动物细胞融合与单克隆抗体 精选PPT.ppt
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1、关于动物细胞融合与单克隆抗体 第1页,讲稿共35张,创作于星期一 2002年年12月月30日,日,两场筹备了两场筹备了10年的年的“太空太空婚礼婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞植物细胞“新人新人”是是黄花烟草黄花烟草和和革新一号烟草革新一号烟草叶肉细胞的叶肉细胞的原生质原生质体体,动物细胞动物细胞“新人新人”是小鼠是小鼠B淋巴细胞淋巴细胞和和骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞,两批新人同时在,两批新人同时在“产房产房”电融合仪内孕电融合仪内孕育新生命。育新生命。“太空婚礼太空婚礼”这两场这两场“太空婚礼太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术实质是哪两项细胞工程技术植物体细胞杂交
2、技术植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术动物细胞融合技术第2页,讲稿共35张,创作于星期一去去 壁壁人工诱导融合人工诱导融合再再生生出出细细胞胞壁壁杂杂种种细细胞胞植物细胞融合植物细胞融合脱脱分分化化再再分分化化植物组织培养植物组织培养依据的依据的原理?原理?植物体细胞杂交过程示意图植物体细胞杂交过程示意图(细胞膜的流动性细胞膜的流动性)(植物细胞的全能性植物细胞的全能性)第3页,讲稿共35张,创作于星期一 材料材料:1970:1970年,有两位年,有两位科学家做了一个著名的科学家做了一个著名的实验:实验:人人鼠细胞融合鼠细胞融合的实验,以证明细胞膜的实验,以证明细胞膜上的上的蛋白质分子是运动的
3、蛋白质分子是运动的。人人鼠细胞是怎样实现融鼠细胞是怎样实现融合的?动物细胞融合有什么实合的?动物细胞融合有什么实践意义呢?践意义呢?第4页,讲稿共35张,创作于星期一一、动物细胞融合一、动物细胞融合1、概念:、概念:也称细胞杂交也称细胞杂交,两个或多个动物细胞结合两个或多个动物细胞结合形成形成一个一个细胞细胞的过程的过程 融合形成的融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质具有原来两个或多个细胞遗传物质的的单核细胞单核细胞,称为,称为杂交细胞杂交细胞。2、原理:、原理:细胞膜的流动性细胞膜的流动性2.2.2 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体第5页,讲稿共35张,创作于
4、星期一正在融合的正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞淋巴细胞与骨髓瘤细胞 正在融合的鸡正在融合的鸡血细胞血细胞第6页,讲稿共35张,创作于星期一3 3、动物细胞融合过程、动物细胞融合过程物理方法:物理方法:化学法:化学法:生物法:生物法:灭活灭活的病毒的病毒电激等电激等聚乙二醇(聚乙二醇(PEG)P52P52生物技术资料卡生物技术资料卡生物技术资料卡生物技术资料卡为什么为什么灭活灭活的病毒能作的病毒能作诱导剂诱导剂?课本课本P52P52第第3 3自然段和图自然段和图2-232-23诱导的手段?诱导的手段?融合后的杂融合后的杂融合后的杂融合后的杂交细胞经过交细胞经过交细胞经过交细胞经过有丝分裂后有丝分
5、裂后有丝分裂后有丝分裂后仍能形成两仍能形成两仍能形成两仍能形成两个完整的杂个完整的杂个完整的杂个完整的杂交细胞交细胞交细胞交细胞第7页,讲稿共35张,创作于星期一灭活灭活灭活灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合膜打开,细胞发生融合膜打开,细胞发生融合膜打开,细胞发生融合 灭活丧失感染性灭活丧失感染性保留融合活性保留融合活性第8页,讲稿共35张,创作于星期一三种三种AAAA、ABAB、BBBB含
6、含两种生物两种生物的遗传物质的遗传物质3 3、动物细胞融合过程、动物细胞融合过程物理方法:物理方法:化学法:化学法:生物法:生物法:灭活的病毒灭活的病毒电激等电激等聚乙二醇(聚乙二醇(PEG)诱导的手段?诱导的手段?融合后细胞的类型?融合后细胞的类型?AB杂种细胞遗传物质杂种细胞遗传物质有什么特点?有什么特点?融合结束的标志融合结束的标志?A AB B核融合核融合核融合核融合第9页,讲稿共35张,创作于星期一灭活的病毒灭活的病毒黏附于细胞表面黏附于细胞表面病毒颗粒穿通细胞膜病毒颗粒穿通细胞膜细胞膜连通细胞膜连通(融合融合)细胞融合细胞融合杂交细胞杂交细胞动物细胞融合过程总结动物细胞融合过程总结
7、第10页,讲稿共35张,创作于星期一填表比较动物细胞融合、植物体细胞杂交的区别填表比较动物细胞融合、植物体细胞杂交的区别创新方案创新方案创新方案创新方案P P2222任何一项技术的发现都不是凭空产生的,任何一项技术的发现都不是凭空产生的,任何一项技术的发现都不是凭空产生的,任何一项技术的发现都不是凭空产生的,必定有一个发展过程。必定有一个发展过程。必定有一个发展过程。必定有一个发展过程。动物细胞融合技术的发展简史动物细胞融合技术的发展简史动物细胞融合技术的发展简史动物细胞融合技术的发展简史第11页,讲稿共35张,创作于星期一4、意义:、意义:突破了突破了 方法的局限,使方法的局限,使 成为可能
8、成为可能动物细胞融合技术动物细胞融合技术最重要的用途最重要的用途是是制备制备单克隆抗体单克隆抗体一、动物细胞融合一、动物细胞融合成为研究成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种种培育等的重要手段培育等的重要手段利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术,为为 制造制造 开辟了新途径开辟了新途径有性杂交有性杂交远缘杂交远缘杂交单克隆抗体单克隆抗体第12页,讲稿共35张,创作于星期一1.抗体由何种细胞产生?如抗体由何种细胞产生?如何产生?何产生?2.抗体的化学本质是什么?抗体的化学本质是什么?与抗原作用的特点?与抗原作用的特点?主
9、要分布在哪里?主要分布在哪里?3.用传统的方法如何获得用传统的方法如何获得抗体?抗体?课本课本P P5252最后一自最后一自然段然段第13页,讲稿共35张,创作于星期一抗体的传统生产方法抗体的传统生产方法抗原抗原 反复注射动物反复注射动物从动物的从动物的血清血清中分离中分离抗体抗体产量低、产量低、纯度低纯度低,且抗体的且抗体的特异性差特异性差、灵敏度低。灵敏度低。单克隆抗体!单克隆抗体!该法制备抗体的缺点该法制备抗体的缺点?第14页,讲稿共35张,创作于星期一 动物在免疫反应的过程中,体内产生的特异性抗体种类动物在免疫反应的过程中,体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上,但是每一个可多达百万
10、种以上,但是每一个B B淋巴细胞只分泌一种特淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。因此,要想获得异性抗体。因此,要想获得大量大量的单一抗体,必须的单一抗体,必须克隆克隆单一的单一的B B淋巴细胞,形成细胞群。淋巴细胞,形成细胞群。1、单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念单克隆单克隆抗体抗体:单单个个B B细胞细胞克隆克隆产生的产生的化学性质单化学性质单一、特异性强一、特异性强的的抗体抗体已已免疫免疫的的B淋巴细胞(浆细胞或效应淋巴细胞(浆细胞或效应B细胞)细胞)课本课本P P5353第第1 1自然段自然段由由单细胞单细胞经分裂经分裂增殖增殖而形成而形成细胞群细胞群,即,即单克隆单克隆第15页,讲稿共35张
11、,创作于星期一 怎么才能得到纯的抗体怎么才能得到纯的抗体?光纯还不行光纯还不行,还要大量还要大量.怎么办怎么办?但,有但,有问题问题:找,什么细胞能无限繁殖呢找,什么细胞能无限繁殖呢?思路就出来了思路就出来了:要想获单一的纯抗体要想获单一的纯抗体,就必须就必须从一个从一个B B细胞出发细胞出发.让让B B细胞大量繁殖细胞大量繁殖(克隆克隆)就可以产生大量抗体了就可以产生大量抗体了.B B细胞是不能无限繁殖细胞是不能无限繁殖的的.怎么办怎么办?癌癌!只有只有癌细胞癌细胞.但它不能产生抗体但它不能产生抗体.融合融合呀呀!只要将两个细胞融合即可互补只要将两个细胞融合即可互补.融合细胞融合细胞 既既能
12、无限繁殖又能产生单一抗体。能无限繁殖又能产生单一抗体。2、单克隆抗体的制备思路单克隆抗体的制备思路第16页,讲稿共35张,创作于星期一一个一个B B淋巴细胞只分泌淋巴细胞只分泌一种特异性抗体一种特异性抗体 骨髓骨髓瘤细胞瘤细胞能能无限增殖无限增殖杂交瘤细胞杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞培养技术设计方案:设计方案:动物细胞融合技术动物细胞融合技术单克隆单克隆抗体抗体 既能产生特异性抗体,既能产生特异性抗体,又能大量增殖的细胞又能大量增殖的细胞.19751975年英国科学家年英国科学家米尔斯坦米尔斯坦和和柯勒柯勒的实验的实验第17页,讲稿共35张,创作于星期一过程过程制备过程制备过程一、动物细
13、胞融合一、动物细胞融合概念概念原理原理意义意义2.2.2 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体概念概念制备思路制备思路创创P24课堂强化课堂强化第18页,讲稿共35张,创作于星期一1、能使动物细胞融合的特有的诱导因子是、能使动物细胞融合的特有的诱导因子是()A.离心离心 B.灭活的病毒灭活的病毒 C.电刺激电刺激 D.振动振动2、融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点(、融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点()A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.B.能无限增殖能无限增殖 C.可形成新个体可形成新个体 D.培养过
14、程会贴壁培养过程会贴壁3、动物细胞融合的作用中最重要的是(、动物细胞融合的作用中最重要的是()A.克服远源杂交不亲和克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体制备单克隆抗体 C.培育新物种培育新物种 D.生产杂种细胞生产杂种细胞 BBA第19页,讲稿共35张,创作于星期一4 4、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是(抗体,与骨髓瘤细胞融合的是()A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 C.C.经过免疫的经过免疫的T T淋巴淋巴细胞细胞B.B.不
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