实验三死活细胞的鉴别讲稿.ppt
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1、关于实验三死活细胞的鉴别第一页,讲稿共十二页哦一、实验目的一、实验目的1.学习并掌握死活细胞鉴别的原理及方法。2.能够辨别死、活细胞。第二页,讲稿共十二页哦二 实验原理死活细胞鉴别有许多不同的方法,其中最常用方法是台台盼蓝染色排除法盼蓝染色排除法。其原理是:许多酸性染料不容易穿过活细胞的质膜进入胞内,却能渗入死亡的细胞内,使其着色,以此来鉴别死活细胞。第三页,讲稿共十二页哦荧光排除法荧光排除法活细胞具有较强的酯酶活性,可将二丙酸酯荧光素中的荧光素分解出来,从而使细胞发出强烈的黄绿色荧光,死亡细胞由于酯酶失活,不能分解二丙酸酯荧光素,不能发出荧光。第四页,讲稿共十二页哦染色排除法:染成蓝色的为死
2、细胞第五页,讲稿共十二页哦三、试剂与器材三、试剂与器材1.材料:血细胞2.试剂:0.4台盼蓝溶液(生理盐水配制)、PBS。3.器材:显微镜、血细胞计数板、载玻片、滴管等。第六页,讲稿共十二页哦四、实验内容四、实验内容1.血细胞悬液的制备取一定量的新鲜血液加入20等份的PBS。2.染色制片取0.5ml细胞悬液放入干净试管中,加入12滴台盼蓝染液,混合,2min后制成临时装片,镜检。第七页,讲稿共十二页哦3.结果死细胞染成蓝色,活细胞不着色。细胞计数:单位视野内死细胞个数、活细胞个数。第八页,讲稿共十二页哦第九页,讲稿共十二页哦细胞活力公式根据下式求细胞活力:活细胞率()(细胞总数-死细胞数)/细胞总数100第十页,讲稿共十二页哦五、注意事项五、注意事项1.计数时应多选择几个视野,以多个视野内的平均值作为细胞的存活率。2.以台盼蓝排除法在倒置显微镜下计数死活细胞数目需注意染色时间。第十一页,讲稿共十二页哦03.10.202203.10.2022感谢大家观看第十二页,讲稿共十二页哦
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