实验一病理组织切片制作技术.ppt

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1、实验一病理组织切片制作技术动物病理学现在学习的是第1页，共28页兽医病理解剖学实验 实验内容 实验一 病理组织切片制作技术实验二 局部血液循环障碍：充血、淤血、缺血、梗死、出血 实验三 局部血液循环障碍 血栓、水肿实验四 组织细胞的变性现在学习的是第2页，共28页兽医病理解剖学实验实验五 组织细胞坏死 实验六 组织细胞病理性物质沉着 及组织修复 实验七 炎症实验八 肿瘤 实验内容现在学习的是第3页，共28页兽医病理解剖学实验 实验九 心脏血管系统病理实验十 呼吸系统病理实验十一 消化系统病理实验十二 泌尿系统病理实验十三 中枢神经系统病理实验内容现在学习的是第4页，共28页兽医病理解剖学实验

2、前言 兽医病理解剖学实验部分在本课程教学中占有特殊地位。学生通过观察肉眼和切片标本印证课堂所讲的理论，加强理解，取得感性知识的教学环节。在学习过程中，要求同学初步掌握观察和描述器官组织病变的方法和认识病变。现在学习的是第5页，共28页兽医病理解剖学实验现在学习的是第6页，共28页兽医病理解剖学实验现在学习的是第7页，共28页兽医病理解剖学实验实验一实验一 病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术现在学习的是第8页，共28页兽医病理解剖学实验目的要求：1、重点掌握病理组织切片的基本制作过程步骤。2、了解病理组织切片制作过程中的注意事项。现在学习的是第9页，共28页兽医病理解剖学实验实验内容 掌握

3、组织材料的取材、固定、脱水、透明、包埋、切片、烤片、脱蜡、染色及封固的基本操作。现在学习的是第10页，共28页兽医病理解剖学实验一、取材及固定（一）取材注意事项：1、材料新鲜 2、组织块力求小而薄 3、勿使组织块受挤压 4、尽量保持组织的原有形态 5、熟悉取材部位现在学习的是第11页，共28页兽医病理解剖学实验（一）取材注意事项：6、选好组织块的切面 7、保持材料的清洁 8、切除不需要的部位现在学习的是第12页，共28页兽医病理解剖学实验（二）固定及目的：应用化学试剂使组织或细胞中的无机成分和有机成分凝固或沉淀，以保持其生活状态的过程称为固定。现在学习的是第13页，共28页兽医病理解剖学实验

4、固定液是10%福尔马林溶液（4%甲醛溶液），固定24小时以上。现在学习的是第14页，共28页兽医病理解剖学实验 固定的目的1、迅速阻止组织、细胞死后变化，防止自溶与腐败，使之尽量保持生前的状态与结构。2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质，以保持其原有状态。3、使组织内各种物质成分产生不同的折光率，以便染色后易于鉴别和观察。4、使组织块硬化，便于制作薄片。现在学习的是第15页，共28页兽医病理解剖学实验固定的注意事项1、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽也应小于1515mm。2、固定液与组织块的比例应大于10：1。3、软组织或较大组织块可先经2-3小时固定后再修整成小块，重新

5、投入新配制的固定液中继续固定。4、肠道可在浆膜面贴上一层厚纸，以防固定组织变形。现在学习的是第16页，共28页兽医病理解剖学实验 二、固定后处理及切片(一)、洗涤与修切(二)、脱水与透明 脱水：将组织块内水分置换的过程。透明：乙醇和石蜡不互溶，最常用的透明剂是二甲苯。既能溶于脱水剂又能溶于包埋剂（石蜡），透明必须适度。现在学习的是第17页，共28页兽医病理解剖学实验50%乙醇:30-60min70%乙醇:1-2小时或过夜80%乙醇:1-2小时95%乙醇:1-1.5小时100%乙醇:30min100%乙醇:20min1：1无水乙醇：二甲苯:20min二甲苯:10-30min 现在学习的是第18页

6、，共28页兽医病理解剖学实验生物组织脱水机现在学习的是第19页，共28页兽医病理解剖学实验(三)、浸蜡与包埋 52-58石蜡，浸蜡的全过程在60的温箱中进行。1：1二甲苯：石蜡:30min 石蜡:30min 石蜡:30min 石蜡:30min现在学习的是第20页，共28页兽医病理解剖学实验组织包埋机 现在学习的是第21页，共28页兽医病理解剖学实验（四）切片、粘片1、切片前处理及切片2、载玻片处理3、粘片（展片）4、烤片 现在学习的是第22页，共28页兽医病理解剖学实验轮转式组织切片机现在学习的是第23页，共28页兽医病理解剖学实验三、脱蜡和染色三、脱蜡和染色（一）、脱蜡1、二甲苯:5-10m

7、in2、二甲苯:5-10min3、1：1二甲苯：乙醇（冬20min）:5min4、无水乙醇、95%、80%、70%、50%梯度乙醇每级1-2min5、蒸馏水1-2min现在学习的是第24页，共28页兽医病理解剖学实验（二）、染色（HE染色法）1、苏木素染液:515min2、蒸馏水（洗去多余的染液）:30s3、分色:1%盐酸-70%乙醇分色:1-30s4、蓝化:自来水冲洗（碱化，核蓝色）:15-20min5、蒸馏水（洗去多余的碱）:1-2min现在学习的是第25页，共28页兽医病理解剖学实验6、逐级入50%、70%、85%乙醇，:每级1-2min 7、伊红-95%乙醇染液:15s2min8、95%、无水乙醇、无水乙醇逐级 脱水，每级1-2min9、1：1无水乙醇：二甲苯:5min10、二甲苯 ：5min11、二甲苯：5min现在学习的是第26页，共28页兽医病理解剖学实验组织切片染色机 现在学习的是第27页，共28页兽医病理解剖学实验四、封固 滴加中性树胶，加盖玻片封片。现在学习的是第28页，共28页