动物细胞工程上课精选PPT.ppt
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1、关于动物细胞工程上课第1页,讲稿共53张,创作于星期日第2页,讲稿共53张,创作于星期日动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体技术单克隆抗体技术核移植核移植动物动物细胞细胞工程工程常用常用技术技术动物生物工程常用的技术第3页,讲稿共53张,创作于星期日就是从动物机体中取就是从动物机体中取出出相关组织相关组织,将它分,将它分散成散成单细胞单细胞,然后,然后,放放在在适宜的培养基适宜的培养基中,中,让这些细胞让这些细胞生长和繁生长和繁殖殖。1、动物细胞培养概念:、动物细胞培养概念:原原第4页,讲稿共53张,创作于星期日2、动物细胞培养过程:、动物细胞培养过程:动物胚胎或幼龄动物
2、动物胚胎或幼龄动物的组织、器官的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养无限传代无限传代单个细胞单个细胞加培养液加培养液遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质已改变已改变第5页,讲稿共53张,创作于星期日思考:思考:2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?养材料?1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处?3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?、为什么培
3、养前要将组织细胞分散成单个细胞?4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有:有:1、液体培养基、液体培养基 2、成分中有动物血清等、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动不能,
4、动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体物个体第6页,讲稿共53张,创作于星期日3、动物细胞培养的原理:、动物细胞培养的原理:细胞增殖细胞增殖第7页,讲稿共53张,创作于星期日1)原代培养:从机体取出后立即培养的细胞)原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第为原代细胞。培养的第1代细胞与传代细胞与传10代以代以内的细胞称都为原代细胞培养。(内的细胞称都为原代细胞培养。(从机体取从机体取出出10代以内的细胞代以内的细胞)2)传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,)传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上配制成细胞悬浮液,分装到两个或两
5、个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。(的培养瓶中继续培养,称为传代培养。(原原代细胞代细胞没有终点没有终点)4、动物细胞培养过程中几个重要的概念、动物细胞培养过程中几个重要的概念第8页,讲稿共53张,创作于星期日第9页,讲稿共53张,创作于星期日3)细胞贴壁细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上(单层)这种现象叫细胞贴壁。要求:培养(单层)这种现象叫细胞贴壁。要求:培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。4)接触抑制接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停
6、止分裂增殖,这种现象称为细胞细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接的接触抑制触抑制。5)动物细胞培养特点:)动物细胞培养特点:贴壁生长、接触抑制贴壁生长、接触抑制第10页,讲稿共53张,创作于星期日、动物细胞培养技术的应用、动物细胞培养技术的应用(1)生产蛋白生物制品:)生产蛋白生物制品:病毒疫苗、干扰素、病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。单克隆抗体等。(3)用于)用于检测有毒物检测有毒物质质(2)获得大量自身的)获得大量自身的皮肤细胞皮肤细胞,用于植皮。,用于植皮。(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗)用于生理、病理、药理等方面的研究,为治疗和预防疾病提供理论依据和预防疾病提供理
7、论依据(5)作为基因工程的受体细胞)作为基因工程的受体细胞第11页,讲稿共53张,创作于星期日1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液)(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养、营养 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清动物血清、微量元素等)微量元素等)3、温度和、温度和PH 温度温度36.5+0.5度,度,pH7.27.44、气体环境、气体环境 O2和和CO2(95%空气和空气和5%CO2)、动物细胞培养条件、动物细胞培养条件第12页,讲稿共53张,创作于星期日、植物组织培养和动物细胞培养的比较、植物组织培养和
8、动物细胞培养的比较比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养原理原理培养基性质培养基性质培养基特有成分培养基特有成分培养目的培养目的细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 动物血清动物血清快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株无病毒植株获得细胞或细获得细胞或细胞分泌蛋白胞分泌蛋白第13页,讲稿共53张,创作于星期日二、动物体细胞二、动物体细胞核移植核移植技术和克隆动物技术和克隆动物1、动物体细胞核移植技术:、动物体细胞核移植技术:动物核移植是将动物核移植是将动物的一个细胞的动物的一个细胞的细胞
9、核细胞核,移入一个已经去掉移入一个已经去掉细胞核的细胞核的卵母细胞中卵母细胞中.使其重组并发育成一个使其重组并发育成一个新的胚胎新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为这个新的胚胎最终发育为动物个体动物个体.2、克隆动物、克隆动物:用核移植的方法得到的动物。:用核移植的方法得到的动物。第14页,讲稿共53张,创作于星期日 3、克隆、克隆:是指通过无性繁殖而产生的具有完:是指通过无性繁殖而产生的具有完全相同的遗传物质组成的一全相同的遗传物质组成的一群细胞群细胞或者或者生物的个生物的个体体。克隆在希腊语中是。克隆在希腊语中是“小树枝叶小树枝叶”的意思,用的意思,用以指无性繁殖物,现在则指个体、细胞、基因等
10、以指无性繁殖物,现在则指个体、细胞、基因等不同水平上的无性繁殖物,克隆也可理解为复制。不同水平上的无性繁殖物,克隆也可理解为复制。第15页,讲稿共53张,创作于星期日第16页,讲稿共53张,创作于星期日第17页,讲稿共53张,创作于星期日第18页,讲稿共53张,创作于星期日、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞前,为什么必须、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?先去掉受体卵母细胞的核?思考:()思考:()、用于和核移植的供体细胞一般都选用代以内的细胞,、用于和核移植的供体细胞一般都选用代以内的细胞,想一想,只是为什么?想一想,只是为什么?、你认为用上述体细胞和
11、移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动、你认为用上述体细胞和移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了的复制吗?物进行了的复制吗?为了使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自具有重要为了使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自具有重要利用价值的动物提供的体细胞。利用价值的动物提供的体细胞。动物体细胞培养一般当传代至代左右时,部分动物体细胞培养一般当传代至代左右时,部分细胞的核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生细胞的核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生变化,而代以内的细胞一般能保持二倍体核型,所以,变化,而代以内的细胞一般能保持二倍体核型,所以,为了保持供体细胞正常的遗传基础
12、,一般选代以内的为了保持供体细胞正常的遗传基础,一般选代以内的细胞。细胞。第19页,讲稿共53张,创作于星期日、动物细胞克隆过程中、选用去核卵(卵母)、动物细胞克隆过程中、选用去核卵(卵母)细胞的原因细胞的原因是什么?是什么?)体积大、易操作。)卵细胞细胞质含有促)体积大、易操作。)卵细胞细胞质含有促使核表达全能性的的物质和营养条件。使核表达全能性的的物质和营养条件。第20页,讲稿共53张,创作于星期日、体细胞和移植技术的应用前景:、体细胞和移植技术的应用前景:)在畜牧业方面:加加速遗传改良进程,促进优良)在畜牧业方面:加加速遗传改良进程,促进优良畜群繁殖。畜群繁殖。)保护濒危动物:增加濒危动
13、物存活量。)保护濒危动物:增加濒危动物存活量。)在医学领域:)在医学领域:()作为生物反应器,生产药物。()作为生物反应器,生产药物。()作为异种器官供体。()作为异种器官供体。()核移植克隆动物可以作为研究胚胎发育过程、()核移植克隆动物可以作为研究胚胎发育过程、生物衰老过程生物。生物衰老过程生物。()作为追踪疾病发展过程、疾病治疗过程的疾病()作为追踪疾病发展过程、疾病治疗过程的疾病模型。模型。第21页,讲稿共53张,创作于星期日2.体细胞核移植技术的应用前景体细胞核移植技术的应用前景第22页,讲稿共53张,创作于星期日.体细胞核移植技术存在的问题体细胞核移植技术存在的问题1)通过和一只动
14、物产生的克隆动物成功率低。通过和一只动物产生的克隆动物成功率低。)绝大多数克隆动物存在健康为题)绝大多数克隆动物存在健康为题第23页,讲稿共53张,创作于星期日诱导融合人细胞人细胞鼠细胞鼠细胞荧光标记 蛋白质40分钟后370C资料人-鼠细胞融合实验(荧光标记法)实验结论:细胞膜上的蛋白质是可以运动的细胞膜上的蛋白质是可以运动的第24页,讲稿共53张,创作于星期日第25页,讲稿共53张,创作于星期日一、动物细胞融合一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合两个细胞正在融合 受精作用受精作用细胞融合的概念:是指两个或多个细胞结合成一细胞融合的概念:是指两个或多个细胞结合成一个细胞的
15、过程。个细胞的过程。第26页,讲稿共53张,创作于星期日动物动物细胞细胞融合融合第27页,讲稿共53张,创作于星期日细胞细胞A细胞细胞B杂种细胞杂种细胞灭活的病毒灭活的病毒物理法物理法化学法化学法仙台病毒仙台病毒疱疹病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒新城鸡瘟病毒第28页,讲稿共53张,创作于星期日用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核细胞核病毒颗粒病毒颗粒细胞核细胞核第29页,讲稿共53张,创作于星期日细胞融合与融合诱导细胞融合物质细胞融合与融合诱导细胞融合物质诱导剂:仙台病毒、聚乙二醇诱导剂:仙台病毒、聚乙二醇诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。诱导细胞融合的仙台病毒必须灭
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