高效液色谱精选PPT讲稿.ppt

《高效液色谱精选PPT讲稿.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高效液色谱精选PPT讲稿.ppt（37页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、关于高效液色谱2022/9/272022/9/27第一页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/27气相色谱气相色谱高效液相色谱高效液相色谱分析挥发物质（约分析挥发物质（约2020）几乎可以分析各种物质几乎可以分析各种物质不能用于热不稳定物质不能用于热不稳定物质可以用于热不稳定物质可以用于热不稳定物质毛细管色谱有很高柱效毛细管色谱有很高柱效柱长有限，柱效不很高柱长有限，柱效不很高有灵敏的检测器有灵敏的检测器无较灵敏的通用检测器无较灵敏的通用检测器运行和操作容易运行和操作容易运行和操作难一些运行和操作难一些仪器制造难度小一些仪器制造难度小一些仪器制造难度大一些仪器制造难度大一些第二页，

2、讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/271.目前尚无通用的高灵敏检测器目前尚无通用的高灵敏检测器;2.仪器昂贵仪器昂贵;3.维持成本高维持成本高;4.溶剂通用甲醇，有毒溶剂通用甲醇，有毒,所以能用所以能用GC,尽量不用尽量不用HPLC.第三页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/27二、二、高效液相色谱法的特点高效液相色谱法的特点 feature of HPLC 特点：高压、高效、高速、高灵敏度特点：高压、高效、高速、高灵敏度特点：高压、高效、高速、高灵敏度特点：高压、高效、高速、高灵敏度 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。高沸点、热不稳定有机及生化试样

3、的高效分离分析方法。高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。第四页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/27三、流程及主要部件三、流程及主要部件 process and main assembly of HPLC1.1.流程流程第五页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/272.主要部件主要部件(1)(1)高压输液泵高压输液泵高压输液泵高压输液泵 主要部件之一，压力：主要部件之一，压力：主要部件之一，压力：主要部件之一，压力：15015035010350105 5 Pa Pa。为为为为了了了了获获获获得得得得高

4、高高高柱柱柱柱效效效效而而而而使使使使用用用用粒粒粒粒度度度度很很很很小小小小的的的的固固固固定定定定相相相相（10m)甲酰胺甲酰胺甲酰胺甲酰胺 乙腈乙腈乙腈乙腈 甲醇甲醇甲醇甲醇 乙醇乙醇乙醇乙醇 丙醇丙醇丙醇丙醇 丙酮丙酮丙酮丙酮 二二二二氧六环氧六环氧六环氧六环 四氢呋喃四氢呋喃四氢呋喃四氢呋喃 甲乙酮甲乙酮甲乙酮甲乙酮 正丁醇正丁醇正丁醇正丁醇 乙酸乙酯乙酸乙酯乙酸乙酯乙酸乙酯 乙醚乙醚乙醚乙醚 异丙异丙异丙异丙醚醚醚醚 二氯甲烷二氯甲烷二氯甲烷二氯甲烷 氯仿氯仿氯仿氯仿 溴乙烷溴乙烷溴乙烷溴乙烷 苯苯苯苯 四氯化碳四氯化碳四氯化碳四氯化碳 二硫化碳二硫化碳二硫化碳二硫化碳 环己烷环己

5、烷环己烷环己烷 己烷己烷己烷己烷 煤油煤油煤油煤油(最小最小最小最小)第二十九页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/274.4.选择流动相时应注意的几个问题选择流动相时应注意的几个问题（1 1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。损坏色谱柱和使检测器噪声增加。损坏色谱柱和使检测器噪声增加。损坏色谱柱和使检测器噪声增加。（2 2）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。）避免流动相与

6、固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。（3 3）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。并在柱中沉积。并在柱中沉积。并在柱中沉积。（4 4）流动相同

7、时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，）流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，）流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，）流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有紫外吸收。流动相不应有紫外吸收。流动相不应有紫外吸收。流动相不应有紫外吸收。第三十页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/27一、一、影响分离的因素影响分离的因素 factors influenced separation1.1.影响分离的因素与提高柱效的途径影响分离的因素与提高柱效的途径 在在在在高高高高效效效效液液液液相相相相色色色色谱谱谱谱中中中中,液液液液体体

8、体体的的的的扩扩扩扩散散散散系系系系数数数数仅仅仅仅为为为为气气气气体体体体的的的的万万万万分分分分之之之之一一一一，则则则则速速速速率率率率 方方方方 程程程程 中中中中 的的的的 分分分分 子子子子 扩扩扩扩 散散散散 项项项项B/UB/U较较较较 小小小小，可可可可 以以以以 忽忽忽忽 略略略略 不不不不 计计计计，即即即即：H=A+C uH=A+C u 故液相色谱故液相色谱故液相色谱故液相色谱H-uH-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。第三十一页，讲稿共三十七页哦2022/9

9、/272022/9/27 液液液液体体体体的的的的黏黏黏黏度度度度比比比比气气气气体体体体大大大大一一一一百百百百倍倍倍倍，密密密密度度度度为为为为气气气气体体体体的的的的一一一一千千千千倍倍倍倍，故故故故降降降降低低低低传传传传质阻力是提高柱效主要途径。质阻力是提高柱效主要途径。质阻力是提高柱效主要途径。质阻力是提高柱效主要途径。由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。液相色谱中，不可能通过增液相色谱中，不可能通过增液相色谱中，不可能通过增液相色谱中，不可能通过增加柱温来改善传质。

10、加柱温来改善传质。加柱温来改善传质。加柱温来改善传质。恒温恒温恒温恒温 改变淋洗液组成、极性是改改变淋洗液组成、极性是改改变淋洗液组成、极性是改改变淋洗液组成、极性是改善分离的最直接的因素。善分离的最直接的因素。善分离的最直接的因素。善分离的最直接的因素。第三十二页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/27 2.2.流速流速 流速大于流速大于流速大于流速大于0.5 cm/s0.5 cm/s时时时时,HHu u曲线是一段斜率不大的直线。降曲线是一段斜率不大的直线。降曲线是一段斜率不大的直线。降曲线是一段斜率不大的直线。降低流速，柱效提高不是很大。但低流速，柱效提高不是很大。但低流速，

11、柱效提高不是很大。但低流速，柱效提高不是很大。但在实际操作中，流量仍是一个调整在实际操作中，流量仍是一个调整在实际操作中，流量仍是一个调整在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参分离度和出峰时间的重要可选择参分离度和出峰时间的重要可选择参分离度和出峰时间的重要可选择参数。数。数。数。3.3.固定相及分离柱固定相及分离柱 气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，

12、分离柱的制备是一项技术要求气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。非常高的工作，一般很少自行制备。非常高的工作，一般很少自行制备。非常高的工作，一般很少自行制备。第三十三页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/27二、分离类型选择二、分离类型选择 choice of separation types第三十四页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/27三、三、HPLC的的应用应用 application

13、 of HPLC 1.1.环境中有机氯农药残留量分析环境中有机氯农药残留量分析 固定相：薄壳型硅胶固定相：薄壳型硅胶固定相：薄壳型硅胶固定相：薄壳型硅胶(37(37 5050 m)m)流动相：正己烷流动相：正己烷流动相：正己烷流动相：正己烷 流流流流 速：速：速：速：1.5 mL/min1.5 mL/min 色谱柱：色谱柱：色谱柱：色谱柱：50cm50cm 2.5mm(2.5mm(内径内径内径内径)检测器：差示折光检测器检测器：差示折光检测器检测器：差示折光检测器检测器：差示折光检测器 可对水果、蔬菜中的农药残可对水果、蔬菜中的农药残可对水果、蔬菜中的农药残可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析

14、留量进行分析留量进行分析留量进行分析。第三十五页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/272.2.稠环芳烃的分析稠环芳烃的分析 稠环芳烃多为致癌物质。稠环芳烃多为致癌物质。稠环芳烃多为致癌物质。稠环芳烃多为致癌物质。固定相：十八烷基硅烷化键合相固定相：十八烷基硅烷化键合相固定相：十八烷基硅烷化键合相固定相：十八烷基硅烷化键合相 流动相：流动相：流动相：流动相：20%20%甲醇甲醇甲醇甲醇-水水水水 100%100%甲醇甲醇甲醇甲醇 线性梯度淋洗，线性梯度淋洗，线性梯度淋洗，线性梯度淋洗，2%/min2%/min 流流流流 速：速：速：速：1mL/min1mL/min 柱柱柱柱 温：温：温：温：5050 C C 柱柱柱柱 压：压：压：压：70 70 10104 4 PaPa 检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器第三十六页，讲稿共三十七页哦2022/9/272022/9/27感感谢谢大大家家观观看看第三十七页，讲稿共三十七页哦