制作泡菜并检测亚硝酸盐含量精.ppt
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1、制作泡菜并检测亚硝酸盐含量第1页,本讲稿共54页你知道哪些蔬菜能制作泡菜吗?你知道哪些蔬菜能制作泡菜吗?第2页,本讲稿共54页 韩国泡菜相传是从我国传入的,堪称韩国韩国泡菜相传是从我国传入的,堪称韩国“第一第一菜菜”。第3页,本讲稿共54页 泡菜是一种以湿态发酵方式加工制成的浸制泡菜是一种以湿态发酵方式加工制成的浸制品,为泡酸菜类的一种。品,为泡酸菜类的一种。特点:制作容易,成本低廉,营养卫生,风味可特点:制作容易,成本低廉,营养卫生,风味可口,利于贮存。口,利于贮存。在我国四川、东北、湖南、湖北、河南、广在我国四川、东北、湖南、湖北、河南、广东、广西等地民间均有自制泡菜的习惯。目前较东、广西
2、等地民间均有自制泡菜的习惯。目前较受欢迎的是川味和韩味泡菜,在许多风味餐馆里,受欢迎的是川味和韩味泡菜,在许多风味餐馆里,都有其踪影,它鲜嫩清脆,可以增进食欲,帮助都有其踪影,它鲜嫩清脆,可以增进食欲,帮助消化与吸收。如果自己在家也做一些这样的泡菜,消化与吸收。如果自己在家也做一些这样的泡菜,做为每天饭前小菜,或以它配菜,烹成各种菜肴,做为每天饭前小菜,或以它配菜,烹成各种菜肴,不失为一件美事。但是不失为一件美事。但是泡菜含亚硝酸盐具致癌作泡菜含亚硝酸盐具致癌作用危害身体健康,所以不易多吃。用危害身体健康,所以不易多吃。第4页,本讲稿共54页三、实验设计:三、实验设计:(一)泡菜制作实验原理(
3、二)泡菜的制作1、泡菜盐水是按照清水与盐质量比为 4:1 ,配制并经 煮沸煮沸 形成的2、将蔬菜装入泡菜坛八成满时,再往泡坛内徐徐注入盐水,使盐水 没过全部菜料没过全部菜料 ,盖好坛盖。3、为保证坛内乳酸菌发酵所需无氧环境需在坛盖边缘的水槽中 注满水注满水 ,在发酵过程中要注意经常 向水向水槽中补充水槽中补充水 。在在在在无氧无氧无氧无氧条件下,将条件下,将条件下,将条件下,将葡萄糖分解成乳酸葡萄糖分解成乳酸葡萄糖分解成乳酸葡萄糖分解成乳酸。C6H12O62C3H6O3酶酶+能量能量第5页,本讲稿共54页(三)测定亚硝酸盐含量的原理:1、在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与 发生重氮化反应,与 结合形
4、成 色染料。2、将 与 进行目测比较,可以大 致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量讨论:为什么泡菜坛内会出现一层白膜?第6页,本讲稿共54页四、操作提示:四、操作提示:(一)泡菜坛的选择:1、选用泡菜坛的标准是 2、不合格的泡菜坛易引起 3、检查泡菜坛是否合格的方法是 第7页,本讲稿共54页(二)腌制的条件:1、容容易造成细菌大量繁易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加2、亚硝酸盐含量下降是在腌制 天后开天后开始的。始的。第8页,本讲稿共54页2 2)种类:)种类:)种类:)种类:在在在在无氧无氧无氧无氧条件下,将条件下,将条件下,将条件下,将葡萄糖分解成乳酸葡萄糖分解成乳酸葡萄糖分解成乳酸葡萄糖分解成
5、乳酸。乳酸杆菌常用于制作酸奶。乳酸杆菌常用于制作酸奶。乳酸杆菌常用于制作酸奶。乳酸杆菌常用于制作酸奶。异养厌氧型异养厌氧型异养厌氧型异养厌氧型乳酸链球菌乳酸链球菌乳酸链球菌乳酸链球菌和和和和乳酸杆菌乳酸杆菌乳酸杆菌乳酸杆菌广泛广泛,空气、土壤、植物体表、人或动物的肠道,空气、土壤、植物体表、人或动物的肠道C6H12O62C3H6O3酶酶+能量能量一、泡菜制作基础知识一、泡菜制作基础知识1、乳酸菌、乳酸菌1)结构:)结构:单细胞细菌单细胞细菌3)分布:)分布:4)生殖:)生殖:分裂生殖分裂生殖5)代谢:)代谢:6 6)原理:)原理:)原理:)原理:第9页,本讲稿共54页1 1 1 1)性质:)性
6、质:)性质:)性质:2 2 2 2)作用:)作用:)作用:)作用:为白色粉末,易溶于水。为白色粉末,易溶于水。为白色粉末,易溶于水。为白色粉末,易溶于水。食品添加剂食品添加剂广泛广泛2、亚硝酸盐、亚硝酸盐一般不危害健康一般不危害健康总量达总量达时会中毒,时会中毒,达达时会死亡时会死亡5)标准:)标准:残留在肉制品中不得超过残留在肉制品中不得超过 酱腌菜中不超过酱腌菜中不超过 奶粉中不得超过奶粉中不得超过0.30.30.5g0.5g3g3g30mg/kg20mg/kg2mg/kg蔬菜中平均蔬菜中平均 咸菜咸菜 豆粉达豆粉达4mg/kg7mg/kg以上以上10mg/kg3 3)分布)分布)分布)分
7、布,4 4)影响:)影响:)影响:)影响:第10页,本讲稿共54页在什么情况下,亚硝酸盐会转化为亚硝胺?在什么情况下,亚硝酸盐会转化为亚硝胺?亚硝胺有何危害?亚硝胺有何危害?适宜的适宜的pHpH、温度和一定的微生物作用下、温度和一定的微生物作用下动物实验表明,亚硝胺具有动物实验表明,亚硝胺具有致癌致癌作用,对动作用,对动物具有物具有致畸致畸和和致突变致突变作用。作用。人类人类的的某些癌症与亚硝胺有关。某些癌症与亚硝胺有关。第11页,本讲稿共54页l为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?变质的蔬菜?为什么含有抗生素的牛奶不
8、能发酵成酸奶?为什么含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶?因为酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。抗生因为酸奶的制作依靠的是乳酸菌的发酵作用。抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素能够杀死或抑制乳酸菌的生长,因此含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶。素的牛奶不能发酵成酸奶。l l答:有些蔬菜,如小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐。答:有些蔬菜,如小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐。答:有些蔬菜,如小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐。答:有些蔬菜,如小白菜和萝卜等,含有丰富的硝酸盐。l l当这些蔬菜放置过久发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟当这些蔬菜放置过久发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟当这些蔬菜放置过久发
9、生变质(发黄、腐烂)或者煮熟当这些蔬菜放置过久发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟l l后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝l l酸盐,危害人体健康。酸盐,危害人体健康。酸盐,危害人体健康。酸盐,危害人体健康。第12页,本讲稿共54页第13页,本讲稿共54页二、实验设计二、实验设计l泡菜制作过程要点:泡菜制作过程要点:l水盐比例水盐比例l香辛料香辛料l如何保证无氧环境?如何保证无氧环境?修整、洗涤修整、洗涤晾晒、切分晾晒、切分原料加工原料加工条状
10、或片状条状或片状加盐加盐盐水冷却盐水冷却泡菜盐水泡菜盐水加入调味料加入调味料并装坛并装坛发酵发酵成品成品测亚硝测亚硝酸含量酸含量第14页,本讲稿共54页l泡菜制作:泡菜制作:将新鲜蔬菜预先处理成条状或片状。将新鲜蔬菜预先处理成条状或片状。泡菜盐水按清水和盐为泡菜盐水按清水和盐为 质量比配制煮质量比配制煮沸沸冷却冷却备用。备用。预处理的新鲜蔬菜装至预处理的新鲜蔬菜装至 时放入时放入 蒜瓣、蒜瓣、生姜、香辛料生姜、香辛料 等佐料,并继续装至八成满。等佐料,并继续装至八成满。倒入配制好的盐水,使盐水倒入配制好的盐水,使盐水 浸没全部菜料浸没全部菜料 。盖上泡菜坛盖子,并用盖上泡菜坛盖子,并用 密封发
11、酵。以保证密封发酵。以保证坛内为坛内为 环境。发酵时间受到环境。发酵时间受到 温度温度 影响。影响。半坛半坛4 1无氧无氧水水第15页,本讲稿共54页测定亚硝酸盐含量的原理测定亚硝酸盐含量的原理在在条件下,亚硝酸盐与条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸对氨基苯磺酸发发生重氮化反应后,再与生重氮化反应后,再与N-1萘基乙二胺盐酸盐萘基乙二胺盐酸盐结结合生成合生成溶液。将经过反应显色后的待测样品溶液。将经过反应显色后的待测样品与与标准液标准液比色,即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。比色,即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。盐酸酸化盐酸酸化盐酸酸化盐酸酸化玫瑰红玫瑰红玫瑰红玫瑰红亚硝酸钠标准显色液亚硝酸钠标准显
12、色液浓度越高,颜色越深浓度越高,颜色越深浓度越高,颜色越深浓度越高,颜色越深第16页,本讲稿共54页三、操作提示三、操作提示(1 1)泡菜坛的选择)泡菜坛的选择火候好无裂纹、无砂眼坛沿深、盖子吻合好第18页,本讲稿共54页(2 2)腌制条件)腌制条件 时间时间、温度温度和和食盐食盐的的用量用量。温度过高、食盐用量不足温度过高、食盐用量不足1010、腌制时间过、腌制时间过短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。一般在腌制一般在腌制1010天后,亚硝酸盐的含量开始下降。天后,亚硝酸盐的含量开始下降。温度:温度:温度:温度:28-3228-32摄氏度摄
13、氏度摄氏度摄氏度 乳酸菌繁殖的最适温度乳酸菌繁殖的最适温度乳酸菌繁殖的最适温度乳酸菌繁殖的最适温度第19页,本讲稿共54页(3 3)、测定亚硝酸盐含量的操作)、测定亚硝酸盐含量的操作1 1 1 1)配置溶液)配置溶液)配置溶液)配置溶液 对氨基苯磺酸溶液:对氨基苯磺酸溶液:对氨基苯磺酸溶液:对氨基苯磺酸溶液:称取称取称取称取0.40.40.40.4克对氨基苯磺酸,溶解于克对氨基苯磺酸,溶解于克对氨基苯磺酸,溶解于克对氨基苯磺酸,溶解于100ml100ml100ml100ml体积分数为体积分数为体积分数为体积分数为20202020的盐酸中,避光的盐酸中,避光的盐酸中,避光的盐酸中,避光保存保存保
14、存保存(4mg/ml)(4mg/ml)(4mg/ml)(4mg/ml)。N-1N-1N-1N-1萘基乙二胺盐酸盐溶液:萘基乙二胺盐酸盐溶液:萘基乙二胺盐酸盐溶液:萘基乙二胺盐酸盐溶液:称取称取称取称取0.20.20.20.2克克克克N-1N-1N-1N-1萘基乙二胺盐酸盐,溶解于萘基乙二胺盐酸盐,溶解于萘基乙二胺盐酸盐,溶解于萘基乙二胺盐酸盐,溶解于100ml100ml100ml100ml的水中,避光保存的水中,避光保存的水中,避光保存的水中,避光保存(2mg/ml)(2mg/ml)(2mg/ml)(2mg/ml)。亚硝酸钠溶液:亚硝酸钠溶液:亚硝酸钠溶液:亚硝酸钠溶液:称取称取称取称取0.1
15、00.100.100.10克于硅胶干燥器中干燥克于硅胶干燥器中干燥克于硅胶干燥器中干燥克于硅胶干燥器中干燥24242424小时的亚硝酸钠,用水溶解至小时的亚硝酸钠,用水溶解至小时的亚硝酸钠,用水溶解至小时的亚硝酸钠,用水溶解至500ml500ml500ml500ml,再转移,再转移,再转移,再转移5 5 5 5 mlmlmlml溶液至溶液至溶液至溶液至200 ml200 ml200 ml200 ml容量瓶,定容至容量瓶,定容至容量瓶,定容至容量瓶,定容至200ml200ml200ml200ml(5ug/ml)(5ug/ml)(5ug/ml)(5ug/ml)第20页,本讲稿共54页2 2 2 2
16、)制备标准显色液制备标准显色液制备标准显色液制备标准显色液 用移液管吸取用移液管吸取用移液管吸取用移液管吸取0.20ml0.20ml0.20ml0.20ml、0.40ml0.40ml0.40ml0.40ml、0.60ml0.60ml0.60ml0.60ml、0.80ml0.80ml0.80ml0.80ml、1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml、1.50ml1.50ml1.50ml1.50ml亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液,分别置于,分别置于,分别置于,分别置于50ml50ml50ml50ml比色管中,再比色管中,再比色管中,再比色管中,再取取取取1 1 1 1支比
17、色管作为支比色管作为支比色管作为支比色管作为空白对照空白对照空白对照空白对照。并分别加入并分别加入并分别加入并分别加入2.0ml2.0ml2.0ml2.0ml对对对对氨基苯磺氨基苯磺氨基苯磺氨基苯磺酸溶液酸溶液酸溶液酸溶液,混匀,静置,混匀,静置,混匀,静置,混匀,静置3 3 3 35 5 5 5分钟分钟分钟分钟后,再分别加入后,再分别加入后,再分别加入后,再分别加入1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml N-1N-1N-1N-1萘基乙二胺盐酸盐萘基乙二胺盐酸盐萘基乙二胺盐酸盐萘基乙二胺盐酸盐溶液,加蒸馏水至溶液,加蒸馏水至溶液,加蒸馏水至溶液,加蒸馏水至50ml50ml50ml50m
18、l,混匀,观察亚硝,混匀,观察亚硝,混匀,观察亚硝,混匀,观察亚硝酸钠溶液颜色的梯度变化。酸钠溶液颜色的梯度变化。酸钠溶液颜色的梯度变化。酸钠溶液颜色的梯度变化。提提提提取取取取剂剂剂剂:分分分分别别别别称称称称取取取取50505050克克克克氯氯氯氯化化化化镉镉镉镉、氯氯氯氯化化化化钡钡钡钡,溶溶溶溶解解解解于于于于1000ml1000ml1000ml1000ml蒸蒸蒸蒸馏馏馏馏水水水水中中中中,用盐酸调节用盐酸调节用盐酸调节用盐酸调节pHpHpHpH至至至至1 1 1 1。氢氧化铝乳液和氢氧化铝乳液和氢氧化铝乳液和氢氧化铝乳液和2.5mol/l2.5mol/l2.5mol/l2.5mol/
19、l的氢氧化钠溶液。的氢氧化钠溶液。的氢氧化钠溶液。的氢氧化钠溶液。作用:增大亚硝酸钠的溶解度作用:作吸附剂,充分使滤液脱色中和过多盐酸,营造碱性环境第21页,本讲稿共54页亚硝酸钠亚硝酸钠溶液溶液对氨基苯磺酸溶液对氨基苯磺酸溶液N-1-萘基乙二胺盐酸盐萘基乙二胺盐酸盐35分钟分钟静置静置2)配制标准显色液的基本步骤是)配制标准显色液的基本步骤是第22页,本讲稿共54页3 3)制备样品处理液的步骤是:)制备样品处理液的步骤是:称取称取 0.4 kg0.4 kg泡菜,粉碎榨汁,过滤得约泡菜,粉碎榨汁,过滤得约200mL200mL汁液。汁液。取取100mL100mL汁液倒入汁液倒入500mL500m
20、L容量瓶,添加容量瓶,添加200mL200mL 蒸馏水蒸馏水 和和100mL 100mL 提取剂提取剂 ,摇床振荡,摇床振荡1h1h,再加,再加40mL 40mL 氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 ,最后用最后用 蒸馏水蒸馏水 定容到定容到500mL500mL并立刻并立刻 过滤过滤 获得滤液。获得滤液。将滤液将滤液60mL60mL移入移入100mL100mL容量瓶,用容量瓶,用 氢氧化铝乳液氢氧化铝乳液(吸附(吸附脱色)脱色)定容后过滤,获得定容后过滤,获得 无色透明无色透明 的滤液。的滤液。取泡菜取泡菜榨汁榨汁过滤过滤汁液汁液蒸馏水蒸馏水加加氢氧化钠定容氢氧化钠定容氢氧化铝乳液氢氧化铝乳液定容定容+
21、第23页,本讲稿共54页(4 4)比色的步骤是:)比色的步骤是:将将40mL40mL滤液移入滤液移入50mL50mL比色管中,并编号。比色管中,并编号。分别依次加入分别依次加入2.0mL2.0mL的对氨基苯磺酸溶液的对氨基苯磺酸溶液 和和1.0mL1.0mL的的 N-1-N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液萘基乙二胺盐酸盐溶液 ,并定容到,并定容到50mL50mL,混匀静置,混匀静置15min15min。观察颜色变化,并与观察颜色变化,并与 标准显色液标准显色液 比较,记录亚硝酸盐含比较,记录亚硝酸盐含量。量。计算样品滤液(计算样品滤液(40mL40mL)中亚硝酸盐含量。)中亚硝酸盐含量。计算公式是:
22、计算公式是:样品中亚硝酸盐含量(样品中亚硝酸盐含量(mgmg)取样量(取样量(40mL40mL滤液的质量,滤液的质量,KgKg)第24页,本讲稿共54页(4 4)比色)比色 吸取吸取40ml40ml透明澄清的滤液,转移到透明澄清的滤液,转移到50ml50ml比色管中,比色管中,将比色管做好标记。按步骤将比色管做好标记。按步骤2 2的方法分别加入的方法分别加入对氨基对氨基苯磺酸溶液和苯磺酸溶液和N-1N-1萘基乙二胺盐酸盐溶液,并萘基乙二胺盐酸盐溶液,并定容至定容至50ml50ml,混匀,静置,混匀,静置1515分钟后,观察样品颜分钟后,观察样品颜色的变化,并与标准显色液比较,找出与标准液色的变
23、化,并与标准显色液比较,找出与标准液最相近的颜色,记录对应的亚硝酸钠含量,并计最相近的颜色,记录对应的亚硝酸钠含量,并计算。每隔算。每隔2 2天测一次,将结果记录下来。天测一次,将结果记录下来。第25页,本讲稿共54页2001年年1月月4日日(封坛前)(封坛前)2001年年1月月8日(日(5天)天)2001年年1月月12日(日(9天)天)2001年年1月月15日(日(12天)天)2001年年1月月19日(日(16天天)0.150.600.200.100.101号坛号坛2号坛号坛0.150.200.100.050.053号坛号坛0.150.800.600.200.20泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的
24、变化泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的变化 第26页,本讲稿共54页4 4、实验结果分析和讨论选录、实验结果分析和讨论选录三只泡菜坛中的亚硝酸盐含量变化的绝对数量三只泡菜坛中的亚硝酸盐含量变化的绝对数量虽然不同,但整体的变化趋势却基本相同。虽然不同,但整体的变化趋势却基本相同。在腌制后的在腌制后的第五天第五天,三只泡菜坛中亚硝酸盐的含量,三只泡菜坛中亚硝酸盐的含量都达到最高峰都达到最高峰 前前前前6 6 6 6天内,亚硝酸盐含量就可以达到最高峰。天内,亚硝酸盐含量就可以达到最高峰。天内,亚硝酸盐含量就可以达到最高峰。天内,亚硝酸盐含量就可以达到最高峰。第第第第9 9 9 9天后,亚硝酸盐含量开始有明
25、显下降。天后,亚硝酸盐含量开始有明显下降。天后,亚硝酸盐含量开始有明显下降。天后,亚硝酸盐含量开始有明显下降。原原原原因因因因:由由由由于于于于泡泡泡泡菜菜菜菜在在在在开开开开始始始始腌腌腌腌制制制制时时时时,坛坛坛坛内内内内环环环环境境境境有有有有利利利利于于于于某某某某些些些些细细细细菌菌菌菌的的的的繁繁繁繁殖殖殖殖(包包包包括括括括一一一一些些些些硝硝硝硝酸酸酸酸盐盐盐盐还还还还原原原原菌菌菌菌),这这这这些些些些细细细细菌菌菌菌可可可可以以以以促促促促进进进进硝硝硝硝酸酸酸酸盐盐盐盐还还还还原原原原为为为为亚亚亚亚硝硝硝硝酸酸酸酸盐盐盐盐。但但但但随随随随着着着着腌腌腌腌制制制制时时时
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