实验一分光光度计的性能检验.ppt

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1、实验一分光光度计的性能检验现在学习的是第1页，共13页目 的（1）学会使用分光光度计。（2）掌握分光光度计的性能检验方法。现在学习的是第2页，共13页实验原理实验原理（1）分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结）分光光度计的性能好坏，直接影响到测定结果的准确性，因此新购仪器及使用一定时间后，果的准确性，因此新购仪器及使用一定时间后，均需进行检验调整。均需进行检验调整。（2）利用）利用KMnO4溶液的最大吸收值来检验波长的溶液的最大吸收值来检验波长的精度。精度。（3）同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等原因，）同种厚度的比色皿，由于材料及工艺等原因，往往造成透光率的不一致，从而影响测定结果，故往往

2、造成透光率的不一致，从而影响测定结果，故在使用时需加以选择配对。在使用时需加以选择配对。现在学习的是第3页，共13页仪器和试剂（1）722型分光光度计型分光光度计（2）容量瓶：）容量瓶：25ml 1支；支；100ml 1 支支（3）吸量管：）吸量管：1ml 1支，支，10ml 1 支支（4）0.2mol/L KMnO4溶液溶液（5）0.02mol/L K2Cr2O7溶液溶液现在学习的是第4页，共13页操作步骤操作步骤11比色皿透光率的检查比色皿透光率的检查 以空气的透光率为以空气的透光率为100%，则比色皿的，则比色皿的透光率透光率应不应不低于低于84%，同时在，同时在450nm、650nm处

3、测其透光率，处测其透光率，各透光率差值应小于各透光率差值应小于5%。2比色皿的配对性比色皿的配对性 同种厚度的比色皿之间，同种厚度的比色皿之间，透光率透光率误差应小于误差应小于0.5%。检查方法：将检查方法：将0.02mol/L的的K2Cr2O7溶液溶液5ml稀释到稀释到25ml,分别注入厚度相同的几个比色皿中。以其中分别注入厚度相同的几个比色皿中。以其中一个比色皿的溶液做空白，在一个比色皿的溶液做空白，在440nm波长处分别波长处分别测定其它各比色皿中溶液的透光率，然后选择相测定其它各比色皿中溶液的透光率，然后选择相差小于差小于0.5%的比色皿使用。的比色皿使用。现在学习的是第5页，共13页

4、操作步骤操作步骤23.重现性重现性 仪器在同一工作条件下仪器在同一工作条件下(440)，用同种溶液，用同种溶液连续测定连续测定7次，其次，其透光率透光率最大读数与最小读最大读数与最小读数之差数之差(极差极差)应小于应小于0.5%。检查方法如下检查方法如下:以蒸馏水的透光率为以蒸馏水的透光率为100%,用同一用同一K2Cr2O7溶液连续测定溶液连续测定7次，求出极次，求出极差，如小于差，如小于0.5%，则符合要求。，则符合要求。现在学习的是第6页，共13页操作步骤操作步骤24.波长精度的检查波长精度的检查 为了检查分光系统的质量为了检查分光系统的质量,可用可用 KMnO4溶液的溶液的吸光度吸光度

5、最大吸收波长最大吸收波长525nm为标准为标准,在待在待检查仪器上测绘检查仪器上测绘KMnO4溶液的吸收曲线。溶液的吸收曲线。检查方法如下检查方法如下:取取0.2mol/L的的KMnO4溶液溶液0.3ml,用水稀用水稀释到释到100ml。以水为空白调零，在。以水为空白调零，在460570nm处，每隔处，每隔5nm分别测定吸光度，在坐标纸上绘出吸收曲线。若测得分别测定吸光度，在坐标纸上绘出吸收曲线。若测得的最大吸收波长在的最大吸收波长在52510nm以内，说明该仪器符合使用以内，说明该仪器符合使用要求。要求。现在学习的是第7页，共13页722型分光光度计使用方法型分光光度计使用方法 1.开机后需

6、预热开机后需预热20分钟。分钟。2.波长设定需从短波向长波方向调整。波长设定需从短波向长波方向调整。3.调零需在调零需在透射比透射比模式下将比色皿架置于调零档。模式下将比色皿架置于调零档。4.调满度时将空白样品置于光路，按调满度时将空白样品置于光路，按100%T（OA）键。键。5.按方式键可实现透射比，吸光度方式转换。按方式键可实现透射比，吸光度方式转换。6.波长改变后千万不能忘了再调到零和调满度。波长改变后千万不能忘了再调到零和调满度。现在学习的是第8页，共13页注意事项 1.待测溶液装量应超过比色皿待测溶液装量应超过比色皿2/3，但也不，但也不能装得太满。能装得太满。2.实验过程中，注意不

7、要将溶液撒入机器实验过程中，注意不要将溶液撒入机器内部，如果发生上述情况，请及时清理干内部，如果发生上述情况，请及时清理干净。净。3.比色皿用后，请洗净后，用比色皿用后，请洗净后，用95%乙醇浸乙醇浸泡，长期不用，请擦干后，收好。泡，长期不用，请擦干后，收好。现在学习的是第9页，共13页300400500600700/nm350525 545Cr2O72-MnO4-1.00.80.60.40.2AbsorbanceCr2O72-、MnO4-的吸收光谱的吸收光谱350现在学习的是第10页，共13页数据数据1比色皿透光率的检查比色皿透光率的检查 4个比色皿在个比色皿在450nm、650nm的透光率

8、的透光率2比色皿的配对性比色皿的配对性4个比色皿中个比色皿中K2Cr2O7溶液在溶液在440nm的透光率的透光率3.重现性重现性1个比色皿中个比色皿中K2Cr2O7溶液在溶液在440nm的透光率的透光率4.波长精度的检查波长精度的检查1个比色皿中个比色皿中KMnO4溶液在溶液在460570nm吸光度吸光度现在学习的是第11页，共13页思考题1同种比色皿透光度的差异对测定有何同种比色皿透光度的差异对测定有何影响？影响？2检查分光光度计的波长精度及重现性检查分光光度计的波长精度及重现性对测定有什么实际意义？对测定有什么实际意义？3使用使用721或或722型分光光度计时，应型分光光度计时，应注意哪能些问题？注意哪能些问题？现在学习的是第12页，共13页下一次实验内容：下一次实验内容：水中微量铁的测定水中微量铁的测定现在学习的是第13页，共13页