课程名称微生物学实验eaqe.docx

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1、渤海大学生物与食品科学学院教案课程名称称微生生物学实验任课教师师白凤翎专 业食品科学学与工程程食品质量量与安全全20055 20006 学年课程类型型学位课班 级20044级 11、2班班第 二 学期第466周教学课题题实验一 微生生物形态态学实验验教学目的的：1、证明明微生物物是无所所不在的的，体会会无菌操操作的重重要性； 2、学学习并掌掌握油镜镜的原理理和使用用方法； 3、学学习微生生物制片片和染色色技术，掌掌握单染染色和革革兰氏染染色方法法；4、了解解革兰氏氏染色法法的原理理及其在在细菌分分类鉴定定中的重重要性。教学重点点、难点点：1、油镜镜的原理理及使用用2、细菌菌的制片片技术3、革兰

2、兰氏染色色技术4、环境境、体表表微生物物的分离离教学方法法：实验教学学考核知识识与技能能观测点点：1、微生生物常规规器皿和和普通光光学显微微镜简介介2、食品品、环境境、体表表微生物物的分离离 3、微微生物（细细菌）的的单染色色法 4、细细菌的复复合染色色：革兰兰氏染色色法 5、混混合菌涂涂片染色色 6、微微生物与与动植物物细胞的的显微比比较时间：220066年3月13日至20006年33月277日实验一 微生生物形态态学实验验一、微生生物常规规器皿和和普通光光学显微微镜简介介（2学学时）1、知识识点各类微微生物学学实用器器皿的规规格要求求及应用用微生物物学器皿皿的特点点（封闭闭、灭菌菌）普通光

3、光学显微微镜的原原理：AA结构与与组成、BB显微镜镜的原理理2、技能能要点试管、吸吸管、平平皿的洗洗涤包扎扎棉塞的的制作接种工工具的制制作与使使用普通光光学显微微镜的使使用：AA、 光光源调节节： 通通光路、提提聚光器器、光圈圈调节 BB、焦距距调节 CC、视野野调节二、食品品、环境境、体表表微生物物的分离离（2学学时） 1、知知识点从周围围环境、人人体体表表、口腔腔、食品品等中分分离各种种微生物物，证明明微生物物是无处处不在的的；体会无无菌操作作的重点点性 微生物物不同其其菌落特特征不同同2、技能能要点沉降法法：空气气中微生生物的分分离涂布法法：表面面微生物物分离划线法法：食品品中微生生物的

4、分分离菌落特特征描述述三、微生生物（细细菌）的的单染色色法（22学时）1、知识识点细菌染染色原理理染料的的化学组组成细菌细细胞的结结构与组组成油镜的的原理、分分辨率2、技能能要点涂片技技术 关键点点：A涂涂片 B固定定低倍镜镜观察 关关键点：调聚光光器、调调焦距 油镜观观察 关键点点：A调调焦 B结束束擦洗镜镜头 细菌形形态描述述 绘图图四、细菌菌的复合合染色：革兰氏氏染色法法（2学学时） 1、知知识点革兰氏氏染色的的操作步步骤革兰氏氏染色的的原理 革兰氏氏阳性细细菌与阴阴性细菌菌细胞结结构比较较2、技能能要点细菌制制作革兰氏氏染色操操作 关键键点：AA 时间间 B脱脱色 CC水洗讨论菌菌种与

5、革革兰氏染染色的关关系绘制图图线（四四张） 五、混合合菌涂片片染色（22学时） 1、知知识点革兰氏氏染色关关键点分分析： 脱色不不足G-G+ 脱色过过渡G+G- 通过过 G+和G-菌混合合涂片证证明染色色操作的的正确性性未知细细菌革兰兰氏染色色判别2、技能能要点混合菌菌挑取制制作涂片片染色绘图及及比较分分析六、微生生物与动动植物细细胞的显显微比较较（2学学时）1、知识识点细胞大大小细胞形形态与结结构 细胞染染色2、技能能要点普通光光学显微微镜使用用 低倍倍镜 观察动动植物组组织构造造切片 高高倍镜 观察察动植物物细胞构构造 油油镜 观观察微生生物细胞胞形态绘图比比较分析析思考题：1用油油镜观察

6、察时应注注意哪些些问题？在载玻玻片和镜镜头之间间加滴什什么油？起什么么作用？2影响响显微镜镜分别率率的因素素有哪些些？3你认认为制备备细菌染染色标本本时，尤尤其要注注意哪些些环节？4你认认为哪些些环节会会影响革革兰氏染染色结果果的正确确性？其其中最关关键的环环节是什什么？5你的的染色结结果是否否正确？如果不不正确，请请说明原原因。6. 混混合菌涂涂片染色色有什么么实际意意义？在在进行混混合菌涂涂片时应应注意哪哪些问题题？ 7. 试试比较分分析微生生物和动动植物在在细胞形形态结构构的区别别和联系系。课程名称称微生生物学实验任课教师师白凤翎专 业食品科学学与工程程食品质量量与安全全20055 20

7、006 学年课程类型型学位课班 级20044级 11、2班班第 二 学期第9110周教学课题题实验二 微生生物营养养学实验验教学目的的： 1、明明确培养养基的配配制原理理，掌握握配制培培养基的的一般方方法和步步骤；2、了解解高压蒸蒸汽灭菌菌的基本本原理和和应用范范围；3、学习习与掌握握高压蒸蒸汽灭菌菌的操作作方法和和注意事事项；4、掌握握平板划划线法、倾倾注法、涂涂布法分分离微生生物的基基本操作作技术；5、掌握握微生物物纯化技技术；6、了解解不同微微生物在在各种培培养基上上（中）的的培养特特征；7、进一一步熟练练和掌握握微生物物无菌操操作技术术。教学重点点、难点点：1、培养养基的制制造方法法与

8、步骤骤2、高压压蒸汽灭灭菌器的的使用及及注意事事项3、微生生物的接接种培养养技术4、微生生物的分分离纯化化方法与与原理教学方法法：实验教学学考核知识识点：1、培养养基的制制造2、培养养基的高高压灭菌菌3、食品品中微生生物的分分离与培培养4、微生生物的纯纯化5、微生生物菌落落特征描描述时间：220066年4月17日 至20006年年4月228日实验二 微生物物营养学学实验一、培养养基的制制造（22学时）1、知识识点微生物物生长的的六大营营养要素素的功能能各个营营养要素素之间的的配比培养基基的pHH值对微微生物生生长的影影响2、技能能要点营养物物的称量量与溶化化培养基基pH值值的调节节培养基基的过

9、滤滤与分装装培养基基的加塞塞与包扎扎 二、培养养基的高高压灭菌菌（2学学时） 1、知知识点高压灭灭菌的原原理高压灭灭菌器的的结构和和组成 高压灭灭菌的操操作程序序2、技能能要点观察水水位和加加水装入被被灭菌物物与加盖盖加热与与加压放气在规定定灭菌时时间内维维持压力力、温度度减压与与开盖三、食品品、土壤壤等微生生物的分分离与培培养（22学时）1、知识识点纯培养养的分离离原理纯培养养分离方方法的选选择（涂涂布分离离法、倾倾注平板板法）纯培养养的纯化化各类微微生物的的群落形形态特征征2、技能能要点食品检检样的前前处理AA、固体体样品 B、液液体样品品样品的的稀释 A、110倍系系列稀释释 B、 样品

10、的的接种与与培养AA、涂布布法 BB、倾注注法菌落的的形态学学观察和和描述AA、平板板 BB、斜面面 C、高高层四、微生生物的纯纯化（22学时） 1、知知识点纯培养养的概念念分离纯纯培养的的目的和和意义 平板划划线分离离的原理理的操作作方法2、技能能要点单个菌菌落的确确定平板划划线： A、连连续划线线 B、垂垂直划线线无菌操操作五、菌落落特征描描述（22学时） 1、知知识点细菌的的群体特特征细菌的的繁殖方方式 细菌在在不同培培养基上上的表现现：A固固体培养养基、BB、液体体培养基基C、半半固体培培养基2、技能能要点比较各各类微生生物的形形态特征征描述形形态特征征绘图及及比较分分析思考题：1培养

11、养基配好好后，为为什么必必修立即即灭菌？如何检检查灭菌菌后的培培养基是是无菌的的？2在配配制培养养基的操操作过程程中应注注意什么么问题？为什么么？3高压压灭菌开开始之前前，为什什么要将将锅内的的冷空气气排尽？灭菌完完毕后，为为什么待待压力降降到“0”时才能能打开排排气阀，开开盖取物物？4在使使用高压压蒸汽灭灭菌时，怎怎样杜绝绝一切不不安全因因素？5如何何确定平平板上某某个单个个菌落是是否为纯纯培养？请写出出实验的的主要步步骤。6你所所做的涂涂布平板板法和划划线法是是否较好好地得到到了单个个菌落？如果不不是，请请分析原原因。7接种种环接种种前后灼灼烧的目目的是什什么？为为什么在在接种前前一定要要

12、将其冷冷却？如如何判断断灼烧过过的接种种环已冷冷却？8如何何描述各各种微生生物在斜斜面上、半半固体和和液体培培养基中中的培养养特征？课程名称称微生生物学实验任课教师师白凤翎专 业食品科学学与工程程食品质量量与安全全20055 20006 学年课程类型型学位课班 级20044级 11、2班班第 二 学期第1516周周教学课题题实验三 微生物物生理学学实验教学目的的：1、了解解糖发酵酵的试验验原理和和在肠道道细菌鉴鉴定中的的重要作作用；2、掌握握通过糖糖发酵鉴鉴别不同同微生物物的方法法；3、掌握握IMVViC试试验的原原理和操操作要点点；4、掌握握过氧化化氢酶及及脲酶试试验的原原理和方方法；5、了

13、解解IMVViC试试验在肠肠道菌鉴鉴定中的的意义和和方法。教学重点点、难点点：1、糖发发酵试验验的原理理、结果果判定标标准2、吲哚哚试验的的原理及及操作方法法3、V-P 试试验的结结果判定定4、脲酶酶试验的的原理和和结果判判定教学方法法：实验教学学考核知识识点：1、糖发发酵试验验2、IMMVICC试验3、过氧氧化氢酶酶及脲酶酶试验时间：220066年5月29日至20006年66月144日实验三 微生生物生理理学实验验一、糖发发酵试验验（3学学时）1、知识识点微生物物学发酵酵糖类的的原理糖发酵酵试验在在细菌鉴鉴定中的的作用和和意义区分氧氧化产酸酸和发酵酵产酸的的作用2、技能能要点接种无菌操操作技

14、术术发酵结结果判断断 二、IIMVIIC试验验（5学学时） 1、吲吲哚试验验知识点点吲哚试试验的原原理吲哚试试验培养养基构成成和试剂剂组成乙醚或或二甲苯苯的萃取取作用2、吲哚哚试验技技能要点点接种与与培养（培培养基蛋白胨胨水）乙醚或或二甲苯苯萃取吲哚试试剂（构构成及显显色原理理）结果判判断（阳阳性与阴阴性的判判断）2、甲基基红试验验知识点点甲基红红试验原原理甲基红红指示剂剂的变色色范围培养基基组成发酵产产酸2、甲基基红试验验技能要要点接种与与培养（培培养基葡萄糖糖蛋白胨胨水）甲基红红指示剂剂试验结结果判定定3、V-P试验验知识点点V-PP试验原原理V-PP试验与与甲基红红试验的的关系萘萘酚的作

15、作用2、V-P试验验技能要要点接种与与培养（培培养基葡萄糖糖蛋白胨胨水）滴加440%KKOH和和萘酚酚反应结结果的判判断及注注意事项项4、柠檬檬酸盐试试验知识识点柠檬酸酸盐试验验原理（西西蒙氏柠柠檬酸盐盐培养基基配方）不同微微生物碳碳源谱所用指指示剂的的变色范范围2、柠檬檬酸盐试试验技能能要点接种与与培养（西西蒙氏柠柠檬酸盐盐斜面）观察测测试细菌菌的生长长状况观察培培养基的的颜色变变化结果判判断思考题：1假如如某种微微生物可可以有氧氧代谢葡葡萄糖，发发酵试验验应该出出现什么么结果？2讨论论IMVVIC试试验在食食品检验验中的意意义？3为什什么大肠肠杆菌是是甲基红红反应阳阳性，而而产气杆杆菌为阴阴性？这这个试验验与VP试验验最初底底物和最最终产物物有何异异同处？为什么么会出现现不同？4糖发发酵试验验中所选选用的批批示剂有有哪几种种？其变变色范围围和颜色色如何？5在同同一种发发酵管中中同时加加葡萄糖糖和乳糖糖，采取取什么方方法判断断其发酵酵结果？6微生生物的生生化反应应的意义义有哪些些？7为什什么在含含糖培养养基消毒毒灭菌时时较低压压力及较较长时间间呢？8在进进行VP试验验时，为为什么阳阳性试验验结果容容易判断断？阴性性试验结结果不容容易下结结论？17