动物实验基本操作技术讲稿.ppt

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1、关于动物实验基本操作技术关于动物实验基本操作技术27.09.20221第一页，讲稿共八十五页哦一、大、小鼠的抓取固定第一节 实验动物的抓取与固定27.09.20222第二页，讲稿共八十五页哦小鼠固定盒固定27.09.20223第三页，讲稿共八十五页哦大鼠固定盒固定27.09.20224第四页，讲稿共八十五页哦二、豚鼠的抓取固定法27.09.20225第五页，讲稿共八十五页哦三、家兔的抓取固定法27.09.20226第六页，讲稿共八十五页哦27.09.20227第七页，讲稿共八十五页哦一、大、小鼠的性别鉴定第二节 性别鉴定27.09.20228第八页，讲稿共八十五页哦Female Male 二、

2、兔的性别鉴定27.09.20229第九页，讲稿共八十五页哦一、大、小鼠 1.根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）第三节 年龄的大致判断日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1 1仔鼠裸体仔鼠裸体鲜红鲜红3 3耳壳露出表皮耳壳露出表皮4 4脐带脐带瘢痕脱落瘢痕脱落5 5能翻身能翻身8 8能爬行能爬行27.09.202210第十页，讲稿共八十五页哦日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1010能听到声音能听到声音9 91111全身被白毛，全身被白毛，门齿长门齿长出出13131515眼皮眼皮张张开，能跳开，能跳跃跃，能抓取，能抓取东东西西1818以后以后能自行采食，独立生活能自行采食，独立生活

3、27.09.202211第十一页，讲稿共八十五页哦27.09.202212第十二页，讲稿共八十五页哦27.09.202213第十三页，讲稿共八十五页哦27.09.202214第十四页，讲稿共八十五页哦27.09.202215第十五页，讲稿共八十五页哦27.09.202216第十六页，讲稿共八十五页哦27.09.202217第十七页，讲稿共八十五页哦 2.根据体重鉴定日龄 小鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 5 10 15 20 25 30体重/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 21.027.09.202218第十八页，讲稿共八十五页哦 大鼠日龄与体重的对应大鼠日龄与体重的

4、对应日龄/d初生 10 20 30 40 体重/g67 1725 3550 5590 100150日龄/d 50 60 70 80体重/g150210 170240 210270 24032027.09.202219第十九页，讲稿共八十五页哦二、豚鼠一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。日日龄龄/d/d 初生初生 7 20 30 60 7 20

5、30 60 体重体重/g/g606080 10080 100120 150120 150200 170200 170220 240220 240300300日日龄龄/d/d 90 120 180 90 120 180体重体重/g/g330330400 400400 400470 520470 52060027.09.202220第二十页，讲稿共八十五页哦三、家兔家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。

6、还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。27.09.202221第二十一页，讲稿共八十五页哦五、犬犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿犬齿臼齿顺序逐渐更换为恒齿，8l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。27.09

7、.202222第二十二页，讲稿共八十五页哦年龄年龄 犬齿更换和磨损情况犬齿更换和磨损情况2 2个月以下个月以下仅有乳齿仅有乳齿(白、细、尖白、细、尖)2 24 4个月个月更换门齿更换门齿4 46 6个月个月更换犬齿更换犬齿(白，牙尖圆钝白，牙尖圆钝)6 61010个月个月更换臼齿更换臼齿1 1岁岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突2 2岁岁下门齿尖突部分磨乎下门齿尖突部分磨乎3 3岁岁上、下门齿尖突大部分磨平上、下门齿尖突大部分磨平4 45 5岁岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄6 68 8岁岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损门齿磨成齿根，

8、犬齿发黄、磨损9 91010岁岁唇部、胡须发白唇部、胡须发白1010岁以上岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白27.09.202223第二十三页，讲稿共八十五页哦第四节 妊娠检查雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查，又称妊娠诊断(pregnancydiagnosis)。通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿的正常发育，避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要求准确，且

9、及早确诊更为重要。27.09.202224第二十四页，讲稿共八十五页哦外部检查法摸胎法阴道检查法直肠检查法超声波检查法孕酮含量测定法妊娠检查方法有27.09.202225第二十五页，讲稿共八十五页哦第五节 分组与编号动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。一、随机分组（一）当分为二组时例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为甲、乙两组。分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个随机数字，如下：27.09.202226第二十六页，讲稿共八十五页哦动

10、物编号：123456789101112随机数字：78386957910374566826541组别：乙乙甲甲甲乙甲甲乙乙甲甲现在以随机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组，则编号为3、4、5、7、8、11、12号分入甲组，而1、2、6、9、10号分人乙组。因两组数字不等，继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组，从上面最后一随机数字41，接下去抄一个数为62，以7除之(因甲组原分配7只)得6，即把原分配在甲组的第6个甲(即11号大鼠)调入乙组。27.09.202227第二十七页，讲稿共八十五页哦如果甲组多两个，则接下去抄两个数。分别以8，7除之，余数即指要调入乙组的第几个甲，余此类推。最后各组的鼠

11、数就相等了。调整后各组鼠的编号为：组别鼠的编号甲组3457812乙组1269101127.09.202228第二十八页，讲稿共八十五页哦(二)当分为三组时例：设有雄性的SD大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为A、B、C三组。分组方法：假设所定的点是随机数字表第40行17列的08，则从08开始，自左到右抄12个随机数字：动物编号：123456789101112随机数字：082701501529393943796910除3余数：201202001101组别：BCABCBCCAACA调整组别：B27.09.202229第二十九页，讲稿共八十五页哦 以以3 3除除

12、各各随随机机数数字字，若若余余数数为为l l，即即该该鼠鼠归归A A组组；余余数数为为2 2，归归人人B B组组；余余数数为为3 3，归归入入C C组组。结结果果A A组组为为4 4只只，B B组组为为3 3只只，C C组组为为5 5只只。C C组组多多一一只只应应调调入入B B组组。方方法法同同上上。仍仍采采用用随随机机方方法法；从从1010后后面面接接着着抄抄，为为6161。除除以以5 5，余余数数为为1 1，则则将将第第一一个个C C，即第，即第2 2号鼠调入号鼠调入B B组。调整后各组鼠的编号如下：组。调整后各组鼠的编号如下：组别组别鼠的编号鼠的编号AA组组391012391012B组

13、l246CC组组5781157811对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致27.09.202230第三十页，讲稿共八十五页哦（三）当每个动物一组时：例：设有A，B，C，D，E，F代表的6只家兔，试用完全随机法将其每只分为一组。分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若为第21行第17列的33，则从33向左抄用6个数字，然后分别以6，5，4，3，2，l除之。凡除不尽的，即将余数写下。除尽的，写余数时即将其除数写下。如下：27.09.202231第三十一页，讲稿共八十五页哦随机数字3346952687除数654321余数311121随机排列CABDFE

14、上列第一个随机数字余数为3，意即将6个字母中列在第三位的字母C写在该数下，第二个数宇的余数为1，即在剩下的5个字母列在第一位的A写在该数字下面，余此类推。27.09.202232第三十二页，讲稿共八十五页哦二、编号标记方法实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个体的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。1 1体体表表颜颜料料着着色色法法 一一般般对对短短期期试试验验的的白白色色动动物物可可用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：红色：0.5中性红或品红溶液；黄黄色色：3 35 5苦苦味味酸酸溶溶液液或或80809090苦苦味味酸酸酒酒精

15、饱和液；精饱和液；咖啡色：咖啡色：2 2硝酸银溶液；硝酸银溶液；黑色：煤焦油酒精溶液。黑色：煤焦油酒精溶液。27.09.202233第三十三页，讲稿共八十五页哦 左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、9。用黄色表示个位数，红色表示十位数。27.09.202234第三十四页，讲稿共八十五页哦 2个体耳号标记法 3.个体断趾标记法 4.耳号钳标记法 5.挂牌法27.09.202235第三十五页，讲稿共八十五页哦第六节 常规采血方法一、大、小鼠的采血方法1颈静脉或颈动脉采血2股静脉或股动脉采血3心脏采血4尾部采血5眼眶采血6断头取血27.0

16、9.202236第三十六页，讲稿共八十五页哦颈静脉或颈动脉采血尾部采血27.09.202237第三十七页，讲稿共八十五页哦心脏采血27.09.202238第三十八页，讲稿共八十五页哦二、豚鼠的采血方法1耳缘剪口采血2心脏采血方法同大、小鼠。3股动脉采血方法同大、小鼠。4后肢背中足静脉采血27.09.202239第三十九页，讲稿共八十五页哦三、家兔的采血方法1心脏采血2耳中央动脉采血3耳静脉采血27.09.202240第四十页，讲稿共八十五页哦四、狗、猫的采血方法1后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血2股动脉采血3.心脏采血同大、小鼠心脏采血4耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血27.0

17、9.202241第四十一页，讲稿共八十五页哦 采采血血方方法法的的选选择择，决决定定于于实实验验目目的的所所需需血血量量以以及及动动物物种种类类。凡凡用用血血量量较较少少的的检检验验如如红红、白白细细胞胞计计数数、血血红红蛋蛋白白的的测测定定，血血液液涂涂片片以以及及酶酶活活性性微微量量分分析析法法等等，可可刺刺破破组组织织取取毛毛细细血血管管的的血血。当当需需血血量量较较多多时时可可作作静静脉脉采采血血。静静脉脉采采血血时时，若若需需反反复复多多次次，应应自自远远离离心心脏脏端端开开始始，以以免免发发生生栓栓塞塞而而影影响响整整条条静静脉脉。而而研研究究毒毒物物对对肺肺功功能能的的影影响响、

18、血血液液酸酸碱碱平平衡衡、水水盐盐代代谢谢紊紊乱乱，需需要要比比较较动动、静静脉脉血血氧氧分分压压、二二氧氧化化碳碳分分压压和和血血液液pHpH值以及值以及KK+、Na+、ClCl-离子浓度，必须采取动脉血液。27.09.202242第四十二页，讲稿共八十五页哦采采血血场场所所有有充充足足的的光光线线；室室温温夏夏季季最最好好保保持持在在25252828，冬季，冬季，15152020为宜；为宜；采血用具有采用部位一般需要进行消毒；采血用具有采用部位一般需要进行消毒；采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。采血时要注意27.09.202243第四十三

19、页，讲稿共八十五页哦部位 动物种类尾静脉大鼠、小鼠耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠d舌下静脉兔e腹壁静脉青蛙、蟾蜍f冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅取少量血27.09.202244第四十四页，讲稿共八十五页哦部位 动物种类后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫耳中央动脉兔颈静脉狗、猫、兔心脏豚鼠、大鼠、小鼠断头大鼠、小鼠翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅取中量血27.09.202245第四十五页，讲稿共八十五页哦部位 动物种类股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔心脏狗、猴、猫、兔颈静脉马、牛、山羊、绵羊摘眼球大鼠、小鼠取大量血27.09.202246第四十

20、六页，讲稿共八十五页哦动物种类最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500猎狗50200猴15604.最大安全采血量与最小致死采血量27.09.202247第四十七页，讲稿共八十五页哦第七节 给药途径与方法在动物实验过程中，应根据不同的实验目的、动物种类、药物类型来决定动物的给药途径与方法。动物的给药方法主要分为注射法和投入法两种，不同方法按给药途径又分为很多具体类型。注射法分为：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射。投入法可分为：鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入

21、、气管内投入和经口腔投入。以下将各种动物的主要给药途径和方法做一介绍。27.09.202248第四十八页，讲稿共八十五页哦（一）皮下注射（一）皮下注射 注注射射时时以以左左手手拇拇指指和和食食指指提提起起皮皮肤肤，将将连连有有5 5（1/21/2）号号针针头头的的注注射射器器刺刺入入皮皮下下。皮皮下下注注射射部部位位一一般般狗狗、猫猫多多在在大大腿腿外外侧侧，豚豚鼠鼠在在后后大大腿腿的的内内侧侧或或小小腹腹部部；大大白白鼠鼠可可在在侧侧下下腹腹部部。兔兔在在背背部部或或耳耳根根部部注注射射。蛙蛙可可在在脊脊背背部部淋淋巴腔注射。巴腔注射。（二）皮内注射（二）皮内注射皮内注射时需将注射的局部脱去

22、被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连4(1/2)细针头，紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射药液，此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。27.09.202249第四十九页，讲稿共八十五页哦（四）腹腔注射（四）腹腔注射 用用大大、小小白白鼠鼠做做实实验验时时，以以左左手手抓抓住住动动物物，使使腹腹部部向向上上，右右手手将将注注射射针针头头于于左左（或或右右）下下腹腹部部刺刺入入皮皮下下，使使针针头头向向前前推推0.50.51.0cm1.0cm，再再以以4545度度角角穿穿过过腹腹肌肌，固固定定针针头头，缓缓缓缓注注入入药液，药液，为避免

23、伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。27.09.202250第五十页，讲稿共八十五页哦（五）静脉注射（五）静脉注射 1 1兔兔：兔兔耳耳部部血血管管分分布布清清晰晰。兔兔耳耳中中央央为为动动脉脉，耳耳外外缘缘为为静静脉脉。内内缘缘静静脉脉深深不不易易固固定定，故故不不用用。外外缘缘静静脉脉表表浅浅易易固固定定，常常用用。先先拔拔去去注注射射部部位位的的被被毛毛，用用手手指指弹弹动动或或轻轻揉揉兔兔耳耳，使使静静脉脉充充盈盈，左左手手食食指指和和中中指指夹夹住住静静脉脉的的近近端端，拇拇指指绷绷紧紧静静脉脉的的远远端端，无无名名指

24、指及及小小指指垫垫在在下下面面，右右手手持持注注射射器器连连6 6号号针针头头尽尽量量从从静静脉脉的的远远端端刺刺入入，移移动动拇拇指指于于针针头头上上以以固固定定针针头头，放放开开食食指指和和中中指指，将将药药液液注注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。27.09.202251第五十一页，讲稿共八十五页哦22小白鼠和大白鼠小白鼠和大白鼠一般采用尾静脉注射，操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中，使尾巴露出，尾部用4550的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指

25、夹住尾巴的末梢，右手持注射器连4(1/2)号细针头，使针头与静脉平行（小于30），从尾下四分之一处（约距尾尖23 3厘厘米米）处处进进针针，此此处处皮皮薄薄易易于于刺刺入入，先先缓缓注注少少量量药药液液，如如无无阻阻力力，表表示示针针头头已已进进入入静静脉脉，可可继继续续注注入入。注注射射完完毕毕后后把把尾尾部部向向注注射射侧侧弯弯曲曲以以止止血血。如如需需反反复复注注射射，应应尽尽可能从末端开始，以后向尾根部方向移动注射。可能从末端开始，以后向尾根部方向移动注射。27.09.202252第五十二页，讲稿共八十五页哦3狗 狗狗静静脉脉注注射射多多选选前前肢肢内内侧侧皮皮下下头头静静脉脉或或后后

26、肢肢小小隐隐静静脉脉注注射射。注注射射前前由由助助手手将将动动物物侧侧卧卧，剪剪去去注注射射部部位位的的被被毛毛，用用胶胶皮皮带带扎扎紧紧（或或用用手手抓抓紧紧）静静脉脉近近端端，使使血血管管充充盈盈，从从静静脉脉的的远远端端将将注注射射针针头头平平行行刺刺入入血血管管，待待有有回回血血后后，松松开开绑绑带（或两手），缓缓注入药液。带（或两手），缓缓注入药液。27.09.202253第五十三页，讲稿共八十五页哦注射途径小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.21.0 1325510515肌肉0.10.2 0.20.5 0.20.5 0.5125静脉0.20.5 1215310515皮下0.10.5 0.510

27、.5213310几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）27.09.202254第五十四页，讲稿共八十五页哦（六）经口给药（六）经口给药多多用用灌灌胃胃法法，此此法法剂剂量量准准确确，适适用用于于小小白白鼠鼠、大大白白鼠、家兔等动物。鼠、家兔等动物。1 1小鼠、大鼠（或豚鼠）小鼠、大鼠（或豚鼠）灌灌胃胃时时将将灌灌胃胃针针按按在在注注射射器器上上，吸吸入入药药液液。左左手手抓抓住住鼠鼠背背部部及及颈颈部部皮皮肤肤将将动动物物固固定定，右右手手持持注注射射器器，将将灌灌胃胃针针插插入入动动物物口口中中，沿沿咽咽后后壁壁徐徐徐徐插插入入食食道道。动动物物应应固固定定成成垂垂直直体体位位，针针插插入

28、入时时应应无无阻阻力力。若若感感到到阻阻力力或或动动物物挣挣扎扎时时，应应立立即即停停止止进进针针或或将将针针拔拔出出，以以兔兔损损伤伤或或穿穿破破食食道道以以及及误误入入气管。气管。一一般般当当灌灌胃胃针针插插入入小小鼠鼠3 34cm，大鼠或豚鼠46cm后可将药物注入。常用的灌胃量小鼠为0.21ml，大鼠14ml4ml，豚鼠为，豚鼠为1 15ml5ml。27.09.202255第五十五页，讲稿共八十五页哦22狗、兔、猫、猴狗、兔、猫、猴 灌灌胃胃时时，先先将将动动物物固固定定，再再将将特特制制的的扩扩口口器器放放入入动动物物口口中中，扩扩口口器器之之宽宽度度可可视视动动物物口口腔腔大大小小而

29、而定定，如如狗狗的的扩扩口口器器可可用用木木料料制制成成长长方方形形，长长约约1010 15cm15cm，粗粗细细应应适适合合狗狗嘴嘴，约约2 23cm3cm，中中间间粘粘一一小小孔孔，孔孔的的直直途途为为5 510cm10cm。灌灌胃胃时时将将扩扩口口器器放放于于上上述述动动物物上上下下门门牙牙之之后后，并并用用绳绳将将它它固固定定于于嘴嘴部部，将将带带有有弹弹性性的的橡橡皮皮导导管管（如如导导尿尿管管），经经扩扩口口器器上上的的小小圆圆孔孔插插入入，沿沿咽咽后后壁壁而而进进入入食食道道，此此时时应应检检查查导导管管是是否否正正确确插插入入食食道道，可可将将导导管管外外口口置置于于一一盛盛水

30、水的的烧烧杯杯中中，如如不不发发生生气气泡泡，即即认认为为此此导导管管是是在在食食道道中中，未未误误入气管，即可将药液灌入。入气管，即可将药液灌入。27.09.202256第五十六页，讲稿共八十五页哦 给给狗狗、兔兔灌灌胃胃时时，可可不不用用扩扩口口器器：狗狗灌灌胃胃时时，用用1212号号灌灌胃胃管管，左左手手抓抓住住狗狗嘴嘴，右右手手中中指指由由右右嘴嘴角角插插入入，摸摸到到最最后后一一对对臼臼齿齿后后的的天天然然空空隙隙，胃胃管管由由此此空空隙隙顺顺食食管管方方向向不不断断插插入入约约20cm20cm，可可达达胃胃内内，将将胃胃管管另另一一端端插插入入水水中中，如如不不出出气气泡泡，表表示

31、示确确已已进进入入胃胃，而而没没误误入入气气管管内内，即即可可灌灌入入。兔兔灌灌胃胃时时，将将兔兔固固定定在在木木制制固固定定盒盒内内左左手手虎虎口口卡卡住住并并固固定定好好兔兔嘴嘴，右右手手取取1414号号细细导导管管，由由右右侧侧唇唇裂裂避避开开门门齿齿，将将导导管管慢慢慢慢插插入入，如如插插管管顺顺利利，动动物物不不挣挣扎扎，插插入约入约15cm15cm时，即表示插入胃内，将药液注入。时，即表示插入胃内，将药液注入。各各种种动动物物一一次次灌灌胃胃能能耐耐受受的的最最大大容容积积小小鼠鼠为为0.50.51.0ml1.0ml，大大鼠鼠4 47ml7ml，豚豚鼠鼠为为4 47ml，家兔为80

32、150ml150ml，狗狗为为200200500ml500ml。27.09.202257第五十七页，讲稿共八十五页哦（七）其它途径给药1呼吸道给药呈粉尘、气体及蒸气或雾等症状存在药物或毒气，均需要通过动物呼吸道给药。如一般实验时给动物乙醚作吸入麻醉，给动物吸一定量的氨气、二氧化碳等观察呼吸、循环等变化；给动物定期吸入一定量的SO2 2。锯锯末末烟烟雾雾等等可可造造成成慢慢性性气气管管炎炎动动物模型等；特别在毒物学实验中应用更为广泛。物模型等；特别在毒物学实验中应用更为广泛。2 2皮皮肤肤给给药药为为了了鉴鉴定定药药物物或或毒毒物物经经皮皮肤肤的的吸吸收收作作用用、局局部部作作用用、致致敏敏作作

33、用用和和光光感感作作用用等等，均均需需采采用用经经皮皮肤肤给给药药方方法法。如如家家兔兔和和豚豚鼠鼠常常采采用用背背部部一一定定面面积积的的皮皮肤肤脱脱毛毛后后，将将一一定药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。定药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。27.09.202258第五十八页，讲稿共八十五页哦 3 3脊脊髓髓腔腔内内给给药药此此法法主主要要用用于于椎椎管管麻麻醉醉或或抽抽取取脑脑脊脊液。液。家兔椎管内注射方法：将家兔作自然俯卧式，尽量使其尾向腹侧屈曲，用粗剪将第七腰椎周围背毛剪去，用3%碘酊消毒，干后再用79%酒精将碘酒擦去。在兔背部髌骨脊连线之中点稍下方摸动第七腰椎间隙（第七腰椎与第一骶骨椎之间

34、），插入腰椎穿刺针头。当针到达椎管内时（珠网膜下腔），可见到兔的后肢跳动，即证明穿刺针头已进入椎管。这时不要再向下刺，以兔损伤脊髓。固定好针头，即可将药物注入。27.09.202259第五十九页，讲稿共八十五页哦 4 4小小脑脑延延髓髓池池给给药药此此种种给给药药都都是是在在动动物物麻麻醉醉情情况况下下进进行行的的。而而且且常常采采用用大大动动物物如如狗狗等等，小小动动物物很很少少采采用用。将将狗狗麻麻醉醉后后，使使狗狗头头尽尽量量向向胸胸部部屈屈曲曲，用用左左手手摸摸到到其其第第一一颈颈椎椎上上方方的的凹凹陷陷（枕枕骨骨大大孔孔），固固定定位位置置，右右手手取取7 7号号钝钝针针头头（将将针

35、针头头尖尖端端麻麻钝钝），由由此此凹凹陷陷的的正正中中线线上上，顺顺平平行行狗狗的的方方向向，小小心心地地刺刺入入小小脑脑延延髓髓池池。当当针针头头正正确确刺刺入入小小脑脑延延髓髓池池时时，注注射射者者会会感感到到针针头头再再向向前前穿穿时时无无阻阻力力，同同时时可可以以听听到到很很轻轻的的“咔咔嚓嚓”一一声声，即即表表示示针针头头已已穿穿过过硬硬脑脑膜膜进进入入小小脑脑延延髓髓池池，而而且且可可抽抽出出清清亮亮的的脑脑脊脊液液，注注射射药药物物前前，先先抽抽出出一一些些脑脑脊脊液液，抽抽取取量量根根据据实实验验需需要要注注入入多多少少药药液液决决定定，即即注注入入多多少少抽抽取取多多少少，以

36、以保保持持原原来来脑脊髓腔里的压力。脑脊髓腔里的压力。27.09.202260第六十页，讲稿共八十五页哦 5 5脑脑内内给给药药此此法法常常用用于于微微生生物物学学动动物物实实验验，将将病病原原体体等等接接种种于于被被检检动动物物脑脑内内，然然后后观观察察接接种种后后的的各各种种变变化化。小小鼠鼠脑脑内内给给药药时时，选选套套有有塑塑料料管管、针针尖尖露露出出2mm2mm深深的的5(1/2)5(1/2)针针头头，由由鼠鼠正正中中额额部部刺刺入入脑脑内内，注注入入药药物物或或接接种种物物。给给豚豚鼠鼠、兔兔、狗狗等等进进行行脑脑内内注注射射时时，须须先先用用穿穿颅颅钢钢针针穿穿透透颅颅骨骨，再再

37、用用注注射射器器针针头头刺刺入入脑脑部部，再再徐徐徐徐注注入入被检物。注射速度一定要慢，避免引起颅内压急骤升高。被检物。注射速度一定要慢，避免引起颅内压急骤升高。27.09.202261第六十一页，讲稿共八十五页哦 6 6直直肠肠内内给给药药此此种种给给药药方方法法常常用用于于动动物物麻麻醉醉。家家兔兔直直肠肠内内给给药药时时，取取灌灌肠肠用用的的胶胶皮皮管管或或用用1414号号导导尿尿管管代代替替。在在胶胶皮皮管管或或导导尿尿管管头头上上涂涂上上凡凡士士林林，由由助助手手使使兔兔蹲蹲卧卧于于桌桌上上，以以左左臂臂及及左左腋腋轻轻轻轻按按住住兔兔头头及及前前肢肢，以以左左手手拉拉住住兔兔尾尾，

38、露露出出肛肛门门，并并用用右右手手轻轻握握后后肢肢，实实验验者者将将橡橡皮皮管管插插入入家家兔兔肛肛门门内内，浓浓度度约约7 79cm9cm，如如为为雌雌性性动动物物，注注意意勿勿误误插插入入阴阴道道（肛肛门门紧紧接接尾尾根根）。橡橡皮皮管管插插好好后后，将将注注射射器器与与橡橡皮皮管套紧，即可灌注药液。管套紧，即可灌注药液。27.09.202262第六十二页，讲稿共八十五页哦 7 7关关节节腔腔内内给给药药此此种种方方法法常常用用于于关关节节炎炎的的动动物物模模型型复复制制。兔兔给给药药时时，将将兔兔仰仰卧卧固固定定于于兔兔固固定定台台上上，剪剪去去关关节节部部被被毛毛，用用碘碘酒酒或或酒酒

39、精精消消毒毒，然然后后用用手手从从下下方方和和两两旁旁将将关关节节固固定定，把把皮皮肤肤稍稍移移向向一一侧侧，在在膑膑韧韧带带附附着着点点处处上上方方约约0.50.5厘厘米米处处进进针针。针针头头从从上上前前方方向向下下后后方方倾倾斜斜刺刺进进，直直至至针针头头遇遇阻阻力力变变小小，然然后后针针头头稍稍后后退退，以以垂垂直直方方向向推推到到关关节节腔腔中中。针针头头进进入入关关节节腔腔时时，通通常常可可有有好好象象刺刺破破薄薄膜膜的的感感觉觉，表示针头已进入膝关节腔内，即可注入药液。表示针头已进入膝关节腔内，即可注入药液。27.09.202263第六十三页，讲稿共八十五页哦第八节 麻醉方法麻醉

40、(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。一、常用的麻醉剂动物实验中常用的麻醉剂分为三类，即挥发性麻醉剂、非挥发性麻醉剂和中药麻醉剂。27.09.202264第六十四页，讲稿共八十五页哦11挥发性麻醉剂挥发性麻醉剂 包包括括乙乙醚醚、氯氯仿仿等等，乙乙醚醚吸吸入入麻麻醉醉适适用用于于各各种种动动物物，其其麻麻醉醉量量和和致致死死量量差差距距大大，所所以以安安全全度度亦亦大大，动动物物麻麻醉醉深深度度容容易易掌掌握握，而而且且麻麻后后苏苏醒醒较较快快。其其缺缺点点是是对对局局部部刺刺激激作作用用大大，可可

41、引引起起上上呼呼吸吸道道粘粘膜膜液液体体分分泌泌增增多多，再再通通过过神神经经反反射射可可影影响响呼呼吸吸、血血压压和和心心跳跳活活动动，并并且且容容易易引引起起窒窒息息，故故在在乙乙醚醚吸吸入入麻麻醉醉时时必必需需有有人人照照看看，以以防防麻麻醉醉过过深深而而出出现现以以上上情情况况。27.09.202265第六十五页，讲稿共八十五页哦22非挥发性麻醉剂非挥发性麻醉剂 这这类类麻麻醉醉剂剂种种类类较较多多，包包括括苯苯巴巴比比妥妥钠钠、戊戊巴巴比比妥妥钠钠、硫硫喷喷妥妥钠钠等等巴巴比比妥妥类类的的衍衍生生物物，氨氨基基甲甲酸酸乙乙脂脂和和水水合合氯氯醛醛。这这些些麻麻醉醉剂剂使使用用方方便便

42、，一一次次给给药药可可维维持持较较长长的的麻麻醉醉时时间间，麻麻醉醉过过程程较较平平衡衡，动动物物无无明明显显挣挣扎扎现现象象。但但缺缺点点是苏醒较慢。是苏醒较慢。3中药麻醉剂 动动物物实实验验时时有有时时也也用用到到象象洋洋金金花花和和氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱等等中中药药麻麻醉醉剂剂，但但由由于于其其作作用用不不够够稳稳定定，而而且且常常需需加加佐佐剂剂麻麻醉醉效效果果才才能能理理想想，故故在在使使用用过过程程中中不不能能得得到到普普及及，因因而而，多多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。27.09.202266第六十六页，讲稿共八十五页哦二、动物的麻醉方

43、法二、动物的麻醉方法11全身麻醉全身麻醉（1 1）吸入法）吸入法 用用一一块块圆圆玻玻璃璃板板和和一一个个钟钟罩罩或或一一个个密密闭闭的的玻玻璃璃箱箱作作为为挥挥发发性性麻麻醉醉剂剂的的容容器器，多多选选用用乙乙醚醚作作麻麻药药。麻麻醉醉时时用用几几个个棉棉球球，将将乙乙醚醚倒倒入入其其中中，迅迅速速转转入入钟钟罩罩或或箱箱内内，让让其其挥挥发发，然然后后把把待待麻麻醉醉动动物物投投入入，约约隔隔4 46 6分分钟钟即即可可麻麻醉醉，麻麻醉醉后后应应立立即即取取出出，并并准准备备一一个个蘸蘸有有乙乙醚醚的的棉棉球球小小烧烧杯杯，在在动动物物麻麻醚醚变变浅浅时时给给套套在在鼻鼻上上使使其其补补吸

44、吸麻麻药药。本本法法最最适适于于大大、小小鼠鼠的的短短期期操操作作性性实实验验的的麻麻醉醉，也也可可用用于于较较大大的的动动物物。由由于于乙乙醚醚燃燃点点很很低低，遇火极易燃烧，所以在使用时，一定要远离火源。遇火极易燃烧，所以在使用时，一定要远离火源。27.09.202267第六十七页，讲稿共八十五页哦（2）腹腔和静脉给药麻醉法 非非挥挥发发性性和和中中药药麻麻醉醉剂剂均均可可用用作作腹腹腔腔和和静静脉脉注注射射麻麻醉醉，操操作作简简便便，是是实实验验室室最最常常采采用用的的方方法法之之一一。腹腹腔腔给给药药麻麻醉醉多多用用于于大大小小鼠鼠和和豚豚鼠鼠，较较大大的的动动物物如如兔兔、狗狗等等则

45、则多多用用静静脉脉给给药药进进行行麻麻醉醉。由由于于各各麻麻醉醉剂剂的的作作用用长长短短以以及及毒毒性性的的差差别别。所所以以在在腹腹腔腔和和静静脉脉麻麻醉醉时时，一一定定要要控控制制药药物物的的浓浓度度和和注注射射量量。27.09.202268第六十八页，讲稿共八十五页哦22局部麻醉局部麻醉 猫猫的的局局部部麻麻醉醉一一般般应应用用0.50.51.0%1.0%盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因注注射射。粘粘 膜膜 表表 面面 麻麻 醉醉 宜宜 用用 2%2%盐盐 酸酸 可可 卡卡 因因。兔兔在在眼眼球球手手术术时时，可可于于结结膜膜囊囊滴滴入入0.02%0.02%盐盐酸酸可可卡卡因溶液，数秒钟即可出现

46、麻醉。因溶液，数秒钟即可出现麻醉。狗狗的的局局部部麻麻醉醉用用0.50.51%1%盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因注注射射。眼眼鼻鼻、咽喉表面麻醉可用咽喉表面麻醉可用2%2%盐酸可卡因。盐酸可卡因。27.09.202269第六十九页，讲稿共八十五页哦3.3.麻醉效果的观察麻醉效果的观察 动动物物的的麻麻醉醉效效果果直直接接影影响响实实验验的的进进行行和和实实验验结结果果。如如果果麻麻醉醉过过浅浅，动动物物会会因因疼疼痛痛而而挣挣扎扎，甚甚至至出出现现兴兴奋奋状状态态，呼呼吸吸心心跳跳不不规规则则，影影响响观观察察。麻麻醉醉过过深深，可可使使机机体体的的反反应应性性降降低低，甚甚至至消消失失，更更为为严

47、严重重的的是是抑抑制制延延髓髓的的心心血血管管活活动动中中枢枢和和呼呼吸吸中中枢枢，使使呼呼吸吸、心心跳跳停停止止，导导致致动动物物死死亡亡。因因此此，在在麻麻醉醉过过程程中中必必须须善善于于判判断断麻麻醉醉程程度度，观观察察麻醉效果。判断麻醉程度的指标有：麻醉效果。判断麻醉程度的指标有：27.09.202270第七十页，讲稿共八十五页哦 呼呼吸吸：加加快快或或不不规规则则，则则麻麻醉醉过过浅浅，可可再再追追加加麻麻醉醉，若若呼呼吸吸由由不不规规则则转转变变为为规规则则且且平平稳稳，说说明明已已达达到到麻麻醉醉深深度度。若若动动物物呼呼吸吸变变慢慢，且且以以腹腹式式呼呼吸吸为为主主，说说明明麻

48、麻醉过深，动物有生命危险。醉过深，动物有生命危险。反射活动：角膜反射灵敏，则麻醉过浅；反射迟钝，麻醉程度适宜；反射消失，伴瞳孔散大，则麻醉过深。肌张力：亢进，麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适。肌张力：亢进，麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适。皮皮肤肤夹夹捏捏反反应应：麻麻醉醉过过程程中中可可随随时时用用止止血血钳钳或或有有齿齿镊镊夹夹捏捏动动物物皮皮肤肤，若若反反应应灵灵敏敏，则则麻麻醉醉过过浅浅；若若反反应应消消失失，则则麻麻醉程度合适。醉程度合适。27.09.202271第七十一页，讲稿共八十五页哦4麻醉注意事项静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张性、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显

49、减弱或消失时，立即停止注射。配制的药液浓度要适中，不可过高，以兔麻醉过急；但也不能过低，以减少注入溶液的体积。27.09.202272第七十二页，讲稿共八十五页哦 麻麻醉醉时时需需注注意意保保温温。麻麻醉醉期期间间，动动物物的的体体温温调调节节机机能能往往往往受受到到抑抑制制，出出现现体体温温下下降降，可可影影响响实实验验的的准准确确性性。此此时时常常需需采采取取保保温温措措施施。保保温温的的方方法法有有，实实验验桌桌内内装装灯灯，电电褥褥，台台灯灯照照射射等等。无无论论用用哪哪种种方方法法加加温温都都应应根根据据动动物物的的肛肛 门门 体体 温温 而而 定定。常常 用用 实实 验验 动动 物

50、物 正正 常常 体体 温温：猫猫 为为38.61.038.61.0，兔为，兔为38.41.038.41.0，大鼠为，大鼠为39.30.539.30.5。作慢性实验时，在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平。27.09.202273第七十三页，讲稿共八十五页哦第九节 处死方法当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。27.09.202274第七十四页，讲稿共八十五页哦一、蛙一、蛙 类类 常常用用金金属属