尿液理学蛋白本周蛋白尿糖检测试验课件.ppt

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1、关于尿液理学蛋白本周蛋白尿糖检测试验现在学习的是第1页，共36页尿尿液液形形成成过过程程示示意意图图现在学习的是第2页，共36页 容器容器1、一般检查：清洁干燥2 2、细菌培养：有盖无菌大试管3 3、24小时尿：清洁干燥的大口瓶 常规检查可随时留取，但晨尿较浓缩、偏酸性，病理成分多且完整，可提高检查的阳性率。尿液保存尿液保存1、冷藏2、立即送检，夏季1h，冬季 2500 ml/24h 少尿：400 ml/24h 无尿：1.020，随机尿，随机尿1.0031.030 新生儿：新生儿：1.0021.004 临床意义：反映临床意义：反映肾小管肾小管的的浓缩稀释浓缩稀释功能功能比重慢性肾衰竭、尿崩症急

2、性肾小球肾炎、心力衰竭、高热、脱水、出汗过多尿少尿多糖尿病现在学习的是第14页，共36页 【注意事项】注意事项】1尿比重计通过校正后才能使用。2尿液要求新鲜；尿液过少不足以浮起比重计时。3因低温所致的尿酸或其他盐类沉淀可水浴(37)使其溶解，待尿液温度降至比重计所标定的温度时即可测定。4尿液面应消除泡沫；比重计浮标要垂直悬浮于尿液中；读取比密值要准确。5校正结果 要进行蛋白尿、糖尿和温度的校正。6每次测定完毕都需用纯净水冲洗比重计，若有蛋白质及盐类物质沉积时，需用清洁液洗净后使用。现在学习的是第15页，共36页 【原理】【原理】pH广泛试纸是多种指示剂混合的试带,灵敏度约为pH1.0,显色范围

3、为棕红至深黑色,试带蘸取尿液后即可显色,然后与标准色板比较即可测得尿液pH近似值 四、尿酸碱度四、尿酸碱度pHpH试纸法测定试纸法测定现在学习的是第16页，共36页【操作】【操作】1.1.取试纸取试纸 2.2.浸尿浸尿 3.3.读取结果读取结果 4.4.报告方式报告方式现在学习的是第17页，共36页 参考值参考值 新鲜晨尿pH值在5.56.5,平均值6.0 新鲜随机尿pH值在4.58.0 久置可变碱性 临床意义临床意义PH值酸中毒、发热、糖尿病、痛风或服用氯化铵等药物后碱中毒、尿潴留、肾小管酸中毒、服用碱性药物后现在学习的是第18页，共36页 【注意事项】【注意事项】1.1.试带试带 应避光,

4、密封与干燥保存,远离酸性和碱性物质,以防失效2.2.标本标本 应新鲜,放置过久会因挥发性酸丧失或细菌繁殖而使pH增高,标本不能使用防腐剂,否则可能会影响检测结果3.3.比色时间比色时间 应在规定的时间内比色现在学习的是第19页，共36页第二节第二节 尿尿蛋白蛋白定性检查定性检查 【原理】【原理】生物碱试剂磺基水杨酸，在酸性条件下，其磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋白盐沉淀。磺基水杨酸法现在学习的是第20页，共36页【操作】1.调pH:使尿液PH值在56 2.加尿液:取2支试管,加入1ml尿液 3.加试剂:第一支试管加试剂2滴,轻混 匀,另 一支试管不加做对照 4.判断结果:1

5、min内观察结果 1现在学习的是第21页，共36页 优点优点:简便快速，灵敏度高0.05-0.1g/L；缺点缺点:与清/球/本周蛋白反应；假阳性。干化学法的参考方法，NCCLS推荐的 确证实验。【评价】【评价】尿液中蛋白质含量150mg/24h 尿中蛋白质浓度100mg/L 蛋白定性为阳性，即蛋白尿。1.1.蛋白尿蛋白尿 (proteinuria,PROproteinuria,PRO)现在学习的是第22页，共36页【干扰因素】【干扰因素】干 扰 因 素假阳性高浓度尿酸、尿酸盐、草酸盐碘造影剂、大剂量青霉素混入生殖系统分泌物假阴性pH 9 或 3现在学习的是第23页，共36页【注意事项】【注意事

6、项】1.标本标本:尿液明显混浊，先离心或过滤。患者应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含 碘造影剂时，应告知结果可能产生假阳性。正确采集中段尿，避免混有生殖系统分泌物。2.调调pH pH 本法在尿液偏碱或偏酸时（pH9，pH3）可呈 假阴性，检测前先测试尿pH(56).3掌握好结果判断时间,对于微弱阳性的判断，可选用黑色衬纸作背景，以提高分辨力。现在学习的是第24页，共36页第三节第三节 尿本周蛋白定性检查尿本周蛋白定性检查一、凝溶法一、凝溶法【原理】【原理】本周蛋白在pH4.90.1条件下，加热至 4060时可发生凝固，温度升至90100时沉淀消失，当温度降低恢复至4060时又可重新凝固。

7、现在学习的是第25页，共36页【操作】（详见实验课本【操作】（详见实验课本 P90 P90）1标本处理 2加入试剂 3观察结果 4验证结果 现在学习的是第26页，共36页 【注意事项】【注意事项】1收集已诊断轻链疾病患者的尿液做此试验。尿液新鲜，减少清蛋白、球蛋白分解变性产生的干扰。混浊尿液须先离心取上清液。2严格控制或调节pH，凝溶法最适pH为4.55.5。3煮沸过滤时，动作迅速，保持高温，不要振荡，防止BJP夹杂于其他沉淀蛋白中被过滤除掉而造成假阴性。过滤用漏斗、滤纸、试管等用品，需保持高温状态，以避免温度降低使BJP凝固。4凝溶法特异性高，操作繁琐、费时，灵敏度低（0.32.0）g/L。

8、5.操作时一定注意安全!现在学习的是第27页，共36页二、对二、对-甲苯磺酸法甲苯磺酸法【原理】【原理】对-甲苯磺酸能沉淀相对分子质量较小的本周蛋白，而对相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应。现在学习的是第28页，共36页【操作】【操作】1.1.加尿液加尿液:取2支试管，分别加尿液1ml 2.2.加试剂加试剂:测定管加0.5ml试剂,对照管加 0.5ml冰醋酸,轻混匀静置5min 3.3.观察结果观察结果:阳性阳性:测定管浑浊加重或有沉淀,对照管清晰透明或轻度浑浊 阴性阴性:测定管清晰透明或与对照管相似现在学习的是第29页，共36页 【注意事项】【注意事项】1收集已诊断轻链疾病患者的尿液做

9、此试验。尿液应新鲜，混浊尿液须先行离心取上清液。服用利福平类抗结核药物患者可能出现周蛋白假阳性。2尿液中其他球蛋白5.0g/L可出现假阳性，需进行验证。如果尿液中本周蛋白含量低，则需先对尿液进行浓缩。现在学习的是第30页，共36页第四节第四节 尿葡萄糖班氏法定性检查尿葡萄糖班氏法定性检查【原理】【原理】CuCu2+2+-CuCu+蓝色蓝色 黄色黄色至砖红色至砖红色.简易步骤简易步骤:班氏试剂1ml(煮沸不变色)+尿4滴煮沸1-2min 冷却后观察.碱性条件碱性条件+葡萄糖葡萄糖现在学习的是第31页，共36页操作：操作：ml班氏试剂，加热试管底部，煮沸，观察，再加尿液2滴，继续煮沸min，冷却后

10、观察结果。结果判断：结果判断：1.蓝色不变:-2.蓝中略带绿无沉淀:+/-3.绿色有少许黄绿色沉淀:+4.较多黄绿色沉淀:+5.土黄色浑浊,大量沉淀:+6.大量红棕/砖红色沉淀:+现在学习的是第32页，共36页【干扰因素干扰因素】标本因素标本因素假阳性：还原性糖假阳性：还原性糖假阴性：假阴性：大量铵盐，预先加碱煮沸大量铵盐，预先加碱煮沸 去氨后再检验；去氨后再检验；蛋白蛋白0.5g/L,0.5g/L,加热乙酸法加热乙酸法去蛋白取滤液检验去蛋白取滤液检验;药物因素药物因素假阳性：假阳性：VitCVitC,青青/链霉素链霉素,头孢菌素头孢菌素,异异烟肼烟肼,水杨酸盐水杨酸盐,氨苄西林氨苄西林【评价

11、评价】缺乏特异性,灵敏度低现在学习的是第33页，共36页 【注意事项】【注意事项】1、试剂与尿液的比例为101。2、煮混时应不时摇动试管以防爆沸喷出，试管口朝向无人处。3、检验糖尿病患者尿液中葡萄糖，空腹或餐后2h留取尿标本。4、大量铵盐，易致假阴性，应预先加碱煮沸去氨后再检验。5、蛋白0.5g/L,易致假阴性，加热乙酸法去蛋白取滤液检验。6、VitC,青/链霉素,头孢菌素,异烟肼,水杨酸盐,氨苄西林等 药物易致假阳性，应停药一段时间再行检测。现在学习的是第34页，共36页 【实验报告格式】【实验报告格式】一、实验原理一、实验原理二、器材与试剂二、器材与试剂三、操作步骤三、操作步骤四、实验结果与分析四、实验结果与分析（实验报告的重点内容，具体分析自己所做的实验结果，结果与书本原理不相符时，到底什么原因自己要去思考分析）五、注意事项五、注意事项现在学习的是第35页，共36页10/1/2022感谢大家观看现在学习的是第36页，共36页