微生物标本检验的采集.ppt
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1、微生物标本检验的采集现在学习的是第1页,共81页正确采集标本的意义正确采集临床微生物标本,直接影响微生物培养鉴定和药敏结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的控制感染提供依据,是合理使用抗生素,延缓细菌耐药,和监测医院感染的第一步。因此应正确采集微生物标本。现在学习的是第2页,共81页血液及骨髓标本的微生物检验血液及骨髓标本的微生物检验一、检验项目 血液及骨髓液的细菌培养二、标本采集现在学习的是第3页,共81页【标本采集前的注意事项标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。【标本送检指征标本送检指征】病人出现
2、以下临床表现,或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。1 发热(38)或低温(36)2 寒战3 白细胞增多(10109/L,特别有“核左移”时)4 粒细胞减少(成熟的多形核白细胞1109/L)5 血小板减少6 皮肤、粘膜出血7 昏迷8 多器官衰竭9 血压降低10 呼吸加快现在学习的是第4页,共81页几种特殊情况:1 可疑新生儿败血症时,除发热或低温外,很少培养出细菌,应增加尿液和脑脊液培养。2老年菌血症病人可能不发热或不低温,如伴有身体不适、肌痛或中风,可能是感染性心内膜炎,也应采取血培养。骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的,临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期
3、使用抗菌药物患者,抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。现在学习的是第5页,共81页【标本采集的容器标本采集的容器】双相血培养瓶 【标本的采集方法标本的采集方法】防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题,采血前严格执行消毒程序是十分重要的。现在学习的是第6页,共81页皮肤消毒程序 严格按以下三步法进行:75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。用一根碘酊或聚维酮碘(碘伏)棉签消毒皮肤,12%碘酊作用30s或碘伏作用60s,从穿刺点向外以1.53cm直径画圈进行消毒75酒精脱碘。对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒,消毒60s,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。2.培养瓶消毒程序用75酒精
4、消毒血培养瓶橡皮塞子。酒精作用60s。在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。3.培养瓶接种程序抽取血液后,不要换针头,直接注入血培养瓶中,轻轻颠倒混匀,以防血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养,应先将标本接种到厌氧瓶中,然后再注入需氧瓶,严格防止将空气注入厌氧瓶中。现在学习的是第7页,共81页【标本采集注意事项标本采集注意事项】1.血培养采集的时间和频率采血培养应尽量在抗菌药物使用之前,在24h内采集23份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养),每次2瓶。因为研究已证实,23份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。入院前2周内接受抗菌
5、药物治疗的患者,连续3天,每天采集2份。对间歇性寒战或发热的患者,应在寒战或体温高峰到来之前0.51h采集血液,或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者,应在不同部位采集23份血培养。不明原因发热,如隐性脓肿、伤寒热和波浪热,先采集23份血标本,2436h后估计体温升高之前,再采集2份以上。可疑为菌血症或真菌血症,但血培养持续阴性,应改变血培养方法,选择其它种类的培养瓶,如高渗培养瓶,中和抗生素培养瓶,结核菌培养瓶等,以获得罕见的或苛氧的微生物。可疑为细菌性心内膜炎,在12h内多部位采集3份血标本,如果 24h
6、阴性,再采取3份以上的血标本。2.采血量成人:推荐每个血培养瓶应加的血量为510ml。儿童:因很难获得大量的血液,一般静脉采血15ml用于血培养 现在学习的是第8页,共81页 *血液量太多或太少都不利于细菌的检出,血液的培养量每增加1ml,阳性率增加35。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素,注入血液太多可能会抑制细菌的生长。现在学习的是第9页,共81页3.骨髓标本的采集 均有医师在病灶部位或髂前(后)上脊严格消毒后抽取骨髓,采量一般为12ml。按要求注入专用培养瓶,立即送检。现在学习的是第10页,共81页【标本的送检地点标本的送检地点】检验科微生物室,非正常上班时间送检验科急诊化验室
7、。*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。【标本的保存标本的保存】含血样的培养瓶应立即送往实验室;如不能及时送检,应将其放在室温,切忌冰箱存放切忌冰箱存放。因为某些苛氧菌可在可在冰箱温度中死亡,而使培养阳性率下降。在运往实验室的途中如果天气寒冷,应采取一定的保温措施。现在学习的是第11页,共81页痰标本的微生物检验痰标本的微生物检验一、检查项目痰液的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。二、标本采集现在学习的是第12页,共81页【标本采集前的注意事项标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗
8、生素,应于下次抗生素应用前采集。【标本送检指征标本送检指征】1 咳嗽、咳痰:痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。2 咯血:肺结核病人常痰中带血。3 呼吸困难4 发热5 胸痛:当炎症病变累及壁层胸膜时,会发生胸痛。*肺部感染的患者有2550可能发生菌血症,应同时作血培养。现在学习的是第13页,共81页【标本采集容器标本采集容器】一次性无菌留痰盒。【标本采集方法标本采集方法】1.自然咳痰法:咳痰前,先用清水或漱口液反复漱口(为减少口腔正常菌群污染标本),然后用力自气管中咳出第一口痰(非后鼻腔分泌物、非唾液)留于无菌容器内。*对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入4510NaCL水溶液,使痰液
9、易于排出。*对咳痰少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,使其咳嗽。2.气管镜采集法:用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。3.胃内采痰法:无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽,有时将痰误咽入胃中,可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。4.管穿刺法:主要用于厌氧菌培养*小儿取痰法:用弯压舌板向后压舌,用棉拭子深入咽部,小儿受到刺激咳嗽时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。现在学习的是第14页,共81页【标本采集注意事项标本采集注意事项】1.采集时间以晨痰为好。多数病人清晨痰较多,易于采集。且清晨痰含有的病理成分较多。会增加培养的阳性率。支气管镜、支气管穿刺支气管肺泡灌注等采集
10、法,必须由医生操作。最好在应用抗菌药物之前采集标本。2.送检采集后应立即送检,以防止某些细菌在外环境中死亡。做结核分支杆菌和真菌培养的标本如不能及时送检,可放4保存,以免杂菌生长。现在学习的是第15页,共81页【标本的送检地点标本的送检地点】检验科微生物室,非正常上班时间送检验科急诊化验室。*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。出,避免细菌污染。现在学习的是第16页,共81页上呼吸道标本的微生物检验上呼吸道标本的微生物检验一、检验项目上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。二、标本采集 现在学习的是第17页,共81页【标本采
11、集前的注意事项标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。【标本送检指征标本送检指征】1病毒性普通感冒伴有明显咽痛时,怀疑为咽部链球菌感染,应做细菌培养。2细菌性咽扁桃体炎:明显咽痛、畏寒、发热,体温可达39以上。3 上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管支气管炎,需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。现在学习的是第18页,共81页【标本采集容器标本采集容器】咽拭子或鼻咽拭子。【标本的采集方法标本的采集方法】嘱患者用清水反复漱口,由检查者将舌向外拉,使腭垂尽可能向外牵引,用无菌棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧,涂抹数次,拭子要避免接
12、触口腔和舌粘膜。现在学习的是第19页,共81页【标本采集注意事项标本采集注意事项】采集时间:应于抗生素应用之前。时间上可无严格限制,但咽部是呼吸和食物的通路,也应晨起后采集为佳。送检:应立即送检。【标本的送检地点标本的送检地点】检验科微生物室,非正常上班时间送检验科急诊化验室。*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染染 现在学习的是第20页,共81页尿液标本的微生物检验尿液标本的微生物检验一、检查项目尿液的细菌培养,真菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。二、标本采集现在学习的是第21页,共81页【标本采集前的注意事项标本采集前的注意事项
13、】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。【标本送检指征标本送检指征】1 有典型的尿路感染症状;2 肉眼脓尿或血尿;3 尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性;4 不明原因的发热,无其他局部症状;5 留置导尿管的病人出现发热;6 膀胱排空功能受损;7 泌尿系统疾病手术前。现在学习的是第22页,共81页【标本采集容器标本采集容器】无菌试管或无菌尿液标本留取容器。【标本的采集方法标本的采集方法】1.清洁中段尿标本,嘱咐患者睡前少饮水。尿液在膀胱内应停留68小时以上。清晨起床后,女性应用手分开大阴唇,用肥皂水或1:1000清洗外阴部及尿道口,然后以清水冲洗
14、,擦干并将前段尿排去,用无菌容器接取中段尿约10ml;男性应翻上包皮冲洗,用2%红汞或1/1000新洁尔灭消毒尿道口,再用清水冲洗尿道口周围,开始排尿,将前段尿排去,插入性接取中段尿约10ml于无菌容器中,立即送检,于一小时内接种。该方法简单、易行,是最常用的尿培养标本收集方法,但很容易受到会阴部细菌污染,应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。2.耻骨上膀胱穿刺:使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液,是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法,但有一定的痛苦,病人难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。现在学习的是第23页,共81页3.直接导尿:按常规方法
15、对会阴部进行清洗消毒后,用导尿管直接经尿道插入膀胱,获取膀胱尿液。可减少尿液标本的污染,准确地反映膀胱感染情况。但有可能将下尿道的细菌引入膀胱,导致继发感染,一般不提倡使用。4.小儿收集包:对于无控制能力的小儿可应用收集包收集尿液,这种装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性,所以只有在检验结果为阴性时才有意义。如果检验结果为阳性,应结合临床进行分析,必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复查。5.留置导尿管收集尿液:利用留置导尿管采集标本时,应先消毒导尿管外部,按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液,操作时应防止混入消毒剂,不能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿患者,应在更换新尿管时
16、留取尿标本。6.集尿法:尿查抗酸杆菌时,留24小时尿液盛于洁净容器内,取其沉渣10ml送检。现在学习的是第24页,共81页【标本采集注意事项标本采集注意事项】1.一般于晨起第一次尿液送检。应选在抗菌药物应用之前。2.尿培养不得加防腐剂或消毒剂。3.标本采集后应立即送检,否则可暂存于4冰箱。【标本的送检地点标本的送检地点】检验科微生物室,非正常上班时间送检验科急诊化验室。*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。避免细菌污染。现在学习的是第25页,共81页粪便标本的微生物检验粪便标本的微生物检验一、检验项目粪便标本的细菌培养、真菌培养、真菌涂
17、片、结核菌涂片。二、标本采集现在学习的是第26页,共81页【标本采集前的注意事项标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。【标本送检指征标本送检指征】1 急性腹泻:大便次数明显增多,腹痛,里急后重,往往伴有发热,大便性状为粘液便或脓血便。2 慢性腹泻:大便次数多,多为稀便,伴有全身乏力等症状。3 无痛性大量水样便或米泔样稀便。4 先吐后泻:恶心、呕吐、腹痛、腹泻。有集体发病史,多为细菌性食物中毒所致。5 抗生素治疗后腹泻:常发生于长期抗生素治疗后,糊状便,排便次数增加。6 高热惊厥:通常为中毒性痢疾,多见于婴幼儿和小儿。现在学习的是
18、第27页,共81页【标本的采集容器标本的采集容器】一次性无菌便盒。【标本的采集方法标本的采集方法】1.自然排便采集法:自然排便后,调取有脓血粘液部位的粪便23g,液状粪便取絮状物13ml盛于无菌的容器内或置于保存液或增菌液中送检。2.直肠拭子法:如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿,可采用直肠拭子方法采集。可用肥皂水将肛门周围清洗,用无菌盐水、保存液或增菌液湿润的无菌棉拭子插入肛门,成人约45cm,儿童约23cm,与直肠粘膜表面接触,轻轻转动,取出后置于灭菌容器内送检。现在学习的是第28页,共81页【标本采集注意事项标本采集注意事项】1.采集时间:应在急性期采样,以提高检出率,最好在用药前。
19、2.送检:要采集新鲜标本立即送检,如不能立即送检,放入Cary-Blair运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油(0.033mol/L PBS与等体积的甘油混合)中运送和保存。【标本的送检地点标本的送检地点】检验科微生物室,非正常上班时间送检验科急诊化验室。*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。出,避免细菌污染。现在学习的是第29页,共81页化脓和创伤标本的微生物检验化脓和创伤标本的微生物检验一、检验项目 脓汁和创伤部位分泌物的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。二、标本采集现在学习的是第30页,共81页【标本采集前的注意事
20、项标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。【标本送检指征标本送检指征】1 局部症状:红、肿、热、痛和功能障碍是化脓性感染的五个典型特征。但随病程迟早、病变范围、位置深浅,五个症状不一定全部表现。病变范围小或位置较深时,局部症状可不明显。2 全身症状:轻重不一。感染较重者常有发热、头痛、全身不适、乏力食欲减退等,一般均有白细胞计数增加和核左移。病程较长时,可有水和电解质紊乱,血浆蛋白减少,肝糖原大量消耗,可出现营养不良、贫血、水肿等症状。全身性感染严重的病人可发生感染性休克。现在学习的是第31页,共81页3 疑为下列疾病时需送检:软
21、组织的急性化脓性炎症:如疖、痈、急性蜂窝织炎、丹毒等。化脓性疾病:如甲沟炎、化脓性关节炎、化脓性骨髓炎、气性坏疽、细菌性结膜炎、鼻窦炎、化脓性扁桃体炎、急性化脓性中耳炎、急性化脓性乳突炎、急性乳房炎、急性胆囊炎、急性梗阻性化脓性胆管炎、心包炎、结核性腹膜炎。脓肿:扁桃体脓肿、咽部脓肿、咽旁脓肿、脑脓肿、肺脓肿、肝脓肿、脓胸、腹腔脓肿、肾皮质化脓性感染、肾周围炎和肾周脓肿、直肠肛管周围脓肿。创伤感染:术后切口感染、导管感染、脐带残端感染。现在学习的是第32页,共81页【标本采集容器标本采集容器】无菌试管或无菌拭子。【标本的采集方法标本的采集方法】1.开放性感染和已溃破的化脓灶:先用灭菌生理盐水冲
22、洗表面的污染菌,再采集标本,以免影响检验结果。用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。注意尽量取化脓组织与正常组织交界处的脓汁,因为脓汁中心的细菌大部分已死亡,交接处的活菌较多,会提高阳性率。对于慢性感染,因污染严重,很难分离到致病菌,可取感染部位下的组织,研磨成组织匀浆接种于培养基。2.闭锁性脓肿:一般采用穿刺或手术引流的方法采取.采集前先用2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周围皮肤。现在学习的是第33页,共81页【标本采集注意事项标本采集注意事项】1.采集时间:应在用药之前采取。2.送检:应立即送检。如不能送检,应放4保存。培养淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌的标本除外。【标本的送检地点标本的送检
23、地点】检验科微生物室,非正常上班时间送检验科急诊化验室。*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。出,避免细菌污染。现在学习的是第34页,共81页脑脊液标本的微生物检验脑脊液标本的微生物检验一、检验项目脑脊液的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片、墨汁染色查新型隐球菌。二、标本采集现在学习的是第35页,共81页【标本采集前的注意事项标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。【标本送检指征标本送检指征】成人:发热、头痛、恶心、呕吐、颈强直和反射增强等症状,怀疑为脑膜炎
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