沙门氏菌检验.ppt

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1、沙门氏菌检验现在学习的是第1页，共34页沙门氏菌属于沙门氏菌属于肠杆菌科肠杆菌科,至今已有至今已有22302230种以上的血清型种以上的血清型。现在学习的是第2页，共34页概概 况况u沙门氏菌引起人的沙门氏菌引起人的伤寒伤寒、副伤副伤寒寒、感染性腹泻感染性腹泻、食物中毒食物中毒和和医院内感染医院内感染，并引起动物的，并引起动物的沙门氏菌病，是重要的肠道致沙门氏菌病，是重要的肠道致病菌。病菌。u该菌属在医学、兽医和公共该菌属在医学、兽医和公共卫生上均十分重要：卫生上均十分重要：现在学习的是第3页，共34页沙门氏菌的分类沙门氏菌的分类根据新近的沙门氏菌的分类方案，本属菌现可分为两个种：根据新近的沙

2、门氏菌的分类方案，本属菌现可分为两个种：1.肠道沙门氏菌（肠道沙门氏菌（S.enterica）2.邦戈尔沙门氏菌（邦戈尔沙门氏菌（S.bongori）肠道沙门氏菌又分为肠道沙门氏菌又分为6 6个亚种：个亚种：1)肠道亚种肠道亚种（enterica）2)萨拉姆亚种萨拉姆亚种（salamae）3)亚利桑那亚种亚利桑那亚种（arizonae）4)双相亚利桑那沙门氏菌双相亚利桑那沙门氏菌（diarizonae）5)豪顿沙门氏菌豪顿沙门氏菌（houtenae）6)因迪卡沙门氏菌因迪卡沙门氏菌（indica）现在学习的是第4页，共34页抗原结构抗原结构菌体菌体(O)抗原抗原分群鞭毛鞭毛(H)抗原抗原分型毒

3、力毒力(Vi)抗原抗原微荚膜成分现在学习的是第5页，共34页1)O抗原抗原是细胞壁表面的是细胞壁表面的耐热多糖抗原耐热多糖抗原；2)根据根据O抗原（群因子）将沙门氏菌分为抗原（群因子）将沙门氏菌分为A、B、C1-C4、D1-D3、E1-E4、F、G1-G2、HZ和和O51-O63以及以及O65-O67计计51个个O群，包括群，包括58种种O抗原。抗原。1、O抗原抗原现在学习的是第6页，共34页1)H抗原抗原是本属菌的蛋白质性是本属菌的蛋白质性鞭毛抗原鞭毛抗原，计有计有63种；种；i.第一相（特异相）：小写英文字母，特异性高第一相（特异相）：小写英文字母，特异性高ii.第二相（非特异相）：阿拉伯

4、数字，少数用英文字母，特异性低第二相（非特异相）：阿拉伯数字，少数用英文字母，特异性低2)同一同一O群的沙门氏菌又根据它们的群的沙门氏菌又根据它们的H抗原抗原的不同再细分成许多不同的血清型。的不同再细分成许多不同的血清型。2、H抗原抗原现在学习的是第7页，共34页1)Vi抗原抗原是是微荚膜微荚膜成分；成分；2)相当于相当于K抗原，抗原，与毒力（与毒力（virulence）有关）有关，故称为，故称为Vi抗原抗原。3)新分离的菌株多有新分离的菌株多有Vi抗原，在普通培养基上多次传代后易丢失此抗原，这抗原，在普通培养基上多次传代后易丢失此抗原，这种变异称为种变异称为“V-W变异变异”。3、Vi抗原抗

5、原伤寒沙门氏菌伤寒沙门氏菌丙型副伤寒沙门氏菌丙型副伤寒沙门氏菌部分都柏林沙门氏菌部分都柏林沙门氏菌须鉴定Vi抗原抗原抗原抗原现在学习的是第8页，共34页4、血清型、血清型1)以以O:H:Vi形式表示：形式表示：用已知的沙门氏菌用已知的沙门氏菌O和和H单因子血清作玻板凝集试验便可确定一个沙门单因子血清作玻板凝集试验便可确定一个沙门氏菌分离物的血清型或抗原式，对可能有氏菌分离物的血清型或抗原式，对可能有Vi抗原的菌株还须用抗原的菌株还须用Vi 抗血清鉴抗血清鉴定之。定之。举例：举例：1,4,5,12:i:1,2 9,12,Vi:d:2)目前本菌属至少已有目前本菌属至少已有2500个个血清型。对人和

6、温血动物致病的血血清型。对人和温血动物致病的血清型绝大多数分属于清型绝大多数分属于A F群，在疾病中经常出现的不足群，在疾病中经常出现的不足50种。种。现在学习的是第9页，共34页常用检验用培养基常用检验用培养基lDHL琼脂琼脂成分成分蛋白胨蛋白胨 20 g牛肉膏牛肉膏 3 g乳糖乳糖 10 g蔗糖蔗糖 10 g去氧胆酸钠去氧胆酸钠 1 g硫代硫酸钠硫代硫酸钠 2.3 g柠檬酸钠柠檬酸钠 1 g柠檬酸铁铵柠檬酸铁铵 1 g中性红中性红 0.03 g琼脂琼脂 18 20 g蒸馏水蒸馏水 1000 mlpH 7.3l制法：制法：将除将除中性红中性红和和琼脂琼脂以外的成以外的成分溶解于分溶解于400

7、 ml 蒸馏水中，蒸馏水中，校正校正pH，再将琼脂于，再将琼脂于600 ml蒸馏水中煮沸溶解，两液合蒸馏水中煮沸溶解，两液合并，并加入并，并加入0.5%的中性红水的中性红水溶液溶液6 ml，待冷至，待冷至55，倾，倾注平板。注平板。sal.为无色半透明菌落，产为无色半透明菌落，产H2S者为黑色菌落。者为黑色菌落。现在学习的是第10页，共34页lSSSS琼脂琼脂(沙门氏沙门氏-志贺氏琼脂志贺氏琼脂)基础培养基基础培养基牛肉膏牛肉膏 5g蛋白胨蛋白胨 5g三号胆盐三号胆盐 3.5g琼脂琼脂 17g蒸馏水蒸馏水 1000ml121,15,15min高压灭菌高压灭菌l完全培养基完全培养基基础培养基基础

8、培养基 1000ml乳糖乳糖 10g柠檬酸钠柠檬酸钠 8.5g硫代硫酸钠硫代硫酸钠 8.5g10%柠檬酸铁溶液柠檬酸铁溶液 10ml1%1%中性红中性红溶液溶液 2.5ml0.1%0.1%煌绿煌绿溶液溶液 0.33ml加热溶化基础培养基加热溶化基础培养基,按比例加入上述除染料以外之按比例加入上述除染料以外之各成分各成分,充分混合均匀充分混合均匀,矫正至矫正至pH7.0,加入中性红和加入中性红和煌绿溶液煌绿溶液,倾注平板倾注平板.l注注1:制好的培养基宜当日使用，或保存于冰制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于箱内于48h内使用内使用l注注2:煌绿溶液配好后应在煌绿溶液配好后应在10天以内使用

9、天以内使用l注注3:可以购用可以购用SS琼脂的干燥培养基琼脂的干燥培养基 sal.为无色半透明菌落，产为无色半透明菌落，产H2S者者为中心带黑色，乳糖阳性者为粉红色，为中心带黑色，乳糖阳性者为粉红色，中心带黑色。中心带黑色。现在学习的是第11页，共34页亚硒酸盐胱氨酸亚硒酸盐胱氨酸增菌液增菌液（SCSC）u成分成分蛋白胨蛋白胨 5 g乳糖乳糖 4 g亚硒酸氢钠亚硒酸氢钠 4 g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 5.5 g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 4.5 gL-胱氨酸胱氨酸 0.01 g蒸馏水蒸馏水 1000 mlu1%L-胱氨酸胱氨酸 氢氧化钠溶液的配制：氢氧化钠溶液的配制：称取称取L-胱氨酸胱氨酸 0.1

10、g，加，加1 mol/L氢氧化氢氧化钠钠1.5 ml，使溶解，再加入蒸馏水，使溶解，再加入蒸馏水8.5 ml即成。即成。u制法制法将除将除亚硒酸氢钠亚硒酸氢钠 和和L-L-胱氨胱氨酸酸 以外的各成分溶解于以外的各成分溶解于900 ml蒸蒸馏水中，加热煮沸，待冷备用。馏水中，加热煮沸，待冷备用。另将亚硒酸氢钠另将亚硒酸氢钠 溶解于溶解于100 ml 蒸馏蒸馏水中，加热煮沸，待冷，以无菌操水中，加热煮沸，待冷，以无菌操作与上液混合。再加入作与上液混合。再加入1%L-胱氨胱氨酸酸-氢氧化钠氢氧化钠1 ml。分装于灭菌。分装于灭菌瓶中，每瓶瓶中，每瓶100 ml，pH应为应为7.1现在学习的是第12页

11、，共34页氯化镁孔雀绿增菌液氯化镁孔雀绿增菌液（MM）甲液甲液胰蛋白胨胰蛋白胨 5 g氯化钠氯化钠 8 g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 1.6 g蒸馏水蒸馏水 1000 ml乙液乙液氯化镁氯化镁 40 g蒸馏水蒸馏水 100 ml丙液丙液0.4%孔雀绿水溶液孔雀绿水溶液制法制法分别按上述成分配好后，分别按上述成分配好后，121，15min15min灭菌备用。灭菌备用。临用前取临用前取甲液甲液90 ml90 ml、乙液乙液9 ml9 ml、丙液丙液0.9 ml0.9 ml，以无菌操作混合即可。，以无菌操作混合即可。现在学习的是第13页，共34页四硫磺酸钠煌绿四硫磺酸钠煌绿增菌液增菌液（TTB）l基础培养

12、基基础培养基蛋白胨蛋白胨 5 g胆盐胆盐 1 g碳酸钙碳酸钙 10 g硫代硫酸钠硫代硫酸钠 30 g蒸馏水蒸馏水 1000 mll碘溶液碘溶液碘碘 6 g 碘化钾碘化钾 5 g蒸馏水蒸馏水 20 mll制法制法将将基础培养基基础培养基的各成分加的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶装每瓶100 ml。分装时应随时。分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀。振摇，使其中的碳酸钙混匀。121，15 15 min，灭菌。，灭菌。临用时每临用时每100ml100ml基础培养基中加入基础培养基中加入碘溶液碘溶液2 2 ml、0.1%0.1%煌绿溶液煌绿溶液1 1 ml。现在学习的是

13、第14页，共34页亚硫酸铋琼脂亚硫酸铋琼脂（BS）l成分成分蛋白胨蛋白胨 10 g牛肉膏牛肉膏 5 g葡萄糖葡萄糖 5 g硫酸亚铁硫酸亚铁 0.3 g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 4 g煌绿煌绿 0.025 g0.025 g柠檬酸铋铵柠檬酸铋铵 2 g亚硫酸钠亚硫酸钠 6 g琼脂琼脂 18 20 g蒸馏水蒸馏水 1000 mlpH 7.5l制法制法将将前五种成分前五种成分溶解于溶解于300 ml蒸馏水中蒸馏水中将将柠檬酸铋铵柠檬酸铋铵和和亚硫酸钠亚硫酸钠另用另用50 ml蒸蒸馏水溶解馏水溶解将琼脂于将琼脂于600 ml蒸馏水中煮沸溶解，冷至蒸馏水中煮沸溶解，冷至80。将以上三液合并，补充蒸馏水至将以上

14、三液合并，补充蒸馏水至1000 ml1000 ml，矫正，矫正pHpH，加，加0.5%0.5%煌绿水溶液煌绿水溶液5ml5ml，摇匀，摇匀，冷至冷至55 55 时，倾注平板时，倾注平板l注：此培养基注：此培养基不需高压灭菌不需高压灭菌。制备过程中。制备过程中不宜过分加热，以免降低其选择性。应在不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天临用前一天制备，贮存于室温暗处。制备，贮存于室温暗处。超过超过48 h48 h不宜使用不宜使用。产产H2S者为黑色有金属光泽，不产者为黑色有金属光泽，不产H2S者为灰绿色的菌落。者为灰绿色的菌落。现在学习的是第15页，共34页尿素琼脂尿素琼脂l成分成分蛋白胨蛋

15、白胨 1 g氯化钠氯化钠 5 g葡萄糖葡萄糖 5 g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 2 g0.4%酚红溶液酚红溶液 3 ml琼脂琼脂 20 g蒸馏水蒸馏水 1000 ml20%尿素溶液尿素溶液 100 mlpH 7.2l l制法制法制法制法将除尿素以外的成分配好，并高压灭将除尿素以外的成分配好，并高压灭菌后，冷至菌后，冷至55，加入经除菌过滤，加入经除菌过滤的尿素溶液。尿素的最终浓度为的尿素溶液。尿素的最终浓度为2%2%，最终，最终pH pH 为为7.27.2，分装于灭菌试管内，分装于灭菌试管内，放成斜面备用。放成斜面备用。l试验方法试验方法挑取琼脂培养物接种，在挑取琼脂培养物接种，在3737，培，培养

16、养24h24h，观察结果，观察结果，尿素酶阳性者由尿素酶阳性者由于于产碱产碱而使培养基变为而使培养基变为红色红色。现在学习的是第16页，共34页氨基酸脱羧酶试验培养基氨基酸脱羧酶试验培养基l成分成分蛋白胨蛋白胨 5 g酵母浸膏酵母浸膏 3 g葡萄糖葡萄糖 1 g蒸馏水蒸馏水 1000 ml1.6%溴甲酚紫溴甲酚紫-乙醇溶液乙醇溶液 1 mlL-氨基酸或氨基酸或DL-氨基酸氨基酸 0.5 g或或1 g/100 mlpH 6.8l制法制法将除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装将除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶每瓶100 ml，加入各种氨基酸、赖氨酸、，加入各种氨基酸、赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。精

17、氨酸和鸟氨酸。L-氨基酸按氨基酸按0.5%加加入，入，DL-氨基酸按氨基酸按1%加入。再行校正加入。再行校正pH至至6.8。l试验方法试验方法从琼脂斜面上挑取培养物接种，于从琼脂斜面上挑取培养物接种，于37，培，培养养18-24 h18-24 h。氨基酸脱羧酶。氨基酸脱羧酶阳性者阳性者由于产碱，由于产碱，培养基培养基应呈紫色应呈紫色。阴性者阴性者无碱性产物，无碱性产物，但因葡萄糖产酸而使培养基但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色变为黄色。对照管应为黄色。对照管应为黄色。现在学习的是第17页，共34页ONPG培养基培养基l成分成分邻硝基酚邻硝基酚-D-半乳糖苷半乳糖苷（ONPG）60 mg0.01

18、mol/L磷酸钠缓冲液（磷酸钠缓冲液（pH 7.5）10 ml1%蛋白胨水（蛋白胨水（pH 7.5）30 mll制法制法将将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于试胨水，以过滤法除菌，分装于试管内，每管管内，每管0.5 ml。用橡皮塞塞紧。用橡皮塞塞紧。l试验方法试验方法将细菌接种于将细菌接种于37 37 培养培养1-3 h1-3 h和和24 h24 h观察结果。如果观察结果。如果-半乳糖苷酶产生，半乳糖苷酶产生，则于则于1-3 h变黄色变黄色，如无此酶则，如无此酶则24 h不变色。不变色。现在学习的是第18页，共34页氢化钾（氢化钾（KCNKCN）培养

19、基）培养基u成分成分蛋白胨蛋白胨 10 g氯化钠氯化钠 5 g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 0.225 g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 5.64 g蒸馏水蒸馏水 1000 ml0.5%氢化钾溶液氢化钾溶液 20 mlpH 7.6u制法制法将除氰化钾以外的成分将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，配好后分装烧瓶，121，15min15min。每。每100ml100ml培养培养基加入基加入0.5%0.5%氰化钾溶液氰化钾溶液2.0ml2.0ml。u试验方法试验方法3737，培养，培养1-21-2天。天。如有如有细菌生长即为阳性细菌生长即为阳性（不（不抑制），经抑制），经2 2天培养不生天培养不生长为阴性（抑制）。长

20、为阴性（抑制）。现在学习的是第19页，共34页缓冲蛋白胨水缓冲蛋白胨水（BP）成分成分蛋白胨蛋白胨 10 g氯化钠氯化钠 5 g磷酸氢二钠磷酸氢二钠（Na2HPO412H2O）9 g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 1.5 g蒸馏水蒸馏水 1000 mlpH 7.2制法制法按上述成分配好后，按上述成分配好后，121，15min15min灭菌。临用时无菌分装每瓶灭菌。临用时无菌分装每瓶225ml225ml。注：本培养基供沙门氏菌注：本培养基供沙门氏菌前增菌前增菌用用现在学习的是第20页，共34页前增菌前增菌和增菌增菌l冻肉、蛋品、乳品及其他冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品加工食品均应经过均应经过前增菌前增菌。

21、以无菌操作。以无菌操作取取25 25 g（mlml），加在装有），加在装有225 225 ml缓冲蛋白胨水缓冲蛋白胨水的的500 500 ml 广口瓶广口瓶内。固体食品可先磨碎或乳化，于内。固体食品可先磨碎或乳化，于37 37 培养培养4 4 h（干蛋品（干蛋品1818 24 24 h）。）。l移取移取10 10 ml，转种于，转种于100 ml100 ml氯化镁孔雀绿增菌液氯化镁孔雀绿增菌液或或四硫磺酸钠煌绿四硫磺酸钠煌绿增增菌液内，于菌液内，于42 42 培养培养1818 24 h24 h。同时，另取。同时，另取10 ml10 ml，转种于，转种于100 ml100 ml亚硒酸盐胱氨酸增菌

22、液亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于内，于3737培养培养1818 24 h24 h。现在学习的是第21页，共34页为何要用两种不同的增菌液呢？为何要用两种不同的增菌液呢？亚硒酸盐胱氨酸增菌液亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）四硫磺酸酸盐四硫磺酸酸盐增菌液增菌液（TTB）+对猪霍乱和羊流产对猪霍乱和羊流产sal有毒性有毒性TTB 适于伤寒沙门氏菌增菌；适于伤寒沙门氏菌增菌；MM 适于其它各种沙门氏菌；适于其它各种沙门氏菌；现在学习的是第22页，共34页检样检样前增菌法：冻肉、蛋品、乳品及其它加工食品前增菌法：冻肉、蛋品、乳品及其它加工食品25g+BP 225ml直接增菌法：鲜肉、鲜乳或其它未经加工的食品直接

23、增菌法：鲜肉、鲜乳或其它未经加工的食品25g+灭菌生理灭菌生理盐水盐水25ml，做成检样匀液，做成检样匀液10ml+MM（或（或TTB）100ml10ml+SC100ml检样匀液检样匀液25ml+MM（或（或TTB）100ml检样匀液检样匀液25ml+SC100mlBSDHL（或（或SS、HE、WS）挑取可疑菌落挑取可疑菌落TSI，靛基质试验、尿素（，靛基质试验、尿素（pH 7.2）、）、KCN、赖氨酸、赖氨酸H2S+；靛基质；靛基质-；尿素；尿素-；KCN-；赖氨酸赖氨酸+；H2S+；靛基质；靛基质+；尿素；尿素-；KCN-；赖氨酸；赖氨酸+；H2S-；靛基质；靛基质+；尿素；尿素-；KCN

24、-；赖氨酸；赖氨酸+/-；非如左述的各种反应结果非如左述的各种反应结果沙门氏菌血清学试验沙门氏菌血清学试验沙门氏菌血清学试验沙门氏菌血清学试验非沙门氏菌非沙门氏菌非沙门氏菌非沙门氏菌甘露醇甘露醇+、山梨醇、山梨醇+ONPG+报告报告4218-24h374237现在学习的是第23页，共34页l鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其它它未经加工的食品未经加工的食品不必不必经过前增菌。经过前增菌。l各取各取25g（25ml）加入灭菌生理盐）加入灭菌生理盐水水225ml，按前法做成，按前法做成检样匀液检样匀液；取取25ml接种于接种于100ml氯化镁孔雀绿氯化镁孔雀绿增菌液增菌液或或四硫磺酸钠煌绿四

25、硫磺酸钠煌绿增菌液内，增菌液内，于于42培养培养24h24h；另取；另取25ml25ml接种于接种于100ml100ml亚硒酸盐胱氨酸亚硒酸盐胱氨酸增菌液内增菌液内，于于37，培养，培养1818 24h24h。现在学习的是第24页，共34页分离分离取增菌液取增菌液1环，划线接种于一个环，划线接种于一个亚硫酸铋琼脂亚硫酸铋琼脂（BS）和一个）和一个DHLDHL琼脂平板琼脂平板（或（或SSSS琼脂平板琼脂平板）。）。两种增菌液可同时划线接种于同一个平板上。两种增菌液可同时划线接种于同一个平板上。于于37分别培养分别培养1818 24 h24 h或或4040 48 h48 h（BSBS）观察各个平板

26、上生长的菌落特征。观察各个平板上生长的菌落特征。现在学习的是第25页，共34页选择性琼脂平板选择性琼脂平板沙门氏菌沙门氏菌、沙门氏菌沙门氏菌（即亚利桑那菌（即亚利桑那菌）亚硫酸铋琼脂亚硫酸铋琼脂产硫化氢菌落产硫化氢菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色；为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色；有些菌株不产生硫化氢有些菌株不产生硫化氢，形成灰绿色的菌落，形成灰绿色的菌落黑色有金属光泽黑色有金属光泽DHLDHL琼脂平板琼脂平板无色半透明，无色半透明，产硫化氢菌落产硫化氢菌落中心带黑色或几乎全黑色中心带黑色或几乎全黑色乳糖乳糖迟缓阳性迟缓阳性或或阴性阴性的菌株与的菌株与前相同；前相同；乳糖阳性乳糖阳性的菌株为粉

27、红色，中心的菌株为粉红色，中心带黑色带黑色SSSS琼脂琼脂无色半透明，无色半透明，产硫化氢菌株产硫化氢菌株中心带黑色，但不如以中心带黑色，但不如以上培养基明显上培养基明显乳糖迟缓阳性乳糖迟缓阳性或或阴性阴性的菌株与的菌株与前相同；前相同；乳糖阳性的菌株乳糖阳性的菌株为粉红色，中为粉红色，中心带黑色，但中心无黑色形成时心带黑色，但中心无黑色形成时与大肠杆菌不能区别。与大肠杆菌不能区别。沙门氏菌属沙门氏菌属各群各群在选择性琼脂平板在选择性琼脂平板上的菌落特征上的菌落特征现在学习的是第26页，共34页生化试验生化试验l自选择性琼脂平板上直接挑取数个可疑菌落，自选择性琼脂平板上直接挑取数个可疑菌落，分

28、别接种分别接种三糖铁三糖铁琼脂。琼脂。l在三糖铁琼脂上，只有在三糖铁琼脂上，只有斜面产酸斜面产酸并同时并同时硫化氢硫化氢（H H2 2S S）阴性）阴性的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏的菌株可以排除，其他的反应结果均有沙门氏菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能菌的可能，同时也均有不是沙门氏菌的可能现在学习的是第27页，共34页斜面斜面底层底层产气产气硫化氢硫化氢可能的菌属和种可能的菌属和种-+/-+沙门氏菌属沙门氏菌属、费劳地氏柠檬酸杆菌、变形杆菌、费劳地氏柠檬酸杆菌、变形杆菌属、缓慢爱德华氏菌属、缓慢爱德华氏菌+/-+沙门氏菌沙门氏菌、费劳地氏柠檬酸杆菌、普通变形费劳地氏柠檬酸杆菌

29、、普通变形杆菌杆菌-+-沙门氏菌属沙门氏菌属、大肠杆菌、蜂窝哈夫尼亚菌、摩、大肠杆菌、蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌、普罗菲登斯菌属根氏菌、普罗菲登斯菌属-+-伤寒沙门氏菌伤寒沙门氏菌、鸡沙门氏菌鸡沙门氏菌、志贺氏菌属、大、志贺氏菌属、大肠杆菌、蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌、普罗菲肠杆菌、蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌、普罗菲登斯菌属登斯菌属+/-大肠杆菌大肠杆菌、肠杆菌属肠杆菌属、克雷伯氏菌属克雷伯氏菌属、沙雷氏沙雷氏菌属菌属、费劳地氏柠檬酸杆菌费劳地氏柠檬酸杆菌注：注：+阳性；阳性；-阴性；阴性；+/-多数阳性，少数阴性。多数阳性，少数阴性。肠杆菌科各属在肠杆菌科各属在三糖铁琼脂三糖铁琼脂内的反应结果内的

30、反应结果现在学习的是第28页，共34页l在接种三糖铁的同时，再接种在接种三糖铁的同时，再接种蛋白胨水蛋白胨水（供（供做做靛基质试验靛基质试验）、）、尿素琼脂尿素琼脂（pH7.2）、）、氰氰化钾培养基化钾培养基（KCN）和）和赖氨酸脱羧酶赖氨酸脱羧酶试验培试验培养基及对照培养基各一管，于养基及对照培养基各一管，于37培养培养18-18-24h24h，必要时可延长至，必要时可延长至48h48h。现在学习的是第29页，共34页肠杆菌科各属生化反应初步鉴别表肠杆菌科各属生化反应初步鉴别表反应序号反应序号硫化氢硫化氢靛基质靛基质pH7.2尿素尿素氰化钾氰化钾（KCN）赖氨酸赖氨酸脱羧酶脱羧酶判定菌属判定

31、菌属A1沙门氏菌属沙门氏菌属A2沙门氏菌属（少见）、沙门氏菌属（少见）、缓慢爱德华氏菌缓慢爱德华氏菌B1 沙门氏菌属、大肠埃沙门氏菌属、大肠埃希氏菌、甲型副伤寒希氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌、大肠埃希沙门氏菌、大肠埃希氏菌、志贺氏菌属氏菌、志贺氏菌属现在学习的是第30页，共34页血清型分型鉴定血清型分型鉴定l抗原的准备抗原的准备lO抗原的鉴定抗原的鉴定用用A F多价多价O血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照，血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照，在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。lH抗原的鉴定抗原的鉴定lVi抗原的鉴定抗原的鉴定现在学习的是

32、第31页，共34页须强调的是须强调的是，虽然对沙门氏菌有各种新的分，虽然对沙门氏菌有各种新的分类方案，但通常仍惯用简单的通用命名，即类方案，但通常仍惯用简单的通用命名，即以该菌以该菌所致疾病所致疾病或或最初分离地名最初分离地名、或、或抗原式抗原式三种方式来命名。三种方式来命名。现在学习的是第32页，共34页群 别菌 型抗 原OHA甲型副伤寒沙门氏菌1,2,12a:-B乙型副伤寒沙门氏菌鼠伤寒沙门氏菌1,4,5,12b:1,2i：1，2C丙型副伤寒(猪霍乱)沙门氏菌6,7(Vi)c:1,5D伤寒沙门氏菌9,12,(Vi)d:-现在学习的是第33页，共34页沙门氏菌的快速筛检方法沙门氏菌的快速筛检

33、方法n显色培养基法显色培养基法 在选择性培养基的基础上，经进一步改良，使目标菌在此培养基上的菌落显在选择性培养基的基础上，经进一步改良，使目标菌在此培养基上的菌落显示出一定的颜色，便于识别。代表有示出一定的颜色，便于识别。代表有法国生物梅里埃公司的法国生物梅里埃公司的“SMID”(沙门氏菌为粉红色沙门氏菌为粉红色)法国科玛嘉的法国科玛嘉的“沙门氏菌显色培养基沙门氏菌显色培养基”(沙门氏菌典型菌落为紫色沙门氏菌典型菌落为紫色)。n免疫学方法免疫学方法酶联免疫吸附检测试验（酶联免疫吸附检测试验（ELISA）荧光抗体检测荧光抗体检测n分子生物学技术分子生物学技术DNA探针分析方法探针分析方法PCR技术技术现在学习的是第34页，共34页