光谱分析药学PPT讲稿.ppt
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1、光谱分析药学第1页,共46页,编辑于2022年,星期五 第十章 光谱分析法概论 第十一章 紫外-可见分光光度法 第十二章 荧光分析法 第十三章 红外分光光度法 第十四章 原子吸收分光光度法 第十五章 核磁共振波谱法 第十六章 质谱法(可将其归于此类)第2页,共46页,编辑于2022年,星期五光谱分析法概论光谱分析法概论 基本概念一、光学分析法分类二、物质运动与电磁辐射二、物质运动与电磁辐射 光谱分析仪器一、仪器的主要部件一、仪器的主要部件二、各部件的作用二、各部件的作用三、常用的主要部件三、常用的主要部件 光谱分析的基本原理光谱分析的基本原理一、定律的假设条件一、定律的假设条件二、定律的形成二
2、、定律的形成三、定律的使用讨论三、定律的使用讨论 光谱分析主要内容光谱分析主要内容第3页,共46页,编辑于2022年,星期五基本概念一、光学分析法分类等。光学分析法光学分析法非光谱分析法非光谱分析法利用光学性质分析利用光学性质分析光谱分析法光谱分析法利用光谱分析利用光谱分析据检测物质类型据检测物质类型据物质能级跃迁方向据物质能级跃迁方向据检测辐射波长顺序据检测辐射波长顺序分子光谱法分子光谱法原子光谱法原子光谱法核磁共振波谱法核磁共振波谱法吸收光谱法吸收光谱法发射光谱法发射光谱法紫外、可见光谱法紫外、可见光谱法红外光谱法红外光谱法电子自旋共振波谱法电子自旋共振波谱法第4页,共46页,编辑于202
3、2年,星期五常用光谱分析法概况:方法 物质类型 辐射方向 波长范围紫外分光光 分子 吸收 紫外光 度法 价电子跃迁 200400nm可见光分光 分子 吸收 可见光 光度法 价电子跃迁 400800nm红外光谱法 分子 吸收 红外光 振动-转动跃迁 0.751000m荧光分析法 分子 发射 200600nm 价电子跃迁原子吸收分 原子 吸收 200800nm分光光度法 核外电子跃迁 核磁共振 原子核 吸收 60cm300m 波谱 自旋跃迁 第5页,共46页,编辑于2022年,星期五二、物质运动与电磁辐射二、物质运动与电磁辐射 1.1.电磁辐射的主要性质电磁辐射的主要性质:电磁辐射是一种能量形式;
4、电磁辐射是一种能量形式;波粒二象性;波粒二象性;E=hE=h=hc/=hc/粒子性粒子性-具有能量具有能量 波动性波动性 电磁辐射区段;电磁辐射区段;射线射线 X X射线射线 紫外紫外 可见可见 红外红外 微波微波 无线电波无线电波 0.10.110nm 40010nm 400760nm 0.001760nm 0.0011m1m0.0003nm 2000.0003nm 200400nm 0.75400nm 0.7510001000 m 1m 11000m1000m 其它主要光学性质(注意复习)。其它主要光学性质(注意复习)。第6页,共46页,编辑于2022年,星期五光的波动性光的波动性 电磁辐
5、射为正弦波(波长、频率、速度、振幅)。,电磁辐射为正弦波(波长、频率、速度、振幅)。,电磁波不需传播介质,可在真空中传输。电磁波不需传播介质,可在真空中传输。磁场磁场传播方向传播方向电场电场单光色平面偏振光的传播单光色平面偏振光的传播y=A sin(t+)=A sin(2 vt+)第7页,共46页,编辑于2022年,星期五yt1/11/11/()频频率率相相同同的的正正弦弦波波叠叠加加得得相相同同频频率率的的合合成正弦波成正弦波频频率率不不同同的的正正弦弦波波叠叠加加得得不不同同频频率率的的非非正正弦弦波波;更多的正弦波叠加可形成方波更多的正弦波叠加可形成方波波的叠加(波的叠加(Superpo
6、sition)第8页,共46页,编辑于2022年,星期五 平行光束平行光束单缝衍射单缝衍射双缝衍射双缝衍射光波的衍射(光波的衍射(Diffraction)衍射:当一束平行光通过窄的开口如狭缝时发生弯曲的现象。衍射:当一束平行光通过窄的开口如狭缝时发生弯曲的现象。第9页,共46页,编辑于2022年,星期五电磁波谱电磁波谱电磁辐射波谱图电磁辐射波谱图第10页,共46页,编辑于2022年,星期五 2.2.物质运动物质运动:运动的形式:运动的形式:分子分子(刚体刚体)运动形式运动形式-平动平动 转动转动 振动振动 电子跃迁电子跃迁 能量依次增加能量依次增加原子(球体)运动形式原子(球体)运动形式-电子
7、跃迁电子跃迁 运动的基本规律:运动的基本规律:a.a.物质总是使其处于最安定的基态,即当其接受外物质总是使其处于最安定的基态,即当其接受外界能量跃迁至激发态时会很快释放能量返回基态;界能量跃迁至激发态时会很快释放能量返回基态;b.b.服从量子化规律,即运动能级差为阶梯式变化;服从量子化规律,即运动能级差为阶梯式变化;c.c.高能量运动形式发生时伴随低能量运动。高能量运动形式发生时伴随低能量运动。第11页,共46页,编辑于2022年,星期五第12页,共46页,编辑于2022年,星期五 3.3.物质运动与辐射的关系物质运动与辐射的关系:辐射是一种能量形式,物质接受合适的辐射是一种能量形式,物质接受
8、合适的 辐射(如某种波长的光照)时发生运动辐射(如某种波长的光照)时发生运动 能级跃迁(由基态跃迁至相应激发态)能级跃迁(由基态跃迁至相应激发态)当其返回基态时释放的能量也可是辐射当其返回基态时释放的能量也可是辐射 形式;形式;根据根据 E=nhc/E=nhc/n n为自然数为自然数1.2.3.1.2.3.可见可见 物质运动能级所需或所放出的能物质运动能级所需或所放出的能 量对应某种辐射。量对应某种辐射。第13页,共46页,编辑于2022年,星期五线光谱线光谱带光谱带光谱第14页,共46页,编辑于2022年,星期五光谱分析仪器一、仪器的主要部件一、仪器的主要部件 辐射(光)源、分光系统(单色器
9、)、辐射(光)源、分光系统(单色器)、样品池、检测器(传感器)、记录显示系统样品池、检测器(传感器)、记录显示系统二、各部件的作用二、各部件的作用 辐射源辐射源-提供能量(强度)合适的辐射提供能量(强度)合适的辐射 单色器单色器-产生强度合适产生强度合适 的辐射的辐射 样品池样品池-盛放样品或产生测量形式盛放样品或产生测量形式 检测器检测器-将辐射的强度变化转化成电信号将辐射的强度变化转化成电信号 记录显示记录显示-将测量结果表示出来将测量结果表示出来 第15页,共46页,编辑于2022年,星期五三、常用的主要部件三、常用的主要部件辐射源辐射源:光源光源根据分析要求产生合适强根据分析要求产生合
10、适强 度、一定类型及一定波长度、一定类型及一定波长 范围的光。范围的光。热辐射源热辐射源通过通电加热产生强通过通电加热产生强 度、波长符合分析要度、波长符合分析要 求的辐射。求的辐射。其它辐射源其它辐射源通过其它途径(如通过其它途径(如 电磁感应等)产生电磁感应等)产生 强度、波长符合分强度、波长符合分 析要求的辐射。析要求的辐射。第16页,共46页,编辑于2022年,星期五分光系统分光系统(单色器):(单色器):分光系统包括:分光元件、狭缝、准直分光系统包括:分光元件、狭缝、准直镜、反射镜等,其主要部件是分光元件。镜、反射镜等,其主要部件是分光元件。滤光片滤光片由玻璃中所含某种物质吸收部分由
11、玻璃中所含某种物质吸收部分 光而透过部分光,吸收光与透过光而透过部分光,吸收光与透过 光互补(互为补色)。光互补(互为补色)。常见类型:常见类型:带通型带通型透过一定范围(透过一定范围()光)光 越小,单色性能越好;越小,单色性能越好;截止型截止型透过一定范围(透过一定范围()光。)光。第17页,共46页,编辑于2022年,星期五max2 紫红紫红400-435nm白光白光绿绿500-560nm绿蓝绿蓝480-490nm蓝蓝435-480nm红红610-750nm橙橙595-610nm黄黄580-595nm蓝绿蓝绿490-500nm第18页,共46页,编辑于2022年,星期五 棱镜棱镜利用不同
12、波长光的不同折射率分利用不同波长光的不同折射率分 光,入射复合光而射出单色光。光,入射复合光而射出单色光。分辨率分辨率=/=bdn/d=bdn/d b b-棱镜有效底边长棱镜有效底边长 dn/ddn/d-材料色散率材料色散率 产生的光谱长波区密、短波区疏;产生的光谱长波区密、短波区疏;普通玻璃棱镜普通玻璃棱镜用于可见光区;用于可见光区;石英玻璃楞镜石英玻璃楞镜用于紫外光区;用于紫外光区;性能指标用性能指标用 表示,表示,值越小,值越小,单色性能越好;单色性能越好;棱镜的棱镜的 一般比滤光片小,单色性能比一般比滤光片小,单色性能比 滤光片好。滤光片好。第19页,共46页,编辑于2022年,星期五
13、棱镜棱镜(Prism):棱棱镜镜的的色色散散作作用用是是基基于于构构成成棱棱镜镜的的光光学学材材料料对对不不同同波波长长的的光光具具有有不不同同的的折折射射率率。波波长长大大的的折折射射率率小小,波波长长小的折射率大。小的折射率大。Cornu棱镜棱镜 b Littrow棱镜棱镜(左旋(左旋+右旋右旋-消除双像)消除双像)(镀膜反射)(镀膜反射)第20页,共46页,编辑于2022年,星期五400500600700玻璃棱镜玻璃棱镜石英棱镜石英棱镜200300350400500700第21页,共46页,编辑于2022年,星期五 光栅光栅复合光线以一定角度入射刻有复合光线以一定角度入射刻有 很多条平行
14、刻痕的光学镜面上很多条平行刻痕的光学镜面上 衍射及干涉产生单色光。衍射及干涉产生单色光。分辨率分辨率=/=mN=mN m m-光谱级数(一、二、三级)光谱级数(一、二、三级)N N-光栅总刻痕数(光栅总刻痕数(6006001200mm1200mm-1-1)性能指标用性能指标用 表示,表示,值越小,值越小,单色性能越好;单色性能越好;一般光栅式仪器的一般光栅式仪器的=1=15nm5nm 较好的仪器较好的仪器=0.1=0.10.5nm0.5nm。第22页,共46页,编辑于2022年,星期五平面透射光栅:平面透射光栅:dP0P1P0(0级)级)P1P1P2P2距离距离相相对对强强度度入射光为单色光,
15、那么入射光为单色光,那么 当入射线垂直于光栅时,当入射线垂直于光栅时,=0,n=d sin 当入射线不垂直于光栅时,当入射线不垂直于光栅时,n=d(sin +sin)在零级光谱有最大的光强!在零级光谱有最大的光强!第23页,共46页,编辑于2022年,星期五 A AB BC CD Dd d P P0 0距离距离相相对对强强度度P P1 1由于由于 CAB=,DAB=,因此,因此,CB=d sin,BD=dsin 显然,衍射光束显然,衍射光束2的运行距离比衍射光束的运行距离比衍射光束1长长(CB+BD)当当(CB+BD)是是入入射射波波长长的的整整数数倍倍,即即当当(CB+BD)=n 时时,两衍
16、射光束发生叠加,并产生明线。两衍射光束发生叠加,并产生明线。因此可得光栅方程:因此可得光栅方程:12平面反射光栅平面反射光栅第24页,共46页,编辑于2022年,星期五构成:狭缝、准直镜、棱镜或光栅、会聚透镜。构成:狭缝、准直镜、棱镜或光栅、会聚透镜。入射狭缝入射狭缝准直镜准直镜物镜物镜棱镜棱镜焦面焦面出射狭缝出射狭缝f入射狭缝入射狭缝准直镜准直镜光栅光栅物镜物镜出射狭缝出射狭缝f其中最主要的分光原件为棱镜和光栅。其中最主要的分光原件为棱镜和光栅。第25页,共46页,编辑于2022年,星期五GE2E1GGGE2E2E1E1E1,E2Ebert-FastieCzerny-TurnerLittro
17、w光谱仪几种典型的光学系统光谱仪几种典型的光学系统第26页,共46页,编辑于2022年,星期五检测器检测器(传感器):(传感器):工作原理工作原理-利用利用“光电效应光电效应”将光强度的将光强度的变变 化转化成电信号。化转化成电信号。光电池、光敏电阻光电池、光敏电阻当一定强度的光照当一定强度的光照 射其上时,其电池射其上时,其电池 电动势、电阻随之电动势、电阻随之 变化。、变化。、产生的信号对能量较大的短波较敏感;产生的信号对能量较大的短波较敏感;信号随强度的变化量较小,灵敏度不高;信号随强度的变化量较小,灵敏度不高;常用于专用仪器作检测器。常用于专用仪器作检测器。第27页,共46页,编辑于2
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