实验三网织红细胞计数血沉测定课件.ppt

《实验三网织红细胞计数血沉测定课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验三网织红细胞计数血沉测定课件.ppt（17页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、关于实验三网织红细胞计数血沉测定现在学习的是第1页，共17页一、网织红细胞计数一、网织红细胞计数目的目的 掌握网织红细胞（Ret)试管法计数的原理及操作方法。原理原理 网织红细胞胞质内残存少量核蛋白体及核糖核酸等嗜碱性物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝等染液活活体体染色后，呈蓝色网状或点状结构蓝色网状或点状结构，可与成熟红细胞相区别。现在学习的是第2页，共17页器材 显微镜、试管、吸管、玻片、推片、香柏油、擦镜纸、擦镜液试剂 新亚甲蓝标本 新鲜全血现在学习的是第3页，共17页操作步骤操作步骤1.加染液加染液 将Ret染液2滴加至小试管中，做好标记。2.2.加血加血 在已加入染液的小试管内注入新鲜全血2

2、滴，立即混匀。3.3.染色染色 室温下染色10-15min。4.4.涂片制备涂片制备 取染色血1小滴推制成薄血涂片，自然干燥5.5.观察观察 低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好、背景清晰的部位进行计数。6.6.计数计数 常规法：在油镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞。7.7.计算计算 Ret百分数=（1000个RBC中的Ret数/1000）100%8.8.结果报告结果报告 网织红细胞百分数：X.X%现在学习的是第4页，共17页血涂片制备推片载玻片血液将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾 涂片干燥后用铅笔铅笔在血涂片的头部写上姓名和编

3、号李四B 1 2 3现在学习的是第5页，共17页参考区间参考区间成人、儿童：成人、儿童：0.5%-1.5%新新 生生 儿：儿：2.0%-6.0%现在学习的是第6页，共17页注意事项注意事项1.1.试剂准备试剂准备 推荐使用新亚甲蓝染液，试剂应定期配制，用前过滤。2.2.染色染色 染液与血液比以1:1为宜,染色时间不能过短。试剂用后及时盖好盖子，以免挥发。3.3.标本标本 应及时染色，及时测定。4.4.计数计数 选择红细胞分布均匀，网织红细胞着色好的、背景清晰的部位计数。应兼顾血片边缘和尾部。现在学习的是第7页，共17页目的 掌握魏氏法测定血沉的原理及方法。原理 将一定量的枸橼酸钠抗凝全血置于魏

4、氏血沉管中，直立于血沉架上，由于红细胞比重大于血浆，克服血浆阻力而下沉，1h后读取上层血浆高度的毫米数，即为红细胞沉降率。器材 魏氏管、血沉架、洗耳球。（血沉管）试剂 109mmol/L枸橼酸钠溶液。标本 外周血。二、血液沉降率测定（魏氏法）二、血液沉降率测定（魏氏法）现在学习的是第8页，共17页1.1.采血采血 采静脉血1.6ml加入含0.4ml 109mmol/L枸橼酸钠溶液抗凝剂的采血管中（即采血量到采血管2ml刻度线处），混匀。2.2.吸血吸血 混匀血吸入血沉管内至刻度“0”处，拭去管外残余血。3.3.立血沉管立血沉管 将血沉管直立于血沉架上。4.4.读数读数 1h末准确读取红细胞下沉

5、后露出的血浆高度。5.5.报告方式报告方式 XX mm/h操作步骤操作步骤现在学习的是第9页，共17页参考值参考值 50岁：男性岁：男性 15mm/h15mm/h 女性女性 20mm/h20mm/h 50岁：男性岁：男性 20mm/h20mm/h 女性女性 30mm/h30mm/h 85岁：男性岁：男性 30mm/h0mm/h 女性女性 42mm/h42mm/h 儿童儿童:10mm/hmm/h二、血液沉降率测定（魏氏法）二、血液沉降率测定（魏氏法）现在学习的是第10页，共17页注意事项注意事项 1.严格控制采血量，使抗凝剂与血液比例为1：4。2.血沉管应垂直放置，不得倾斜。3.测量时，血沉架应

6、避免直接光照、移动和振动。4.本实验最适宜温度为1825，并要求在采血后 2h内完成。5.红细胞沉降率在1h沉降过程中，并不是均衡等速度的沉降，绝不可以只观察30min沉降率，将结果乘以2作为1h血沉结果。现在学习的是第11页，共17页二、血液沉降率测定（自动血沉仪法）二、血液沉降率测定（自动血沉仪法）现在学习的是第12页，共17页白细胞计数白细胞计数一一、目的目的 掌握显微镜白细胞计数的方法。掌握显微镜白细胞计数的方法。二、二、原理原理 用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后，在

7、显微镜下计数一定体积内的白细胞数，池后，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数。经换算求出每升血液中的白细胞数。现在学习的是第13页，共17页三、器材三、器材 显微镜、改良计数板、血盖片、试管、微量显微镜、改良计数板、血盖片、试管、微量 吸管、吸管、加样枪、乳胶吸头、纱布加样枪、乳胶吸头、纱布四、试剂四、试剂 白细胞稀释液白细胞稀释液五、标本五、标本 EDTA盐抗凝血盐抗凝血现在学习的是第14页，共17页六、操作六、操作1.加稀释液加稀释液 用加样枪吸取白细胞稀释液用加样枪吸取白细胞稀释液0.38ml于小于小试管中。试管中。2.加血加血 用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血

8、用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20l，擦去管，擦去管外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部，再轻吸上外余血，轻轻加至白细胞稀释液底部，再轻吸上清液清洗吸管清液清洗吸管23次，混匀。次，混匀。3.充池充池 混匀后用微量吸管将细胞悬液冲入计数池，室混匀后用微量吸管将细胞悬液冲入计数池，室温下平放温下平放35分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。分钟，待细胞下沉后于显微镜下计数。4.计数计数 用低倍镜依次计数四角用低倍镜依次计数四角4个大方格内的白细个大方格内的白细胞数。胞数。5.计算计算 白细胞白细胞/L=N/41020106=N/20109/L6.报告方式报告方式 X.X109/L。现在学习的是第15页，共

9、17页七、注意事项七、注意事项 1.充池前应将白细胞悬液充分混匀。充池前应将白细胞悬液充分混匀。2.在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或在充池时要一次完成，不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。充池不足及充液后玻片移动的现象。3.白细胞在计数池中若分布不均，各大方格间细白细胞在计数池中若分布不均，各大方格间细胞计数不得相差胞计数不得相差8个以上，应重新计数。个以上，应重新计数。4.白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的方白细胞数量过多时，可采取加大稀释倍数的方法。法。5.白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使白细白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使白细胞计数偏高，此时应计算白细胞校正值。胞计数偏高，此时应计算白细胞校正值。现在学习的是第16页，共17页感谢大家观看现在学习的是第17页，共17页