临床检验基础知识点.doc
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1、临床检验基础知识点项目一任务1血液量:成人约占体重的68,平均血量5L左右。pH:7.357.45比密:1.051.06渗透压:290310mosm/KgH2O采血部位(1)手指采血:WHO推荐采取外周血以左手无名指或中指指采血部位尖内侧优点:方便、获较多血量结果比较恒定缺点:与静脉血仍存在某些差异。拇指、拇趾或足跟采血半岁以下婴幼儿皮肤完整处严重烧伤者任务二白细胞检验计数计算WBC/LN/41010620N/20109血涂片WBC密度与WBC的总数的关系WBC血涂片WBC个数/HP(47)109/L 24(79)109/L 46(1012)109/L 610(1318)109/L 10124
2、.减少计数域误差的措施3109/L扩大计数范围、缩小稀释倍数15109/L增加稀释倍数、适当减少加血量参考值:成人:(410)109/L儿童:(512)109/L新生儿:(1520)109/L6个月2岁:(1112)109/L血膜厚薄分布不均的原因:厚:血滴大,角度大,推片速度快薄:血滴小,角度小,推片速度慢分布不均:推片不整齐,用力不均匀,载片不清洁瑞氏染色对于细胞质成分,中性颗粒的染色效果好,但对细胞核和寄生虫着色能力略差吉姆萨染液对细胞核和寄生虫着色较好,对细胞质着色能力较差WBC百分率中性杆状核粒细胞15中性分叶核粒细胞5070嗜酸性粒细胞0.55嗜碱性粒细胞01淋巴细胞2040单核细
3、胞38(六) 异常白细胞形态1.中性粒细胞毒性变化:大小不均中毒颗粒空泡形成杜氏小体退行性变核棘突2.棒状小体(Auerbody)中性粒细胞毒性变化中性粒细胞的核象变化中性粒细胞胞核异常形态:多分叶核中性粒细胞双核中性粒细胞胞环形杆状核中性粒细胞巨多分叶核中性粒细胞巨杆状核中性粒细胞1、中性粒细胞核左移:外周血中杆状核超过5和(或)出现杆状核以前的细胞为核左移。常见于化脓性感染、急性溶血以及应用细胞因子等,常伴有中毒颗粒、空泡形成、退行性变等毒性变化。核左移多伴有白细胞总数增高,但也可正常甚至减少。再生性核左移:核左移伴白细胞总数增高称为再生性核左移,提示骨髓造血功能和释放能力旺盛,机体抵抗力
4、强等。退行性核左移:核左移伴白细胞总数正常或减少称为退行性核左移,提示骨髓释放功能受到抑制,机体抵抗力差。核左移分为轻、中、重度三级,与感染的严重程度和机体的抵抗力密切相关。2、中性粒细胞核右移:外周血中性粒细胞五叶核以上者超过3称为核右移。严重核右移常伴有白细胞总数减少,提示骨髓造血功能衰退,与缺乏造血物质、DNA合成障碍和骨髓造血功能减退有关。核右移常见于巨幼细胞性贫血、内因子缺乏所致的恶性贫血、感染、尿毒症、MDS等,应用抗代谢药物治疗肿瘤时也会出现核右移。淋巴细胞计数1、淋巴细胞数量变化:增多:某些病毒或细菌所致的急性传染病某些慢性感染:肾移植术后:LC性白血病:再生障碍性贫血、粒细胞
5、缺乏症:减少:主要见于接触放射线及应用肾上腺皮质激素。2、淋巴细胞形态学变化:异型淋巴细胞:在传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、流行性出血热、湿疹、过敏性疾病等病毒性感染或过敏原刺激下,可使淋巴细胞增生,并出现某些形态变化。I型浆细胞型胞浆中含有小空泡或呈泡沬状。II型单核细胞型胞核不规则似单核。III型未成熟细胞型染色质细致呈网状排列,可见12个核仁。嗜酸性粒细胞1生理变化:劳动、饥饿、寒冷、精神刺激等嗜酸性粒细胞减低日间变化:正常人嗜酸性粒细胞白天较低,夜间较高上午波动较大,下午比较恒定2.病理性变化:嗜酸性粒细胞增多:0.5109/L寄生虫病:蛔虫、钩虫、绦虫等过敏性疾病:次于寄生虫病的
6、另一病因,嗜酸性粒细胞常(12)109/L如:支气管哮喘、荨麻疹、药物或食物过敏、血管神经性水肿、过敏性肺炎等某些皮肤病:湿疹、剥脱性皮炎、银屑病等.血液病:慢粒、嗜酸性粒细胞性白血病等.某些恶性肿瘤:胃癌、肺癌、结肠癌、何杰金淋巴瘤.某些传染病:猩红热(乙型溶血性链球菌).某些内分泌疾病:脑垂体功能低下及原发性肾上腺皮质功能不全等(2).嗜酸性粒细胞减少:传染病急性期:伤寒、副伤寒 严重组织损伤:手术后应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后凝剂的原理及适用范围 任务三红细胞检查形态:无核,双凹圆盘形 平均直径7.2um 。在高渗溶液中,皱缩呈锯齿形;在低渗溶液中,肿胀甚至破裂,血红蛋白逸出,
7、成为影细胞。 【参考范围(range )】成年女性:(3.55.0)2/L 成年男性:(4.05.5)2/L 新生儿:(6.07.0)2/L1、病理性增多相对性增多:血浆水分丢失,有形成分相对增加, 绝对值没有发生变化绝对性增多:继发性(心、肺疾病、异常血红蛋白病、某些肿瘤等);原发性(真性红细胞增多症) 2、病理性减少骨髓造血功能低下(再障);造血原料缺乏(缺铁贫、巨幼贫);红细胞破坏增加(溶贫);红细胞丢失过多 任务四血红蛋白测定血红蛋白是人体有核红细胞及网织红细胞内合成的含色素辅基的结合蛋白质,由珠蛋白和亚铁血红素组成。 HbA 成人主要血红蛋白 90以上抗凝剂 原理 适用范围不适用范围
8、EDTA 盐 与钙螯合血常规检查、Hct 、Plt 计数凝血检查、血小板功能检查肝素 阻止凝血酶形成、抑制血小板聚集,不与钙离子螯合 RBC 脆性试验、Hct 及细胞培养等 WBC 和Plt 计数、血涂片检查、凝血象检验 枸橼酸钠 与钙螯合血栓止血、血液保养液、红细胞沉降1:4 凝血功能 血细胞计数,Hct 草酸盐草酸根与血液中钙离子生成草酸钙沉淀与血液比例1:9凝血检查HbA2成人次要血红蛋白2-3HbF胎儿血红蛋白2以下Hb主要存在形式HbO2(二)Hb的测定:ICSH推荐氰化高铁血红蛋白测定法(HiCN)1.原理:Hb是色素蛋白,在血液中以多种形式存在,利用高铁氰化钾将Hb氧化成高铁血红
9、蛋白(Hi),Hi可与CN结合成氰化高铁血红蛋白,在540nm处有一吸收峰,用分光光度计测定其吸光度,换算成每升血液中血红蛋白的含量。方法学评价(1)氰化高铁血红蛋白测定法优点:操作简单、显色稳定,便于推广。转化液较稳定,易保存。除SHb外各Hb均可测读A后直接计数。HiCN参考品可长期保存,便于质控。缺点:KCN剧毒,易污染环境,处理废液用次氯酸钠或氢氧化亚铁。不能测SHb,HbCO转化慢。遇高球蛋白血症或高球蛋白试剂混浊。(2)十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法SDS能破坏WBC,摩尔消光系数未定。(3)碱羟血红蛋白测定法:HbF不能转化,最大吸收峰在575nm。(4)叠氮高铁Hb测定法:具有与
10、HiCN法相似的优点,但仍存在试剂污染。(5)溴代十六烷基三甲铵血红蛋白测定法:精密度、准确性略低。4.参考值男:120160g/L女:110150g/L新生儿:17020_g/L任务5血细胞比容测定四、红细胞比容测定红细胞比容(Hct或PCV)是指在一定体积全血中RBC所占容积的相对比例,与RBC数量和平均体积有关。(一)检测方法1.离心沉淀法:温氏法、微量法折射法RCF=1.11810-5_有效离心半径(cm)(r/min)22.血液分析p 仪法:(二)温氏法的试剂、器材和质量控制(四)参考值男:0.3800.508女:0.3350.450(五)临床意义1.HCT降低:各种贫血稀释血症2.
11、HCT增高:血浆丢失RBC量增加任务6红细胞平均值1.平均红细胞容积:MCV。MCV单位(fL)1fL= 1015L MCV=(Hct/RBC)10-15fl2.平均红细胞血红蛋白含量:MCH MCH 单位(pg)1pg= 10-12g MCH=(Hb/RBC)10-12pg3.平均红细胞血红蛋白浓度:MCHC 单位(g/L) MCHC=(Hb/Hct)MCV(fL) MCH(pg) MCHC(g/L)成人80100 2634 32036013岁79104 2532 280350新生儿86120 2736 250370老年人81103 2735 310363贫血的红细胞形态学分类形态学分类MC
12、V MCH MCHC 临床意义正常细胞性正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障碍性贫血、白血病大细胞性增高增高正常叶酸、维生素B12缺乏或吸收障碍、巨幼细胞性贫血单纯小细胞性降低降低正常慢性炎症、尿毒症小细胞低色素性降低降低降低缺铁性贫血、地中海性贫血、慢性贫血任务7血小板计数胞体:圆形、椭圆形或不规则形胞质:淡蓝色或粉红色,中心部位有细小的紫红色颗粒,无核,常35成群聚集成团寿命:714天(三)功能主要功能:1粘附、2聚集、3释放、4参与凝血、5血块收缩、/6血小板对纤溶的作用。PLT/LN10100106N109【参考值】(100300)109/L 危急值 【临床意义】1.生理性变化:正常
13、人晨间较低,午后略高;春季低、冬季略高;平原居民低,高原居民略高。妇女月经前低,月经后上升;妊娠中晚期升高,分娩后12天降低。剧烈活动和饱餐后高、休息后恢复。2.病理性变化:PLT数减低:PLT生成障碍:AA、AL、恶性肿瘤放化疗后等PLT破坏过多:ITP、脾亢PLT消耗过多:DIC、血栓性血小板减少性紫癜等PLT分布异常:脾肿大PLT数增多:先天性增多:PLT减少症、巨大PLT综合征原发性增多:慢性粒细胞性白血病;真性红细胞增多症反应性增多:急性化脓性感染;急性出血;脾切后异常血小板形态1、大小异常大血小板:d 47m小血小板:d 1.5m2、形态异常:血小板颗粒减少血小板卫星现象血小板“粘
14、附”红细胞3、分布情况:正常成人血小板成簇或成团,散在少见血小板不聚集血小板减少或血小板无力症血小板过度聚集血小板增多或原发性血小板增多症,骨髓纤维化,慢性粒细胞白血病等任务8血细胞分析p 仪血细胞分析p 仪检测原理p70白细胞分类原理三分类:电阻抗法1电阻抗法:溶血处理后白细胞体积,区别小细胞群(L),中间细胞群(M、E、B)和大细胞群(N)2光散射与细胞化学计数联合白细胞分类计数过氧化物酶染色:活性E、N、M依次降低,L、B无活性3容量、电导、光散射(VCS)白细胞分类法,电阻抗法测量体积V,高频电磁针测量细胞内部结构电导C,光散射S区别细胞颗粒的结构和颗粒的质量1、电阻抗法(库尔特原理,
15、三分群血细胞分析p 仪):悬浮在电解质溶液中的血细胞相对于电解质溶液是非导电的颗粒,当体积不同的血细胞(或类似颗粒)通过计数小孔时,可引起小孔内外电流或电压的变化,形成与血细胞数白细胞计数和分类计数原理:2、仪器将体积为35450fL的血细胞,分为256个通道(channel)量相当、体积大小相应的脉冲电压,从而间接区分出血细胞群,并分别进行计数。血细胞直方图(histogram):是指血液分析p 仪计数细胞数量时,以血细胞体积大小为横坐标不同体积细胞的相对频率为纵坐标,来表示细胞群体的分布情况的曲线图形。红细胞体积平均分布宽度(RDW):是红细胞体积异质性的参数,是反映红细胞大小不均的客观指
16、标。其增大提示存在红细胞大小不均的混合细胞群。【参考值】RDW-CV:11.514.5。RDW-SD:425 fl。电阻抗型血液分析p 仪,在35450 f l范围内将白细胞分为3群。正常白细胞分布直方图的左侧高陡,通道在3595 fl 为小细胞峰群(主要是淋巴细胞);通道在160450 fl 为大细胞峰群(主要为中性粒细胞);左右两峰之间较平坦区有一个小峰,为中间细胞群(主要是单个核细胞,以单核细胞为主,也含有嗜酸/嗜碱粒细胞)(二)红细胞直方图正常红细胞直方图是一条近似正态分布的单峰曲线,通常位于36360 fl 范围内,横坐标表示RBC体积,纵坐标表示不同体积红细胞出现的频率。正常红细胞
17、集中在5020_fl 范围内,可见两个细胞群体:一个是红细胞主群,从50125 fl ,为一个两侧基本对称、较狭窄,呈现倒扣钟状的正态分布曲线;另一群是大细胞群,位于主群右侧不与_轴重合拖尾部分,分布在125 fl 20_fl 区域,又称“足趾部”,是一些大红细胞、网织红细胞、红细胞的二聚体、多聚体及白细胞的混合物。(三)血小板直方图正常血小板直方图是一个偏态分布的单峰光滑曲线,通常在230fl范围内,主要集中在215fl。当血标本中存在大血小板、血小板聚集、小红细胞、红细胞碎片时,可出现异常血小板直方图。Mpv血小板平均体积:血小板减低,mpv增高:外周血血小板破坏过多Mpv减低,骨髓病变项
18、目二任务1嗜酸性粒细胞直接计数五分类血细胞分析p 仪是目前最有效的嗜酸性粒细胞计数的检验方法若大手术或大面积烧伤,嗜酸性粒细胞不减低或减低很少,表明预后不良任务2红斑狼疮细胞检查LE形成需要的条件:患者血清中存在LE因子受损或退变的细胞核,即被LE因子作用的核具有吞噬活性的白细胞任务4红细胞形态学检查红细胞中出现异常结构(1)嗜碱性点彩红细胞:瑞氏染色后,胞质内出现形态不一的蓝色颗粒(RNA ),属于未完全成熟红细胞,颗粒大小不一、多少不等,原因为重金属损伤细胞膜,使嗜碱性物质凝集,或嗜碱性物质变性,或血红蛋白合成中阻断原卟啉与铁结合。见于铅中毒(2)豪焦小体(Howell-Jolly sbo
19、dy 、染色质小体):成熟红细胞或幼红细胞胞质内含有一个或多个直径为12m 暗紫红色圆形小体,为核碎裂、溶解后的残余部分。见于脾切除后、无脾症、脾萎缩、脾功能低下、红白血病、某些贫血(如巨幼细胞性贫血)。(3)卡波环:在嗜多色性、碱性点彩红细胞胞质中出现紫红色细线圈状结构,呈环形、8字形,为核膜残余物、纺锤体残余物(电镜下,可见形成纺锤体的微细管着色点异常)、脂蛋白变性物。见于白血病、巨细胞性贫血、增生性贫血、铅中毒、脾切除后。(4)寄生虫:红细胞胞质内可见疟原虫、微丝蚴、杜利什曼原虫等病原体。 (5)有核红细胞:既幼稚红细胞 任务5网织红计数介于晚幼红和成熟红细胞之间未完全成熟的RBC 。胞
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