实验细菌的接种及分离培养.ppt

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1、实验细菌的接种及分离培养现在学习的是第1页，共22页目的要求目的要求n n1、学习和掌握细菌分离与培养、学习和掌握细菌分离与培养的各种基本技术；的各种基本技术；n n2、进一步熟悉和掌握无菌操作、进一步熟悉和掌握无菌操作技术。技术。现在学习的是第2页，共22页实验材料实验材料n n标本和菌种：咽拭子、葡萄球菌培养物、标本和菌种：咽拭子、葡萄球菌培养物、变形杆菌培养物；变形杆菌培养物；n n实验器材：接种环、接种针、酒精灯；实验器材：接种环、接种针、酒精灯；n n培养基：普通琼脂平板、试管斜面、液培养基：普通琼脂平板、试管斜面、液体培养基、半固体培养基；体培养基、半固体培养基；现在学习的是第3页

2、，共22页n n常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃常用的有接种针、接种环、接种钩、接种圈、接种铲或接种锄、玻璃涂棒等（见图涂棒等（见图涂棒等（见图涂棒等（见图6 6 6 6）。）。）。）。图6接种工具接种工具现在学习的是第4页，共22页细菌接种的基本程序细菌接种的基本程序灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环沾取标本沾取标本沾取标本沾取标本接种接种接种接种灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌

3、，以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境现在学习的是第5页，共22页（一）细菌的分离方法（一）细菌的分离方法n n培养基培养基：固体平板培养基：固体平板培养基n n分离方法：分离方法：划线分离法划线分离法n n意义：意义：该法主要是借助划线而将混杂的该法主要是借助划线而将混杂的细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌能细菌在琼脂表面分散开，使单个细菌能固定在某一点，生长繁殖后形成单个菌固定在某一点，生长繁殖后形成单个菌落，以达

4、到分离纯种的目的。落，以达到分离纯种的目的。细菌的分离培养方法细菌的分离培养方法现在学习的是第6页，共22页微生物的分离微生物的分离平板划线法平板划线法n n1.分区划线法：分区划线法：n n2.连续划线法：连续划线法：现在学习的是第7页，共22页微生物的分离微生物的分离平板划线法平板划线法现在学习的是第8页，共22页现在学习的是第9页，共22页分区划线法分区划线法第一区划线第一区划线第一区划线第一区划线灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环第二区划线第二区划线第二区划线第二区划线灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环第三区划线第三区划线第三区划线第三区划线灭菌接种环灭菌接种环灭菌接种环灭

5、菌接种环现在学习的是第10页，共22页连续划线法连续划线法现在学习的是第11页，共22页（二）细菌的接种法（二）细菌的接种法n n当细菌分离成纯种后，常需要接种到相当细菌分离成纯种后，常需要接种到相关的培养基中，以测试其各种生物学性关的培养基中，以测试其各种生物学性状。一般可用斜面、半固体、液体培养状。一般可用斜面、半固体、液体培养基来检验细菌的培养特性，相应培养基基来检验细菌的培养特性，相应培养基的接种方法有三种。的接种方法有三种。现在学习的是第12页，共22页斜面接种法斜面接种法n n培养基：培养基：培养基：培养基：斜面固体斜面固体培养基；培养基；n n接种方法：接种方法：斜面斜面培养基接

6、种法；培养基接种法；n n用途：用途：用途：用途：扩增细菌、扩增细菌、保存菌种；或用保存菌种；或用于观察其某些生于观察其某些生化特性。化特性。现在学习的是第13页，共22页琼脂斜面培养基接种法琼脂斜面培养基接种法现在学习的是第14页，共22页穿刺接种穿刺接种n n半固体培养基：半固体培养基：n n接种方法：穿刺接接种方法：穿刺接接种方法：穿刺接接种方法：穿刺接种法。用种法。用种法。用种法。用接种针接种针接种针接种针垂直垂直垂直垂直地穿入培养基中心至底地穿入培养基中心至底地穿入培养基中心至底地穿入培养基中心至底部部部部n n然后沿着然后沿着然后沿着然后沿着原接种线原接种线原接种线原接种线将将将将

7、针拔出针拔出针拔出针拔出n n用途：检验细菌的运动用途：检验细菌的运动用途：检验细菌的运动用途：检验细菌的运动性或观察细菌的生化反性或观察细菌的生化反性或观察细菌的生化反性或观察细菌的生化反应。应。应。应。现在学习的是第15页，共22页液体培养基接种法液体培养基接种法n n培养基：培养基：培养基：培养基：液体培养基：液体培养基：液体培养基：液体培养基：n n接种方法：接种方法：接种方法：接种方法：液体接种法液体接种法液体接种法液体接种法n n从斜面菌种接入液体培从斜面菌种接入液体培从斜面菌种接入液体培从斜面菌种接入液体培养液养液养液养液n n从液体培养液接入液从液体培养液接入液体培养液体培养液

8、n n用途：用途：扩增细菌，用扩增细菌，用扩增细菌，用扩增细菌，用于观察细菌的生长特性于观察细菌的生长特性于观察细菌的生长特性于观察细菌的生长特性或测定其生化特性。或测定其生化特性。或测定其生化特性。或测定其生化特性。现在学习的是第16页，共22页细菌培养法细菌培养法n n一般培养（需氧培养）：一般培养（需氧培养）：培养温度：培养温度：37（采用恒温培养箱）（采用恒温培养箱）培养时间：培养时间：1824hn n二氧化碳培养法：二氧化碳培养法：烛缸法、二氧化碳培烛缸法、二氧化碳培养箱养箱n n厌氧培养法：厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等氧罐

9、、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等现在学习的是第17页，共22页细菌在细菌在固体固体培养基中的生长现象培养基中的生长现象n n菌落：菌落：菌落：菌落：定义：定义：定义：定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。一肉眼可见的细菌集团。一肉眼可见的细菌集团。一肉眼可见的细菌集团。菌落特征：菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度

10、、溶血性湿润度、黏度、溶血性湿润度、黏度、溶血性湿润度、黏度、溶血性菌落类型：菌落类型：光滑型（光滑型（光滑型（光滑型（S S S S）、粗糙型（）、粗糙型（）、粗糙型（）、粗糙型（R R）、黏液型（）、黏液型（M M）n n菌苔：菌苔：菌苔：菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。现在学习的是第18页，共22页菌 落现在学习的是第19页，共22页菌落与菌苔菌落与菌苔现在学习的是第20页，共22页细菌在细菌在液体液体培养基中的生长现象培养基中的生长现象n n混浊混浊n n沉淀：多见于链状排列的细菌沉淀：多见于链状排列的细菌n n菌膜：多见于厌氧菌菌膜：多见于厌氧菌现在学习的是第21页，共22页细菌在液体培养基中的生长现象细菌在液体培养基中的生长现象现在学习的是第22页，共22页