacYlacYlacY:半半
12、乳乳糖糖渗渗透透酶酶,使使外外界界的的-半半乳乳糖糖苷苷(如如乳乳糖糖)能能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内w wlacAlacA:半乳糖苷转乙酰酶,使乙酰辅酶半乳糖苷转乙酰酶,使乙酰辅酶A A上的乙酰基转到上的乙酰基转到-半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖w wI I I I:阻遏蛋白阻遏蛋白2 2、乳糖操纵子的结构乳糖操纵子的结构乳糖操纵子的结构乳糖操纵子的结构现在学习的是第25页,共90页二)酶的诱导二)酶的诱导laclac体系受调控的证据体系受调控的证据现在学习的是第26页,共90页w安慰诱导物:如果某种物质能够促使细菌产生
13、酶而本身又不被分解,这种物质被称为安慰诱导物,如IPTG(异丙基-D-硫代半乳糖苷)。现在学习的是第27页,共90页现在学习的是第28页,共90页三)乳糖操纵子调控模型三)乳糖操纵子调控模型主要内容:主要内容:Z Z、Y Y、A A基因的产物由同一条多顺反子的基因的产物由同一条多顺反子的mRNAmRNA分子所编码分子所编码 这个这个mRNAmRNA分子的启动区(分子的启动区(P P)位于阻遏基因()位于阻遏基因(I I)与操纵区()与操纵区(O O)之间,)之间,不能单独启动合成不能单独启动合成-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。操纵基因是操纵基因是DNADNA上的一
14、小段序列(仅为上的一小段序列(仅为26bp26bp),是阻遏物的结合位点。),是阻遏物的结合位点。当阻遏物与操纵基因结合时,当阻遏物与操纵基因结合时,lac mRNAlac mRNA的转录起始受到抑制。的转录起始受到抑制。诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵基因结合,诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵基因结合,从而激发从而激发lac mRNAlac mRNA的合成。当有诱导物存在时,操纵基因区没有被的合成。当有诱导物存在时,操纵基因区没有被阻遏物占据,所以启动子能够顺利起始阻遏物占据,所以启动子能够顺利起始mRNAmRNA的合成。的合成。现在学习的是第
15、29页,共90页现在学习的是第30页,共90页现在学习的是第31页,共90页四)影响因子四)影响因子1 1、laclac操纵子的本底水平表达操纵子的本底水平表达有两个矛盾是操纵子理论所不能解释的:诱导物需要穿过细胞膜才能与阻遏物结合,而转运诱导物需要透过酶,后者的合成有需要诱导。解释解释:一些诱导物可以在透过酶不存在时进入细胞?一些透过酶可以在没有诱导物的情况下合成?现在学习的是第32页,共90页真正的诱导物是异构乳糖而非乳糖,前者是在真正的诱导物是异构乳糖而非乳糖,前者是在-半半乳糖甘酶的催化下由乳糖形成的,因此,需要有乳糖甘酶的催化下由乳糖形成的,因此,需要有-半乳糖甘酶的预先存在。半乳糖
16、甘酶的预先存在。解释:解释:解释:解释:本底水平的组成型合成:非诱导状态下有少量的本底水平的组成型合成:非诱导状态下有少量的lacmRNA合成。合成。现在学习的是第33页,共90页2 2、大肠杆菌对乳糖的反应、大肠杆菌对乳糖的反应培养基:甘油培养基:甘油按照按照lac操纵子本底水平的表达,每个细胞内有几个分子的操纵子本底水平的表达,每个细胞内有几个分子的-半乳糖苷酶和半乳糖苷酶和-半乳糖苷透过酶;半乳糖苷透过酶;培养基:加入乳糖培养基:加入乳糖少量乳糖少量乳糖透过酶透过酶进入细胞进入细胞-半乳糖苷酶半乳糖苷酶异构乳糖异构乳糖诱导物诱导物诱导诱导lacmRNA的生物合成的生物合成大量乳糖进入细胞
17、大量乳糖进入细胞多数被降解为葡萄糖和半乳糖(碳源和能源)多数被降解为葡萄糖和半乳糖(碳源和能源)异构乳糖异构乳糖现在学习的是第34页,共90页乳糖现在学习的是第35页,共90页诱导物的加入和去除对lac mRNA的影响现在学习的是第36页,共90页3 3、阻遏物、阻遏物、阻遏物、阻遏物lac Ilac Ilac Ilac I基因产物及功能基因产物及功能基因产物及功能基因产物及功能 Lac Lac 操纵子阻遏物操纵子阻遏物mRNA是由弱启动子控制下组成型合是由弱启动子控制下组成型合成的,每个细胞中有成的,每个细胞中有5-10个阻遏物分子。个阻遏物分子。当当I基因由弱启动子突变成强启动子,细胞内就
18、不可基因由弱启动子突变成强启动子,细胞内就不可能产生足够的诱导物来克服阻遏状态,整个能产生足够的诱导物来克服阻遏状态,整个lac操纵操纵子在这些突变体中就不可诱导。子在这些突变体中就不可诱导。现在学习的是第37页,共90页4 4 4 4、葡萄糖对、葡萄糖对laclaclaclac操纵子的影响操纵子的影响在乳糖代谢中,在乳糖代谢中,-半乳糖苷酶把乳糖分解成葡萄糖和半乳糖半乳糖苷酶把乳糖分解成葡萄糖和半乳糖(半乳糖将在(半乳糖将在gal操纵子的作用下再转化为葡萄糖)。如果将葡操纵子的作用下再转化为葡萄糖)。如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中萄糖和乳糖同时加入培养基中,laclac操纵子处于阻遏状态
19、,不能操纵子处于阻遏状态,不能被诱导;一旦耗尽外源葡萄糖,乳糖就会诱导被诱导;一旦耗尽外源葡萄糖,乳糖就会诱导laclac操纵子表达分操纵子表达分解乳糖所需的三种酶。解乳糖所需的三种酶。代谢物阻遏效应代谢物阻遏效应现在学习的是第38页,共90页5 5、cAMPcAMPcAMPcAMP与代谢物激活蛋白与代谢物激活蛋白(降解物对基因活性的调节)(降解物对基因活性的调节)(降解物对基因活性的调节)(降解物对基因活性的调节)代谢物激活蛋白(代谢物激活蛋白(CAP)/环腺甘酸受体蛋白(环腺甘酸受体蛋白(CRP)现在学习的是第39页,共90页ZYAOPDNA调控区调控区CAP结合位点结合位点启动序列启动序
20、列操纵序列操纵序列结构基因结构基因Z:-半乳糖苷酶半乳糖苷酶Y:透酶透酶A:乙酰基转移酶:乙酰基转移酶cAMPCAP复合物现在学习的是第40页,共90页现在学习的是第41页,共90页ATPATP腺甘酸环化酶腺甘酸环化酶cAMP(环腺甘酸)(环腺甘酸)大肠杆菌中:无葡萄糖,大肠杆菌中:无葡萄糖,cAMP浓度高;浓度高;有葡萄糖,有葡萄糖,cAMP浓度低浓度低现在学习的是第42页,共90页+转录转录无葡萄糖,无葡萄糖,cAMP浓度高时浓度高时促进转录促进转录有葡萄糖,有葡萄糖,cAMP浓度低时浓度低时不促进转录不促进转录ZYAOPDNACAPCAPCAPCAPCAPCAPCAPCAP的正调控的正调
21、控现在学习的是第43页,共90页当阻遏蛋白封闭转录时,CAP对该系统不能发挥作用如无如无CAP存在,即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合,操纵子仍无转录活存在,即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合,操纵子仍无转录活性。性。cAMPCAP复合物与启动子区的结合是转录起始所必需的。复合物与启动子区的结合是转录起始所必需的。协调调节协调调节葡葡萄萄糖糖对对lac操操纵纵子子的的阻阻遏遏作作用用称称分分解解代代谢谢阻阻遏遏(catabolicrepression)。单纯乳糖存在时,细菌利用乳糖作碳源;若有葡萄单纯乳糖存在时,细菌利用乳糖作碳源;若有葡萄糖或葡萄糖糖或葡萄糖/乳糖共同存在时,细菌首先利用葡萄糖。乳糖
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